紫杉醇脂质纳米粒子对KB、SKOV3细胞作用的对比分析

目的:比较紫杉醇脂质纳米粒子(TAX-NLC)对KB、SKOV3细胞的抑制作用。方法:激光共聚焦显微镜观察TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞对Ca2+的影响;MTT法测定TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞抑制率;激光共聚焦显微镜观察TAX-NLC作用于KB、SKOV3细胞形态学的变化。结果:TAX-NLC作用后KB细胞Ca2+浓度高于SKOV3细胞;TAX-NLC作用后KB细胞的抑制率高于SKOV3细胞;TAX-NLC作用KB细胞产生多核细胞高于SKOV3。结论:TAX-NLC对KB细胞更敏感,Ca2+浓度、抑制率、多核细胞比例密切相关联。     

槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的探讨槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和油红O染色检测不同浓度(10、30、50、100μmol/L)的槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和CAA T/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达。结果 10～100μmol/L槟榔碱作用3T3-L1前脂肪细胞12 h和24 h能促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,且呈一定的量效关系。到分化的第9天,与对照组相比,50μmol/L槟榔碱组胞浆中的脂滴明显减少,同时PPARγ和C/EBPαmRNA表达水平显著降低。结论槟榔碱能促进3T3-L1前脂肪细胞的增殖、抑制其分化,其机制可能与PPARγ和C/EBPα的表达降低有关。     

雌激素受体拮抗剂对泌乳素腺瘤GH_3细胞增殖的影响

目的:探讨雌激素受体拮抗剂对泌乳素腺瘤细胞增殖的影响。方法:在同样去激素培养的条件下添加不同浓度雌激素和雌激素受体拮抗剂,应用MTT法检测其对GH_3细胞增殖的影响。结果:不同浓度的OHTam对GH_3细胞有明显的抑制作用,并且与剂量呈正相关,10~(-11) mol/L即有抑制作用,10~(-6) mol/L抑制作用达到最大。E_2可显著的刺激GH_3细胞增殖,10~(-12)mol/L即有促进增殖作用,10~(-9) mol/L作用达到最大,而后随着浓度的升高增殖作用反而逐渐减弱。结论:雌激素受体拮抗剂能显著抑制泌乳素腺瘤细胞的生长,理论上可以用于泌乳素腺瘤的药物治疗。     

不同制备方法对紫杉醇脂质体体外性质的影响

目的考察不同制备方法对紫杉醇脂质体体外性质的影响,优选出较好的制备方法。方法分别以薄膜分散法、乙醇注入法、前体脂质体法制备紫杉醇脂质体,用马尔文激光粒度仪测定脂质体的粒度分布,微柱离心—HPLC法测定其包封率,并采用正交设计优化脂质体的处方。结果前体脂质体法制得的脂质体形状均匀、粒径适宜、包封率较高。结论制备方法对紫杉醇脂质体的体外性质影响显著,前体脂质体法在脂质体剂型的制备中显露出独特的优势,更适合于紫杉醇脂质体的制备。     

C-myc通过调控BubR1影响食管鳞癌细胞对紫杉醇的敏感性

探讨C-Myc与有丝分裂期检查点蛋白BubR1的表达关系和对紫杉醇药物作用的可能影响。用免疫组化方法检测23例食管鳞癌组织标本中C-Myc和BubR1的表达水平,并通过免疫印迹的方法比较3株食管鳞癌细胞株ECA-109,KYSE150和KYSE180中C-Myc和BubR1的表达高低,分析相关性;将人BUB1b基因启动子上游约2000bp片段插入pSEAP2分泌型碱性磷酸酶报告质粒中构建为pSEAP2-BubR1-P2000,分别转染至3株鳞癌细胞内,检测启动子激活效果;在ECA-109细胞内过表达C-Myc后再转染pSEAP2-BubR1-P2000后,检测启动子的激活效果;免疫印迹方法检测C-Myc抑制剂10058-F4对BubR1蛋白表达的影响;通过MTT检测10058-F4干扰C-Myc后ECA-109细胞在梯度紫杉醇浓度下的生存率变化;最后通过DAPI染色观察单用C-Myc抑制剂,单用低浓度紫杉醇(100nM)或联用10058-F4和紫杉醇组的凋亡比例。结果发现在临床食管鳞癌标本和食管鳞癌细胞株中C-Myc和BubR1的表达有相关一致性;C-Myc高表达的细胞株中BubR1启动子活性的激活程度更强,并且过表达C-Myc后能进一步上调启动子活性;C-Myc特异性抑制剂10058-F4可以有效下调BubR1表达,并减低细胞在梯度紫杉醇作用下的细胞生存率。DAPI染色结果显示联用10058-F4和低浓度紫杉醇能明显增加细胞处于有丝分裂期的比率。在食管鳞癌细胞中C-Myc能上调有丝分裂期检查点蛋白BuR1的水平,并与食管癌对紫杉醇的敏感性相关,C-Myc可能通过上调BubR1表达而减低食管鳞癌对紫杉醇的反应。     

