两歧双歧杆菌免疫原性的研究

机体在剂量、长时间的口服两歧双歧杆菌后才能在其血清中检出特异性抗体,而非正常寄居菌沙门氏菌则在经口摄取后很短时间内,产生较高水平的特异性抗体在剂量并维持较长的时间。可以认为尽管双歧杆菌数量很大,一般不易引产生抗体也是低水平的,或在短时间内有一定的反应,之后很快便消失。进一步的研究表明,在体外诱导脾细胞的产生免疫应答的细胞数量上,双歧杆菌的数量是沙门氏菌的２０倍。由此推论,两歧双歧杆菌经口服后具有较     

优化两歧双歧杆菌培养基的增菌研究

针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交实验设计优化增殖培养基。结果表明,酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素。最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%(均为质量分数)。用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH值的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010mL-1。     

两歧双歧杆菌在牛初乳中的发酵特性研究

用经过耐氧驯化后的两歧双歧杆菌发酵牛初乳,研究了其发酵特性。结果表明,两歧双歧杆菌在牛初乳中37℃发酵10h,pH值为4.72,活菌数为3.3×109mL-1,初乳IgG活性、质量浓度基本保持不变。     

两歧双歧杆菌的真空冷冻干燥工艺研究

通过单因素试验和正交设计法对两歧双歧杆菌菌体冻干的保护剂进行优化,获得在冻干过程中能有效保护两歧双歧杆菌存活的复合保护剂,再对菌悬液共晶点的测定和冻干工艺进行研究。     

小鼠口服两歧双歧杆菌的免疫应答

机体在大剂量、长时间摄取两歧双歧杆菌后才能在其血清中检出特异性抗体 ,而非正常寄居菌———沙门氏菌经口摄取后 ,机体在很短时间内就产生较高水平的特异性抗体 ,并维持较长的时间 .进一步的研究表明 ,在体外诱导脾细胞产生免疫应答的细胞数量上 ,双歧杆菌的数量是沙门氏菌的 2 0倍 .由此推论 ,两歧双歧杆菌经口服后具有较弱的免疫原性 .     

两歧双歧杆菌发酵橙汁酸豆奶的研究

本文尝试研究豆奶中两歧双歧杆菌的生长情况,以得到风味良好的发酵产品.以大豆与水1∶8的比例制取豆奶,添加一定量的橙汁,并加入两歧双歧杆菌进行发酵.考察了培养温度、橙汁添加量、接种量等因素对产品pH值和活菌教的影响,并在此基础上进行正交试验优化.正交试验结果表明,培养温度为39℃、接种量为5％、橙汁添加量为10％,18 ...     

两歧双歧杆菌BB-G90生产工艺的优化

对两歧双歧杆菌的4种发酵培养基进行了筛选,确定了适合两歧双歧杆菌BB-G90生长的发酵培养基;研究了5种冻干保护剂对两歧双歧杆菌BB-G90活菌的影响。利用筛选的发酵培养基培养BB-G90,在调控pH=5.0±0.5条件下进行300 L罐中试发酵试验,确定了发酵参数及冻干保护剂配方。试验结果表明:两歧双歧杆菌BB-G90在优化的发酵培养基、适宜的冻干保护剂及调控pH=5.0±0.5条件下发酵终止时间为22 h,此时,发酵液OD600值为5.62,发酵液活菌数为1.80×109CFU/mL,发酵液经离心、乳化及冻干后,菌粉活菌数为4.10×1011 CFU/g。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸优良菌株的选育

两歧双歧杆菌通过逐渐增加培养基中氧气分压的方法进行多次耐氧驯化,每次耐氧驯化后进行挑选耐氧的两歧双歧杆菌单菌落,然后将经过耐氧驯化的两歧双歧杆菌菌株再通过降低培养基pH值的方法来进行多次耐酸驯化,每次耐酸驯化后进行挑选两歧双歧杆菌单菌落,以确定所获得的两歧双歧杆菌为纯的耐酸菌株.最终得到了1株对氧和酸的耐受能力有较大提高的两歧双歧杆菌菌株,且耐氧耐酸驯化后的菌株没有发生变异.这有利于两歧双歧杆菌产品的开发和保持两歧双岐杆菌制品有较高的活菌量,具有较好的实际应用价值.     

