Aspergillus niger C15产柚苷酶发酵条件的优化研究

通过正交实验对黑曲霉菌株C15产柚苷酶的发酵条件进行了优化。实验结果表明,Aspergillus niger C15菌株的最优产酶发酵条件为:2%桔皮粉、6%豆粕粉,250mL三角瓶中装料30mL,接种量3%,最适初始pH为5.0,30℃条件下培养100h,产酶量可达1395.9U/mL。与原始产酶条件相比,产酶量提高8.6%。不同的金属离子对产酶有不同的作用,添加适量的K2HPO4、MgSO4对产酶有明显的促进作用,CuSO4、FeSO4对产酶起抑制作用。      

黑曲霉S-05产柚苷酶液态发酵培养条件的优化

以黑曲霉(Aspergillus niger S-05)菌株作为实验材料,采用摇瓶发酵方法,以α-L-鼠李糖苷酶、β-D-葡萄糖苷酶、柚苷酶三酶酶活为评价指标,对其液态发酵条件进行了研究.优化后的培养条件为:2.0%豆粉、0.5%蔗糖、0.05%柚苷、0.6%MgSO4·7H2O、0.2%吐温-80、培养温度26℃、pH5.0,250mL三角瓶装量30mL、转速190r/min.此时柚苷酶酶活达到429.09U/mL,比优化前的基础培养基(137.78 U/mL)提高了2.1倍.     

黑曲霉产柚苷酶的发酵条件优化

利用高效液相色谱法,检测发酵液中α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的活力,考察碳源、pH值、搅拌转速、发酵温度对柚苷酶产量的影响,对黑曲霉DB056产柚苷酶的7L罐发酵工艺进行优化.研究结果表明,以20g/L柚皮苷为唯一碳源,发酵黑曲霉DB056产柚苷酶的效果最佳.发酵过程的pH值、搅拌转速和发酵温度的最优控制值分别为6.0、700 r/min和32℃,此时产酶效果最理想,发酵过程α--鼠李糖苷酶和柚苷酶最大酶活力分别达到1 133.00和788.42U/mL.将优化的发酵工艺放大到200 L发酵罐进行试验,α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的最大酶活力分别为1 069.30 U/mL和727.44 U/mL.中试放大效果良好.     

产柚苷酶黑曲霉SL2K发酵条件优化

该研究以黑曲霉（Aspergillus niger）SL2K为研究对象,对其产柚苷酶的液态发酵条件进行优化。 通过单因素试验对碳源、氮 源、诱导物、接种量、初始pH值和培养时间进行考查,在单因素基础上,选取麸皮粉添加量、蛋白胨添加量、接种量、初始pH值4个因素 进行4水平正交试验优化。 结果表明,优化后的产酶发酵条件为麸皮粉添加量3%,蛋白胨添加量5%,接种量8%,初始pH值为5.0,鼠李 糖0.08%、KH2PO4 1 g/L,KCl 0.5 g/L,MgSO·4 7H2O 0.5 g/L,FeSO4 0.01 g/L,装液量为100 mL/250 mL,摇床转速180 r/min,培养温度28 ℃, 培养时间96 h。 在此优化条件下,柚苷酶活力为233.89 U/mL,是优化前的2.13倍。     

黑曲霉液态发酵产柚苷酶的分离纯化及其性质研究

本文针对黑曲霉液态发酵所产柚苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究。将黑曲霉液态发酵所产酶液,依次通过30%~70%硫酸铵盐析、膜透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析后得到高纯度柚苷酶。经SDS-PAGE凝胶电泳仅得到一条清晰条带,分子量约为65.10 ku。纯化获得的柚苷酶比酶活可达6932.54 U/mg,纯化倍数和酶活回收率分别为13.82倍和13.30%,并且能有效水解柚皮苷。进一步研究发现,该酶的最适反应p H为4.5,最适作用温度为50℃,在20℃~50℃及p H 3.0~6.0范围内有良好的稳定性。在一定浓度范围内,K+、Ca2+和Na+对柚苷酶活性有促进作用,而Fe3+、SDS和EDTA-Na2对其活性有明显的抑制作用。本研究为深入理解柚苷酶分离纯化过程,明确其酶学性质,进一步探索柚苷酶应用于天然活性产物生物转化过程的相关机制提供了基础数据,具有非常重要的科学意义和潜在的应用价值。     

