里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质

采用冻干浓缩,硫酸铵盐析,Sephacryl S-200 High Resolution凝胶柱层析,HiTrap Desalting凝胶柱脱盐,HiTrapTMSP(HP)离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化,获得两个纯化的木聚糖酶组分,分别命名为Xylanase A和Xylanase B。纯化倍数分别为3.58和3.29,回收率分别为7.02%和28.29%。SDS-PAGE结果均为单一条带,分子质量分别为29.6 ku和20.9 ku。酶学性质研究结果表明:Xylanase A和Xylanase B的最适反应温度分别为55℃和60℃;温度低于50℃,两种酶的稳定性都很好;最适pH一样,都为5.0;pH稳定范围也一样,都为3.5⁷.0;Mn2+、Tris对Xylanase A有激活作用,Fe2+、Cu2+、SDS则对该酶有抑制作用;Mn2+对Xylanase B有激活作用,Zn2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Ba2+、Mg2+及SDS则对该酶有抑制作用。     

大肠杆菌工程菌产木聚糖酶工艺优化及酶学性质研究

对大肠杆菌工程菌产木聚糖酶的工艺进行优化,并对木聚糖酶的酶学性质进行研究。确定了提取工艺路线,即依次经过细胞破碎(高速珠磨法)、固液分离及除菌(中空纤维膜过滤)、超滤浓缩及烘干包衣步骤后得到肠溶木聚糖酶产品。该产品热稳定性好,在pH 2.5磷酸盐缓冲液中释放度为5.0%,在pH 5.5磷酸盐缓冲液中释放度为98.5%,产品外观光泽性好,能够很好地满足饲料酶市场要求。该木聚糖酶的最适pH值为6.4,最适温度为55℃。该酶具有较好的热稳定性,含水分17%的酶在90℃条件下2.5min仅失活13.6%。对木聚糖酶降解产物进行检测表明该木聚糖酶是一种内切酶。     

废纸脱墨中碱性木聚糖酶的酶学性质研究

碱性木聚糖酶是一种具有催化功能的绿色清洁生物酶制剂,具有催化效率高、专一性好的特点,其在废纸脱墨中具有广大的应用前景.文章研究了碱性木聚糖酶的酶学性质,探究了其最适反应条件及稳定性.研究结果表明,碱性木聚糖酶最适反应温度为65℃,最适反应pH值为8.0.当处理时间为30min时,在55℃、60℃、65℃条件下相对酶活力...     

粗糙脉孢菌木聚糖酶酶学性质的研究

对粗糙脉孢菌木聚糖酶粗酶的酶学性质进行了研究,结果表明:该木聚糖酶的最适反应温度50℃、pH值为5.8,温度低于50%、pH 4.6～7.4时该酶稳定性较好;金属离子Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+对该酶的活性有促进作用,K+、Na+、Pb2+、Cu2+、Fe3+、Al3+对酶的活性有抑制作用;EDTA、SDS、DMSO对该酶活性的抑制作用较小;以木聚糖为底物的酶动力学常数Km和Vmax值分别为1.30g/L和1.35μmol/(min·mL).     

草菇木聚糖酶的纯化提取和酶学性质

草菇产胞外木聚糖酶通过各级浓缩和纯化,获得接近电泳纯蛋白.通过SDS PAGE测得相对分子质量为24500.木聚糖酶为糖基化修饰的蛋白,含有质量分数20.24%的糖.O 糖基化能增加木聚糖酶的活性,O 和N 糖基化都能提高木聚糖酶的稳定性.5min反应,草菇木聚糖酶在60℃和pH值5.65时活性最高.在此条件下,该酶的Km值为3.87mg/mL,Vmax为1250IU/mg.纯酶的稳定pH值为6.54,57℃时半衰期为1h.     