两歧双歧杆菌促生长培养基的初步筛选

本试验首先比较了两歧双歧杆菌在TPY,PTYG和改良MRS培养基的生长情况,发现PTYG作为两歧双歧杆菌的生长培养基相对较好;然后在PTYG培养基中加入乳清蛋白水解液和乳糖,结果表明乳清蛋白水解液与乳糖对两歧双歧杆菌的生长有一定的影响,其适当添加量为10%乳清蛋白水解液（mL/mL）和1.5%乳糖（g/g）。     

3种低聚糖对两歧双歧杆菌BB03生长的影响

以MRS培养基为对照,研究了不同浓度的水苏糖、低聚木糖及低聚半乳糖对两歧双歧杆菌BB03生长的影响.结果表明,在MRS培养基中添加0.2%～1.0%的水苏糖在前期能加速两歧双歧杆菌的生长,最佳添加量为1.0%,低聚木糖的最适添加量为0.8%,低聚半乳糖的最适添加量为0.6%.     

两歧双歧杆菌与嗜酸乳杆菌微生态制剂的工业化生产工艺研究

研究了两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌双联微生态制剂的工业化生产工艺。对发酵培养基及发酵条件进行了研究和优化，并确定了发酵奶的冷冻干燥工艺条件。冻干后的产品中两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的活菌数均达到了10^9-10^10g^-1，而且在冻干工艺条件下，发酵产物中的各种活性成分得以最大限度地保存下来，使产品可以达到作为微生态制剂应用的相关标准。     

两歧双歧杆菌F35氮源利用的差异性解析

为研究两歧双歧杆菌氮源利用的特征,并解析其机制,首先测定菌株利用单位质量不同氮源的增殖效果,并通过高效液相色谱测定不同氮源的氨基酸和肽组成,进一步分析了氨基酸氮源和多肽氮源对菌株增殖的影响,最后通过全基因组测序分析菌株的氨基酸转运及生物合成能力.结果表明,两歧双歧杆菌几乎不利用酵母浸粉类氮源,偏好利用蛋白胨,原因在于两...     

山梨醇、甘露醇及甜菜碱等对两歧双歧杆菌冻干的影响

通过单因素实验,研究了NaCl、山梨醇、甘露醇、谷氨酸、谷氨酸钠、甜菜碱添加到MRS优化培养基中对双歧杆菌冻干存活率和单位菌粉活菌数的影响,确定了适合两歧双歧杆菌最佳冻干条件。结果表明:添加物NaCl、山梨醇、甘露醇、谷氨酸、谷氨酸钠、甜菜碱的浓度分别为0.5%、0.6 g/L、0.9 g/L、0.3 g/L、0.2 g/L、0.4 g/L时双歧杆菌冻干存活率分别达到最大。     

耐氧两歧双歧杆菌高密度培养的研究

讨论了耐氧两歧双歧杆菌在小瓶培养、发酵罐间歇培养、及流加培养的生长及代谢特性,探讨了其高密度培养的途径。在发酵罐流加培养试验中,通过流加碱和流加基质培养,使双歧杆菌生长的OD600值达到1.67,菌体浓度约为6.3×1010个/mL,乳酸浓度达到620mg/100mL,并使双歧杆菌生长的周期明显延长。     

