刺葡萄酒用种质筛选及其发酵过程中活性物质变化研究

为了挖掘适于黄河故道产区种植的刺葡萄酒用种质,该试验于2020年对郑州果树所7种刺葡萄果实品质指标(理化成分、酚类物质含量、抗氧化活性和颜色指标)进行检测和主成分分析,2021年对筛选品种刺葡萄酒和参照果酒(巨峰和马瑟兰葡萄酒、石榴酒)质量指标(基础指标、活性物质含量和抗氧化能力)进行检测分析并探究刺葡萄酒发酵过程中活性物质含量变化规律。结果表明,湘珍珠红叶刺葡萄果实体积小、偏红色色调且饱和度更高,皮果比、可溶性固形物和酚类物质含量以及抗氧化活性均处于最高水平;湘珍珠红叶刺葡萄酒酒精度、活性物质含量和抗氧化能力均高于本土鲜食水果酿制的巨峰葡萄酒和石榴酒,其总酚、总黄烷醇和总花色苷含量以及DPPH清除力显著高于欧亚种马瑟兰葡萄酒;发酵结束时,刺葡萄酒花色苷和黄烷醇含量仍处上升趋势,后续可对浸渍条件持续优化。综上所述,湘珍珠红叶刺葡萄作为酒用品种适于在黄河故道产区推广种植。     

发酵牦牛肉成熟过程中挥发性香气成分的变化

为探讨发酵牦牛肉挥发性香气成分在成熟过程中的变化规律,本文采用固相微萃取法（SPME）对各取样点样品中挥发性物质进行提取,利用气相-嗅闻-质谱联用法对其中的挥发性成分进行定性和定量分析。总计有84种挥发性成分被鉴定,其中,经嗅闻鉴定的香气活性化合物有48种,包括烃类（12）、醇类（8）、酮类（7）、醛类（3）、酸类（3）、含硫化合物（2）、酯类（4）、含氮类化合物（7）和酚类（2）。在成熟过程中,烃类和酮类含量整体呈现波动变化。醛类和酯类含量在成熟前期增加,而后又降低。酸类和吡嗪类形成于成熟过程,含量逐渐增加。烃类是成品发酵牦牛肉风味组成中含量最高的,其次是醇类、酮类及吡嗪类化合物。香辛料的添加、氨基酸的降解及微生物的代谢对发酵牦牛肉的香气形成具有重要作用。      

中国野生刺葡萄（Vitis davidii Foex）及其单品种葡萄酒中花旗松素含量分析

利用高效液相色谱-串联质谱联用技术对原产中国的野生刺葡萄果实的果皮、果肉、种子及单品种葡萄酒中的花旗松素含量（以鲜质量计算）进行测定与分析。结果表明：刺葡萄果实果皮中花旗松素含量最高,其含量在刺葡萄黑、白果实中分别为（2.44±0.18）、（2.03±0.14） mg/kg,在种子中分别为（1.66±0.13）、（1.38±0.12） mg/kg,果肉中含量最低,分别为（0.36±0.02）、（0.25±0.02） mg/kg。刺葡萄黑、白果实中各个部位花旗松素含量均无明显差异,但对照品种黑色果实果皮中的花旗松素含量显著高于白色果实,这说明花旗松素含量的高低与葡萄果皮颜色并无直接关系。在单品种酒中,白葡萄酒由于酿造工艺不同,果皮和种子中的花旗松素无法进入酒中,花旗松素含量仅为红葡萄酒的20%;葡萄酒中的花旗松素含量略低于果实是因为提取果实中花旗松素的溶剂是甲醇,而葡萄酒中只是水和乙醇的自然浸渍。     

黄桃酒发酵过程中风味物质的变化

为了研究黄桃酒发酵过程中风味物质动态变化,本研究采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析风味物质,结合香气活力值(OAV)确定主要风味物质。结果表明,发酵7 d制备的黄桃酒,酒精度14.50%(v/v)、总酸31.54 g/L、可溶固形物12.37 °Brix、总黄酮1.08 g/L。感官评价表明,所制备黄桃酒保留了桃果实的清香,同时又有酒的醇香和酯香。顶空固相微萃取-气相色谱与质谱联用(HS-SPME/GC-MS)结合分析得到:发酵过程中共检测出70种风味物质,含量较多的是酯类(29种)、醇类(15种);发酵过程中风味物质种类变化不大,但每类风味物质含量却有较大变化。酯类、醇类物质含量在主发酵过程中呈递增趋势,后熟时趋稳;醛类、酮类和酸类物质含量逐渐减少。通过计算香气活力值(OAV)确定16种物质对黄桃酒风味贡献较大,其中辛酸乙酯、γ-癸内酯和右旋萜二烯对黄桃酒香气贡献最大,活力值大于20。在发酵过程中,酯类、醇类物质的增加赋予黄桃酒浓郁的酒香,同时保留了黄桃的特征香气物质。     