真菌木聚糖酶产生菌的筛选及酶学性质研究

本实验通过土壤稀释涂布法,经过初筛、复筛,筛选出了两株酶活力较高真菌菌株C4 和G1,在此基础上对它们生长的最佳碳源选择、酶学性质进行了研究。结果表明：菌株C4 产酶的最佳碳源为玉米芯－麸皮,培养24h 就可以达到产酶高峰,其酶活力达6582.29U/ml。此酶反应最适温度为40℃,在50℃以下比较稳定,最适反应pH 值为5.0,并且pH 稳定性比较好;菌株G1 产酶的最佳碳源为玉米芯,培养96h 就可以达到产酶高峰,其酶活力到达6301.04U/ml。此酶反应的最适温度是40℃,在40℃以下比较稳定,最适反应pH 值为5.0,但pH 值稳定性不如菌株C4。     

细菌木聚糖酶粗酶的提取及性质的研究

在 2 0℃条件下 ,采用相对饱和度为 50 %的 (NH4) 2 SO4一步盐析并经 4 5～ 50℃烘干 1 0h得到木聚糖酶粗酶粉 .初步研究了该酶的一些基本性质 ,结果表明 ,该酶在 55℃下 ,pH值为 4 .6～1 0 .5之间较稳定 .最适作用温度与 pH值分别为 50℃和 7.6.该粗酶产品适合造纸工业的纸浆处理 .     

白腐真菌产木聚糖酶发酵条件的优化及酶学性质研究

通过正交实验对白腐真菌Pleurotus ostreatus SYJ042产酶条件进行了优化,研究了该酶的酶学性质。结果表明:最适发酵条件为:碳源为5%的麸皮和玉米芯(1:1),氮源为0.5%的蛋白胨,接种量为每50mL发酵液接4块菌丝块,发酵时间为8.5d。该酶的最适温度是50℃,最适pH为5.4;Zn2+、Ca2+对酶活性影响较小;Ag+、MnO2-4影响较大。     

耐热子囊菌产木聚糖酶及酶学性质的研究

对 1株耐热子囊菌 (Thermoascusaurantiacus)固态发酵产木聚糖酶的工艺条件及酶学性质进行了研究。确立了适宜的产酶基质为 :麸皮 3 0 %、玉米芯 3 5 %、玉米皮 3 5 %、(NH4 ) 2 SO4 2 %、尿素 0 5 %、KH2 PO4 0 5 %、MgSO4 ·7H2 O 0 2 %、初始含水量 65～ 70 %。 45℃培养 5d ,木聚糖酶活力最高可达 1 0 3 2 1IU/g(干曲 )。该木聚糖酶最适反应温度为 70℃ ,最适pH4 8;在 pH3 0～ 7 0 ,温度低于 65℃时稳定性能较好。可被Fe2 +、Mg2 +、Zn2 +激活 ,而被Co2 +、Fe3+、Mn2 +抑制。     

产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究

以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1,根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株XE-13-1为桔绿木霉（Trichoderma citrinoviride）。经测定,菌株XE-13-1所产木聚糖酶的最适反应温度为50 ℃,最适反应pH值7,具有较好的pH稳定性。在30 ℃、pH 5～10的条件下保温2 h,该酶仍具有78%以上的酶活力。Mg2+、Fe2+、K+、Zn2+对该酶具有明显的促进作用,Cu2+对该酶具有明显的抑制作用。酶学性质研究结果表明,该酶在工业应用上具有较好的前景。     

纳豆菌B-12产纳豆激酶条件及酶学性质研究

以纳豆菌B-12为出发菌株,对其液体发酵产纳豆激酶的条件及纳豆激酶部分酶学性质进行了研究。实验研究了碳源、氮源、接种量、发酵时间、发酵温度和培养基初始pH值对纳豆菌B-12产酶的影响,在优化发酵条件下,纳豆菌B-12产酶量相当于尿激酶903IU/mL。纳豆激酶在50℃,热稳定性较好,保温100min残余酶活力保持80%左右;在pH6.0-9.0较稳定,残余酶活力保持在近80%左右;金属离子Fe3＋、Al3＋对纳豆激酶有明显的抑制作用,Zn2＋有微弱的促进作用。     

重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究

葡萄糖脱氢酶可用于高纯度低聚果糖和葡萄糖酸钙的生产，一种重组葡萄糖脱氢酶表达、纯化后，对该酶酶学性质进行了研究。最适反应pH值8．4，最适反应温度37℃，在温度低于45℃条件下，酶活力稳定性好。在最适温度和pH条件下，以葡萄糖为底物时葡萄糖脱氢酶的米氏常数Km=20．09mmol／L，以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）为底物时的米氏常数Km=0．10mmol／L。     