黑曲霉TC-01产柚苷酶对柚皮苷酶解作用的研究

柚皮苷是一类主要的类黄酮物质,它是引起柚类和葡萄果实苦味的主要来源,去除柚皮苷会使果汁苦味减轻,而柚皮苷酶能在不影响柑橘果汁品质的前提下较好地去除苦味。但是由于不同来源的柚苷酶的结构不同,其催化特性也不尽相同,本文通过利用前期筛选的黑曲霉(Aspergillus.niger TC-01)产柚苷酶对柚皮苷酶解作用进行研究,实验采用高效液相色谱法测定柚皮苷、普鲁宁和柚皮素的三者之间含量变化,确定酶解最适温度、时间、pH及酶用量,并测定TC-01产柚苷酶的米氏常数以确定酶解反应的最佳条件。结果表明,TC-01产柚苷酶酶解最适温度为60℃、酶解最适时间为30-40min,最适pH4.0,酶最佳用量为24u/mL。米氏方程为Y=0.0018X-3.0×10-6,其中Km值为598.8ug/mL,Vmax=2.06g/(min.mL)。此研究结果为柚苷酶的应用提供了理论依据。     

黑曲霉HZG-7菌株产柚苷酶的研究

柚皮苷是柑桔汁及其加工制品中的主要苦味物质。通过筛选得到一株能向胞外分泌柚苷酶的黑曲霉菌株 HZG- 7。实验结果表明 :在 30℃ ,1 50 r/min,p H=5.0的条件下培养 1 0 8h,菌株分泌的柚苷酶活力可达到 635U/ml。利用此酶在 40℃ ,p H=4.0的条件下对柑桔汁进行脱苦处理 ,其柚皮苷含量大幅度下降 ,达 71 %以上 ,苦味基本消失。      

黑曲霉HZG-7菌株产柚苷酶的研究

柚皮苷是柑桔汁及其加工制品中的主要苦味物质。通过筛选得到一株能向胞外分泌柚苷酶的黑曲霉菌株 HZG- 7。实验结果表明 :在 30℃ ,1 50 r/min,p H=5.0的条件下培养 1 0 8h,菌株分泌的柚苷酶活力可达到 635U/ml。利用此酶在 40℃ ,p H=4.0的条件下对柑桔汁进行脱苦处理 ,其柚皮苷含量大幅度下降 ,达 71 %以上 ,苦味基本消失。     

黑曲霉(Aspergillus niger)产菊粉酶发酵条件的研究

以菊粉为唯一碳源,对样土进行产菊粉酶黑曲霉菌株的初筛,得到17株菌株。用跟踪测酶活的方法进行复筛,获得3株高产菊粉酶菌株,最高酶活达到25.41U·mL-1。然后探讨了不同碳源和氮源对黑曲霉产菊粉酶活力的影响,结果表明,最佳碳源为菊粉,氮源为酵母膏。通过正交实验,得到了优化的产菊粉酶黑曲霉液体发酵条件:菊粉用量为2%,pH5.0,250mL三角瓶中装培养基量为50mL,发酵温度为30℃。      