蓝莓叶多酚组成成分分析

通过特征颜色反应、紫外-可见光谱、傅里叶红外光谱、高效液相色谱-质谱(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)法对蓝莓叶多酚样品进行定性分析。结果表明:蓝莓叶多酚中含有羟基、糖基、苯环、甲氧基和含氧杂环等特征基团。蓝莓叶多酚在醇溶液中最大吸收波长分别在354 nm和748 nm处。通过HPLC-MS的保留时间和多酚单体的一、二级质谱图分析,并与标准的质谱数据和保留时间比较,得知蓝莓叶多酚中有5种多酚单体,分别为表儿茶素没食子酸酯、绿原酸、甲基-芥子酸-己糖苷、5-O-阿魏酰奎尼酸、槲皮素3-O-葡萄糖苷。     

辣椒发酵过程中挥发性成分变化研究

以新鲜辣椒为原料,制作发酵辣椒。测定新鲜辣椒中水分、还原糖和VC的含量,再利用固相微萃取法和气相色谱-质谱联用技术对新鲜辣椒与不同发酵时间的发酵辣椒的挥发性成分进行测定。结果表明,新鲜辣椒中水分含量为64%,还原糖为2.9mg/100g,VC为1.21mg/100g。辣椒发酵期间共鉴定出8大类共65种挥发性成分,包括酯类(19种)、烯烃烷烃类(15种)、醇类(13种)、醛类(8种)、杂环化合物(4种)、酸类(3种)、酮类(2种)、醚类(1种)。随着发酵的进行,起初原料辣椒中烷烃烯烃类、酸类、醛类、杂环化合物的含量均有减少,同时醇类与酯类物质含量有所增加,而后各类成分在种类上都有不同程度的增加,而在总量上更趋近于平均,发酵后期新增酮类、醚类等风味物质,逐渐形成发酵辣椒独特的风味。     

新疆赤霞珠葡萄酒发酵过程中生物胺含量的变化

利用高效液相色谱技术分析葡萄酒发酵过程中8种生物胺含量的变化。结果表明,葡萄酒发酵过程中8种生物胺总含量整体呈上升趋势。色胺含量最高,最高可达到98.03 mg/L;腐胺和组胺含量较低,含量均不超过2.48 mg/L;精胺和亚精胺含量变化相对平稳,波动范围在1.81～3.07 mg/L之间,除色胺外,其他生物胺含量均不超过4.50 mg/L。苯乙胺、尸胺、酪胺等在酒精发酵后期和苹果酸-乳酸发酵初期大幅上升,在苹-乳发酵后期,酪胺和亚精胺含量有所下降,其他生物胺含量均有一定程度上升。     

银杏葡萄酒陈酿过程中香气成分的变化

采用溶剂萃取法萃取香气成分,气质联用仪进行检测,结合计算机检索技术对分离化合物进行鉴定,在葡萄酒发酵过程中添加银杏叶提取物与未添加的葡萄酒香气成分及香气成分在陈酿过程中变化进行对比研究。共分离出32 个峰,鉴定出29 种成分,其中主要包括醛类、醇类、酯类和呋喃类芳香成分。对照葡萄酒和银杏葡萄酒在开始陈酿和陈酿1 年后对比分析结果表明：银杏提取物的添加对葡萄酒的香气成分有一定影响,但经过1 年陈酿后,银杏葡萄酒与对照葡萄酒香气成分差异缩小,主要香气物质在种类和含量上都比较接近。     

反复冻融对葡萄酒中酚类物质的影响

近年来,葡萄酒以其独特的风味与诸多保健功能而备受消费者青睐。酚类物质作为葡萄酒中重要的组成成分,对于葡萄酒的感官品质以及营养价值都有着极其重要的贡献。然而,受限于现阶段的生产和运输条件,葡萄酒在生产、运输和贮藏过程中可能会经历反复的冷冻和融化（冻融）。本研究采用高效液相色谱-三重串联四极杆质谱联用仪（HPLC/QqQ-MS/MS）对反复冻融0～5次的葡萄酒样品（5款红葡萄酒、3款白葡萄酒）中的酚类物质进行分析。结果表明,随着冻融循环次数的增加,总花色苷含量呈现逐渐降低的趋势,且酰基化花色苷的降解速率低于未酰基化的花色苷;对其它酚类物质来说,反复冻融可能会促进单宁类物质降解形成某些单体酚,而其它非花色苷酚类物质含量基本保持不变。结论：在葡萄酒的生产和储运过程中,应尽量避免反复冻融或者减少冻融次数,以保证葡萄酒的品质。     