果胶酶活力测定中酶活力与稀释倍数的研究

研究了果胶酶活力测定中酶活力与稀释倍数关系，确定了在用PEG／（NH4）2SO4双水相系统进行果胶酶提取分离过程中酶活力测定的最佳稀释倍数，为进一步研究建立了理论依据。     

中性蛋白酶酶解羊骨产物抗菌性的研究初探

研究利用中性蛋白酶对羊骨进行酶解，采用五因素五水平正交旋转设计对羊骨进行酶解，以抗菌率为指标，对酶解条件进行优化，并对最优条件下所得产物的抗菌性进行详细对照评定。以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌为供试菌种。结果发现，第21组酶解液（即酶浓度200U／g，底物浓度1：3，时间6h，酶解温度50℃，pH值为7．0）的抗菌性相对较强，但其抗菌性的强度相当于0．015％～0．019％亚硝酸钠溶液的抑菌力。21号酶解液对大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌在第4h～10h的生长时间范围内，表现出明显的抑制作用。     

酶法提取树莓叶黄酮类化合物的研究

采用纤维素酶酶解预处理与醇溶液浸提相结合的提取工艺从树莓叶中萃取黄酮类化合物。用双波长分光光度法测总黄酮含量，探讨了影响提取率的主要因素，最后用正交法确定了最佳提取工艺。结果表明：各因素对提取效果影响的顺序依次为介质pH〉酶浓度〉酶解温度〉酶解时间，确定最佳提取工艺为酶浓度0．35mg／mL，酶解时间150min，酶解温度50℃，介质pH为4．0，总黄酮得率达2．94％。     

蜡质大米淀粉性质的研究

对蜡质大米淀粉的性质进行了研究，结果发现：与普通大米淀粉相比，蜡质大米淀粉的透明度要高，透明度随时间的稳定性要好；在几种介质中，蜡质大米淀粉均无沉降现象发生，常温稳定性较好；在蒸馏水中，蜡质大米淀粉在蒸馏水中经过两次冻融循环的析水率较高，在其他介质中均表现出了较好的冻融稳定性；淀粉糊为假塑性流体，不抗剪切，几种介质对粘度产生了不同的影响。     

CO2处理对磨盘柿果实质地及品质的影响

以磨盘柿为原料,采用不同浓度CO2气体处理,定期观察分析柿果硬度、果胶含量、果胶酶活性、果实品质等变化,结果表明,70％CO2处理的柿果保硬时间较长,同时品质最好。     

蓝莓花青素的提取及理化性质的研究

以蓝莓果为原料采用乙醇浸提法提取花青素,确定的最佳提取条件为pH 3.5、浸提温度50℃、浸提60min,浸提剂乙醇浓度为50%,提取1次,该条件下提取率为5.8%.对蓝莓花青素的理化性质研究结果表明,蓝莓花青素热稳定性较好:蔗糖和柠檬酸使蓝莓花青素的稳定性增强;还原荆Vc在低浓度下对蓝莓花青素的影响不大;Cu2 、Sn4 、Al3 、Fe3 对蓝莓花青素有稳定作用.     

出芽短梗霉XYE-7木聚糖酶的酶学性质

用固体平板法从果园土壤中分离出一株产木聚糖酶活力较高的类酵母真菌出芽短梗霉XYE-7。此茵的最佳产酶条件为：硫酸铵0．5％、0．2％的酵母膏、磷酸二氢钾0．1％、硫酸镬0．05％、木聚糖0．5％，初始pH值2．0，最适产酶温度是35℃，培养72h后发酵液酶活最高。该酶作用的最适温度是70℃，最适pH值为7．0。     

茶籽多肽的制备及抗氧化活性研究

研究了茶籽蛋白酶解制备菜籽多肽的最佳条件，研究结果：茶籽蛋白水解的最适宜酶为2709碱性蛋白酶。蛋白酶最适宜作用条件为：pH值8．0，[E]／[S]10％，温度45℃，水解时间5h，此条件下氨基酸态氮生成率可这34．64％。该条件下制备的茶籽多肽时超氧自由基和羟基自由基具有强烈的清除作用。