Penicillium sp.1523产柚苷酶摇瓶发酵培养基优化

采用单因素试验、Plackett-Burman设计和响应面分析相结合的方法,对Penicillium sp.1523产柚苷酶的摇瓶发酵培养基配方进行优化。单因素试验结果显示：发酵培养基中的最优碳源为玉米粉,最优氮源为豆饼粉;Plackett-Burman设计筛选出影响柚苷酶产量的3个重要因素为玉米粉、豆饼粉和柚苷,在此基础上运用最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法进行回归分析,获得最佳培养基配方为：玉米粉31.14g/L、豆饼粉31.53g/L、柚苷1.65g/L、K2HPO4 1.00g/L、ZnSO4 0.10g/L、MgSO4 ·7H2O 0.06g/L、CaCl2 0.10g/L。在优化后的条件下摇瓶发酵产柚苷酶酶活力为(891.79±6.33)U/mL,与模型预测值接近,发酵产酶量比优化前提高70.8%。     

黑曲霉2277菌株产纤维素酶最佳液体发酵条件的研究

对黑曲霉2277菌株产纤维素酶最佳液体培养条件进行了研究。结果表明,黑曲霉2277最适液体培养条件为:稻草粉(碳源)6%,豆饼粉(氮源)1%,初始pH6.0～6.5,培养温度28℃～30℃,一级培养时间120h,二级培养时间76h～84h,接种量10%,250mL三角瓶装液量75mL,摇床转速150r/min。在最适培养条件下,以DNS法对酶活进行定量分析,测得发酵液中CMC酶活达92.1μg/mL·min;以滤纸崩溃度对酶活进行定性分析,滤纸在94h内完全分解。     

木醋杆菌突变株产细菌纤维素发酵条件优化

对一株经紫外诱变手段筛选得到的细菌纤维素高产菌株木醋杆菌C544进行发酵条件和培养基成分研究,确定其产纤维素适宜温度范围为25℃-31℃,30℃时纤维素产量最高;适宜的初始pH值范围为5.5-7.0,在pH6.0时纤维素产量最高。优化出的培养基配方为：葡萄糖5.0%（w/v）、大豆蛋白胨0.9%（w/v）、Na2HPO4·12H2O0.8%（w/v）及柠檬酸0.5%（w/v）,在最佳发酵条件下纤维素最大产量可达7.79g/L,是优化前产量的3.52倍。另研究了甘露醇对此菌株产细菌纤维素的影响,发现当基础培养基中加入10%（w/v）甘露醇作为碳源时,发酵终点的pH值为4.50,对纤维素的合成有利,纤维素产量达到9.33g/L,是优化前产量的4.22倍。     

黑曲霉与普洱茶品质形成关系的探讨

普洱茶品质的形成是微生物(优势菌种黑曲霉)和酶系综合协调作用的结果,从普洱茶的化学成分、品质特征、渥堆发酵、功效、食品安全等方面作了分析,探明黑曲霉在普洱茶品质形成中具有重要作用.     

酒精制醋连续发酵工艺研究

介绍2L气升式反应器二级串连连续发酵生产食醋的工艺。为确定最初发酵条件，试验先用两个2L气升式反应器以6．3％食用酒精、4％黄浆水和水的混合物为发酵培养基在温度30℃条件下半连续发酵，充满系数0．77。当酸度达到要求时都改为连续发酵，同时对进料流量、通气速率进行了研究。得出在进料流量55mL／h、入口处食用酒精6．5％、黄浆水4．3％、通气速率0.188min^-1（vvm）、残留酒精浓度0．35g／100mL时酸度为4．87g／100mL、产酸速率为0．87g/L·h，产酸率76．6％（g/g）。     

红曲霉固态发酵产生红曲色素工艺研究

研究了以红曲霉为菌种，固体发酵法生产红曲色素的工艺。从产色素效果和原料的成本来考虑，选用大米做碳源。在发酵过程中添加氮源有利于色价的提高。红曲固态发酵最佳条件是接种量6％，米饭初始水分38％，发酵温度32-35℃，全过程发酵10d。     