液态绿茶酒发酵过程中酚类物质的含量变化及发酵影响因素分析

以信阳毛尖绿茶为主要原料生产液态发酵型茶酒,研究发酵过程中酚类物质的含量变化,并通过单因素实验对酚类物质在不同的发酵温度、蔗糖添加量、SO2添加量及pH条件下的保存率进行了比较与分析。结果表明,发酵温度对酚类物质含量的影响较明显,呈负相关;蔗糖添加量较高时酚类物质含量下降;pH<4时酚类物质含量较低;茶酒发酵可以适当降低SO2的使用量。正交优化实验结果表明,酚类物质在一定含量范围内,茶酒的感官质量较好,是影响其感官质量的重要因素之一。茶酒中总酚含量和感官评分值间并不存在正相关性。      

桑叶葡萄和刺葡萄果皮中酚类物质的组成分析

采用超声波辅助法,利用甲醇从桑叶葡萄和刺葡萄果皮中提取花色苷,利用乙酸乙酯从两种葡萄果皮中提取非花色苷,液质联用定性定量分析两种葡萄果皮中花色苷及非花色苷酚的组成。桑叶葡萄果皮共检测出花色苷20种,非花色苷酚6种。刺葡萄果皮中共检测出花色苷6种,非花色苷酚15种。刺葡萄果皮中主要的花色苷是花翠素3,5-二葡萄糖苷和二甲花翠素3,5-二葡萄糖苷,而桑叶葡萄果皮以二甲花翠素3,5-二葡萄糖苷和3'甲基花翠素-3,5-二葡萄糖苷为主。两种野生葡萄果皮中主要的非花色苷酚是阿魏酸酒石酸酯及其衍生物,阿魏酸己糖酯和槲皮素-3-O-鼠李糖苷,刺葡萄果皮中非花色苷酚的含量比桑叶葡萄中的多。     

湖南刺葡萄酒主要呈香物质的分析

采用顶空固相微萃取（HS-SPME）结合气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）,对湖南省3个品种刺葡萄（米葡萄、涩葡萄和甜葡萄）酒的挥发性组分进行了检测,并根据定量结果和各物质的感官阈值对每种物质的香气活性值（OAV）进行计算。结果表明,3个品种刺葡萄酒中共检出挥发性组分90种,主要包括高级醇类、酯类、萜烯类及C6类化合物等。OAV＞1的挥发性组分有21种,包括β-大马士酮、异戊酸乙酯、丁酸乙酯等。基于雷达图的分析结果表明,3个品种刺葡萄酒的香气轮廓较为相似,主要呈现果香、花香和甜香。     

刺葡萄汁与其它几种葡萄汁及葡萄酒的原花青素含量对比

采用铁盐催化比色法,对刺葡萄汁、巨峰葡萄汁以及几种商品葡萄汁和2种葡萄酒中的原花青素含量进行了对比测定。结果表明:刺葡萄汁中的原花青素含量为3147μg/mL,巨峰葡萄汁为1187μg/mL,Welch’s紫葡萄汁2476μg/mL,蒙娜丽莎干红葡萄酒2854μg/mL,长城干红葡萄酒2757μg/mL,可见刺葡萄汁中原花青素含量显著高于其它葡萄汁和葡萄酒中的含量。     

刺葡萄园土壤酿酒酵母的筛选及耐受性分析

从铜仁市刺葡萄园采集土样,采用涂布平板法、平板划线法、酵母浸出粉胨葡萄糖（YPD）培养基分离、纯化酵母,通过WL营养琼脂培养基筛选酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,并对其乙醇、糖、酸、温度及SO2耐受性进行分析。结果表明,共获得10株酵母菌株,其中菌株TR-2、TR-3、TR-6、TR-7、TR-10为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,且菌株TR-6、TR-10耐受性较好,均分别能在乙醇体积分数为16%、葡萄糖质量浓度为500 g/L、柠檬酸质量浓度为30 g/L、SO2质量浓度为250 mg/L的YPD液体培养基和高温45 ℃、低温5 ℃条件下生长繁殖。     

半制备型高效液相色谱法分离刺葡萄花色苷单体

经大孔吸附树脂HP-20纯化刺葡萄花色苷的粗提物后,以半制备型高效液相色谱法分离得到高纯度的刺葡萄花色苷单体。以XCharge C18柱（20 mm×250 mm,10 μm）制备柱,考察梯度洗脱条件、流动相流速、进样量对刺葡萄花色苷分离的影响,确定了最佳制备条件为甲醇-3%甲酸溶液流动相梯度洗脱、流速15 mL/min、进样量1.2 mL,实现了2 种主要花色苷单体的分离及制备。经超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱鉴定,2 种花色苷单体分别是锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷和锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷-香豆酰,产品纯度分别达到了99.54%和98.28%。方法具有简单易行、经济快速、易于放大等特点,适用于刺葡萄花色苷标准品的大规模制备。     