两歧双歧杆菌FL-228.1增强小鼠先天免疫功能研究

本文以8株潜在功能菌株为研究对象,将其分别干预RAW264.7鼠巨噬细胞和人外周血单核细胞（PBMCs）,并检测RAW264.7细胞吞噬活性和自然杀伤（NK）细胞活性变化,将筛选出的潜在益生菌进一步干预BALB/c小鼠,探究其在体内的免疫调节功效。结果表明,在细胞实验中,不同菌株干预均能显著提高RAW264.7细胞吞噬活性（P<0.05）,而两歧双歧杆菌FL-228.1和鼠李糖乳酪杆菌FN518能显著提高NK细胞活性（P<0.05）,且综合来看,两歧双歧杆菌FL-228.1在体外表现效果最优,进一步开展体内研究。摄入两歧双歧杆菌FL-228.1能促进小鼠胸腺发育并显著提高腹腔巨噬细胞吞噬活性,脾脏中NK细胞活性,血清IgG含量,脾淋巴细胞转化和抗菌肽相关基因Cryptdin-4和CRAMP的表达（P<0.05）,但对血清细胞因子TNF-α、IL-10、IL-12和IFN-γ以及抗菌肽相关基因RegIII-γ的表达无显著影响（P>0.05）。综上,两歧双歧杆菌FL-228.1可以通过调节免疫细胞活性、细胞因子表达以及免疫分子抗菌肽相关mRNA水平来提高先天免疫功能...     

两种抗氧化剂在两歧双歧杆菌发酵过程中的化学去胁迫作用

采用向发酵液中添加适当的抗氧化剂的方法,消除发酵液中残存的氧对两歧双歧杆菌的胁迫作用,以达到其发酵液中产生更多活菌体的目的。结果表明,在发酵过程中,添加3.2 g/L或1.6 g/L的异抗坏血酸钠和抗坏血酸盐,可有效地减少氧对两歧双歧杆菌的胁迫作用,使发酵液中的活菌数分别增加到1.06×10~9CFU/ mL、1.29×10~9CFU/mL。     

中心组合设计优化两歧双歧杆菌BB01增殖培养基

为了提高两歧双歧杆菌培养液中的活菌数,采用中心组合设计对其增殖培养基进行了优化。在前期单因素试验的基础上,首先通过Plackett-Burman试验筛选出了影响两歧双歧杆菌生长的4个主因子,再通过中心组合设计试验及响应面分析确定了4个主因子的最佳浓度为:三氯化铁、水苏糖、蒺藜提取液和pH分别为0.012 g/L、8.0 g/L、2.5%和6.90,用优化后的增殖培养基培养两歧双歧杆菌,24 h后其培养液OD600为1.398±0.007,比优化前提高了24.28%。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

本实验通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。在耐氧驯化时,通过增加培养基中的氧气分压的方法进行驯化;在耐酸驯化的过程中,通过降低培养基的初始pH值的方法进行。实验结果表明,在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为42000%,而原始菌的增殖比例仅为8333%,且前者的凝乳时间较后者短,为后者的2/3;再经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高,且耐酸性明显优于未经驯化的菌株;最后再经过胆盐驯化的菌株在胆盐浓度为0.5%时培养后也有较高的活菌数,说明其对胆盐的忍耐力明显增强。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。实验结果表明，在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为41000％，而原始菌的增殖比例仅为8233％，且前者的凝乳时间为后者的2／3；经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高，且耐酸性明显优于未经驯化的菌株；胆盐驯化的菌株经胆盐浓度为0．5％的培养后也有较高的活菌数，其对胆盐的忍耐力明显增强。     

双歧杆菌酸奶冻干发酵剂不同菌株特性的研究

研究了不同来源的4株双歧杆菌在乳中的生长与发酵特性、冷藏期间的存活力和后酸化活性以及抗冷冻干燥特性。结果表明:4菌株在乳中42℃发酵的凝乳时间均为6.0h,Blm和Bbm凝乳后的活菌数高,均在1×109cfu/mL以上,而其pH值均在5.0左右,滴定酸度70～80°T,且无显著差别;4菌株在发酵后的酸乳中冷藏期间,Blm和Bbm的存活力高,Blm、Bbm和Blr均表现出较低的后酸化活性;4℃冷藏21d,Blm和Bbm活菌数下降至不足1个log数量级,Blm、Bbm和Blr的酸度上浮不足10°T,pH值下降仅0.2～0.3;4菌株在以脱脂乳为保护剂的冷冻干燥试验中,Blm和Bbm抗冻干性强,其冻干存活率均在30%以上。