玉米秸秆水解液生产燃料酒精的研究

通过对稀硫酸预处理玉米秸秆水解液发酵生产燃料酒精各因素进行分析，初步确定了利用奥默毕赤氏酵母的最适发酵条件：发酵温度为36℃，时间为60h，通风量为0．081／min,初始还原糖浓度为74．0g／1。在最适发酵条件下，乙醇产率为0．327g／g。在73．96g／1的水解液中添加20g／1葡萄糖会导致酵母发酵过程出现“二次生长”现象。     

OPTIMIZATION STUDY FOR THE PRODUCTION OF CITRIC AND GLUCONIC ACID FROM FIG WATER EXTRACT BY ASPERGILLUS NIGER IN SURFACE FERMENTATION

The production of citric and gluconic acid from fig extract by Aspergillus niger ATCC 10577 and A. niger B60 in surface fermentation was investigated. The strain 10577 gave higher concentration of citric and gluconic acid than strain B60. A maximum citric and gluconic acid concentration (20.5 and 97.0 g/L, respectively), citric acid yield (12%), biomass dry weight (18.5 g/L), and sugar utilization (85%) was achieved at an initial sugar concentration of 200 g/L and a pH of 7.0. On the other hand, the highest gluconic acid yield (79.7%) was obtained in culture grown at initial sugar concentration 100 g/L. The addition of 4% (v/v) methanol in the fig extract increased the concentration of citric and gluconic acid from 20.5 and 97.0 g/L to 30.7 and 145.5 g/L, respectively. Citric acid was separated from the gluconic acid by extraction with diethyl ether or ethyl acetate.     

黑曲霉液态发酵生产果胶酶的工艺条件初探

选用鲜苹果渣作为碳源,通过试验探索了黑曲霉液态发酵生产果胶酶的工艺条件。确定最适发酵培基的组成为:麸皮2.5g,鲜苹果渣1.5g,硫酸铵1.0g,K2HPO40.05g,KCl0.025g,MgSO4·7H2O0.025g,Na2SO40.025g,FeSO4·7H20微量,蒸馏水50mL;最佳发酵条件为:发酵时间5d,发酵温度30℃,起始pH2.0,接种量2.0%,装瓶量50mL,在250mL三角瓶中进行摇床振荡培养,最终果胶酶平均酶比活力达到37.91单位/mL。     

白腐菌Trametes versicolor产漆酶发酵条件的优化

对白腐菌Trametesversicolor产漆酶的发酵条件进行了研究,结果表明摇瓶培养产漆酶的最佳培养基组成为:可溶性淀粉2g/L,氯化铵1.2g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CaCl2·2H2O0.1g/L,VB10.001g/L,Tween802g/L,微量元素混合液7mL/L,愈创木酚0.015mmol/L,CuSO4·5H2O60μmol/L,pH3.5;最佳发酵条件为:在250mL三角瓶装50mL培养基,接种量(Φ8mm)2块,25℃,150r/min振荡培养10d时,漆酶活力达到862U/L,约是优化前的4倍。     

山楂果胶寡糖生成诱导条件的研究

探讨山楂果胶寡糖生成诱导条件,考察了Rapidase和粉末果胶酶在不同的酶解时间、底物浓度和加酶量的条件下对山楂果胶的分解效率及山楂果胶寡糖的生成动态.结果表明,两种果胶酶的酶解液中还原糖的含量在反应开始的4h内呈现快速上升的趋势,之后随反应时间的延长其变化趋于平稳;而作为酶解产物的寡糖的平均重合度则显示出与还原糖含量相反的变化规律.实验结果同时也表明,山楂果胶溶液的浓度与山楂果胶寡糖的平均重合度之间呈现出一定的正相关关系,即在高底物浓度(≥2%)的条件下有利于分子量相对较大(平均重合度大于3)的寡糖生成.但果胶酶的使用剂量则与果胶寡糖的平均重合度之间则呈现出一定的负相关关系,即在底物浓度一定的条件下,高的加酶量(≥O.2U/mL)有利于分子量较低(平均重合度小于3)的寡糖生成.