大孔树脂对刺葡萄酒渣中提取的白藜芦醇的纯化工艺研究

通过静态吸附-解吸试验从6种大孔树脂中筛选出最适合刺葡萄酒渣中白藜芦醇纯化的大孔树脂,并对其进行静态、动态吸附-解吸工艺条件优化,结果表明：供试树脂中,大孔树脂H103为最适树脂,其静态吸附-解吸最优条件为：上样液质量浓度为0.65 mg/mL,上样液pH值为3,洗脱液为体积分数70%乙醇;动态吸附-解吸最优条件为：上样流速1.5 mL/min,上样液体积6 BV;洗脱流速0.5 mL/min,洗脱液体积6 BV,在此条件下,树脂H103对白藜芦醇的吸附量为55.7 mg/g,解吸率为89.86%,经树脂H103纯化后,样品纯度由11.54%提高至59.76%。     

负载量及套袋对酒用刺葡萄果实酚类物质和香气的影响

以刺葡萄（Vitis davidii）中的甜葡萄为材料,研究负载量及套袋对果实酚类物质和香气物质的影响,以期为高质量酒用刺葡 萄的生产提供理论基础。结果表明,不同负载量处理的果实总酚、总花色素和总黄烷醇含量虽然存在年份间的差异,但总体上低负载 量（1 300 kg/亩）和中负载量（1 900 kg/亩）显著高于高负载量（2 500 kg/亩）（P＜0.05）;果实香气物质含量及种类均随负载量的降低而 增加。 除少数处理外,不套袋处理的果实总酚、总花色素、总黄烷醇含量及果实香气种类和总含量显著高于套袋（P＜0.05）。 不套袋、 低负载量处理表现最优,显著地提高了果实总酚、总花色苷、总黄烷醇含量（P＜0.05）,对香气总量和醛酮类物质均有显著的提升作 用（P＜0.05）。 因此刺葡萄低负载量（结果枝平均留1个果穗）和果实不套袋是生产刺葡萄酒果实的最佳方案。     

Application of high‐power ultrasounds during red wine vinification

Wine colour is one of the main organoleptic characteristics influencing its quality. It is of special interest in red vinifications due to the economic resources that wineries have to invest for the extraction of the phenolic compounds responsible for wine colour, compounds that are mainly located inside the skin cell vacuoles, where the volatile compounds are also found. The transfer of phenolic compounds from grapes to must during vinification is closely related to the type of grapes and the winemaking technique. During traditional winemaking, grapes are crushed and skin macerated for several days, with pumps overs to facilitate the colour extraction. To increase this extraction, some chemical (maceration enzymes) or physical technologies (thermovinification, cryomaceration, flash‐expansion) can be applied. In this work, a new methodology has been tested. This methodology consists in the application of high‐power ultrasounds to crushed grapes to increase the extraction of phenolic compounds. Crushed grapes were treated with this non‐thermal technology and vinified, with 3, 6 and 8 days of skin maceration time, and the results were compared with a control vinification, where crushed grapes were not subjected to any treatment and were skin macerated during 8 days. The wine chromatic characteristics (determined spectrophotometrically) and the individual phenolic compounds (anthocyanins and tannins, determined by HPLC) were followed during the maceration period, at the end of alcoholic fermentation and after two months in bottle. Also, the wine volatile compounds were determined by GC‐MS. The wines made with ultrasound‐treated grapes showed differences with the control wine, especially regarding total phenol content and tannin content. The wines elaborated with sonicated grapes and with only three days of skin maceration time presented similar concentration of anthocyanins and twice the concentration of tannins than control wines elaborated with 8 days of skin maceration.     

Polyphenols and colour variability of red wines made from grapes harvested at different ripeness grade

Several red wines were elaborated in order to study the influence of the grape harvesting date (degree of maturity of the grape) on their chromatic characteristics and polyphenolic contents. Wines made from two grape varieties, at three different harvesting dates and from two consecutive vintages, were selected for this study. The results showed that the harvesting date of grapes (directly correlated with the degree of maturity of the grapes), influenced the chromatic characteristics of the wines, although their polyphenolic compositions were clearly different, especially in Cabernet Sauvignon wines. In general, higher intensities of blue or violet tones were detected in wines made from the grapes collected on the second harvesting date, in which the ratios anthocyanins/proanthocyanidins and anthocyanins/(proanthocyanidins + catechins) were the lowest. These ratios are proposed as probable indicators of the aptitude for wine ageing.