临床护理路径在紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌护理中的应用及对患者QOL评分的影响

目的:探讨临床护理路径在紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌护理中的应用及对患者QOL评分的影响。方法:选取2017年1月-2018年12月卵巢癌患者70例,随机分为研究和对照组,各35例。两组均使用紫杉醇联合卡铂治疗,同时,对照组给予常规护理,研究组在常规护理的基础上给予临床护理路径护理。比较两组心理状态、生活质量变化情况、护理满意度。结果:研究组护理干预后SDS评分及SAS评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。护理干预后,研究组在宗教信仰、生活环境、社会关系、独立能力、心理状况及身体机能的评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。干预后,研究组护理满意度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:临床护理路径应用于紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌患者的护理中,能使得患者负性情绪得到更好的缓解,且患者护理满意度较高,生活质量得到提升,值得应用推广。     

分化诱导因子–3对黑色素瘤细胞增殖及趋电性的影响

为探讨分化诱导因子(DIFs)对黑色素瘤细胞B16-F10增殖及趋电性的影响,利用MTT法检测不同浓度的DIF-1、DIF-3和Br-DIF-1处理后的B16-F10,并分别从单细胞、成片细胞和单层细胞三个层面研究DIF-3是否影响B16-F10细胞的趋电性.结果显示,DIF-3处理24h就可以明显抑制B16-F10细胞增殖;在直流电场作用下,DIF-3抑制单细胞、成片细胞和单层细胞的运动速度,但运动方向不受影响.     

探讨so3对混凝土耐久性的影响

本文探讨了添加复合掺合料、中砂、碎石、硅酸盐水泥、抗硫水泥搅拌而成的高性能混凝土,在含有硫酸根离子的溶液中经过一百次干湿循环,通过重量的变化率、抗折强度与抗压强度发生的变化来分析硫酸盐对混凝土耐久性产生的影响。结果显示重量变化率对混凝土能体现出耐久性能;抗折强度与抗压强度比起来前者比较敏感,对于硫酸盐给混凝土造成的破坏能够较好的显现,通过本文的探讨,期望对以后的混凝土施工能够带来好的影响。     

左金丸对大肠癌APC表达及DNA甲基转移酶活性的影响

目的研究左金丸对结肠腺瘤性息肉基因（adenomatous polyposis coli,APC）的表达及DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,Dnmts）各亚型Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b活性的影响,探讨大肠癌的发病机制及左金丸中药的抑癌机理。方法将120只Wistar大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、左金丸组和对照组,每组40只。正常组为健康大鼠不做任何处理,左金丸组和对照组大鼠每周注射1次化学致癌剂1,2-二甲基酰肼（1,2-di meth-ylhydrazine,DMH）共12周,左金丸组从注射药物开始每天灌服左金丸汤剂,对照组与正常组灌服同等体积的生理盐水,分别在第11、21、34周将部分大鼠处死,切取肿物、进行切片、HE染色、病理观察Duke分期,用Western blot-ting半定量法检测不同肿瘤时期APC蛋白的表达;Elisa方法检测Dnmts活性。结果 APC相对蛋白含量比较：正常组〉左金丸组〉对照组,各组两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,但与肿瘤Dukes分期无关;Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b的活性比较：对照组〉左金丸组〉正常组,各组两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,其中对照组中Dnmt1、Dnmt3b的活性与肿瘤Dukes分期有关,随着肿瘤浸润程度的增加而升高。结论 APC蛋白参与了结直肠癌的发生,并且是肿瘤形成的早期事件,与肿瘤的发展进程无关;Dnmt1、Dn-mt3a、Dnmt3b参与了结直肠癌的发生过程,且Dnmt1、Dnmt3b活性升高与结直肠癌进展有关;左金丸组APC蛋白表达量的增加及甲基转移酶活性的降低可能跟左金丸的抑癌作用有关。     

槲皮素对人卵巢癌细胞-3增殖和凋亡的影响

目的:探讨槲皮素对人卵巢癌细胞-3(ovarian carcinoma cell,OVCAR-3)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:将对数生长期的OVCAR-3细胞随机分为对照组和槲皮素组。对照组细胞给予培养基常规培养,而槲皮素组细胞加入槲皮素(160μmol·L~(-1))。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖;流式细胞仪检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,RT-PCR检测细胞受体型酪氨酸激酶2(JAK2),信号传导与转录激活因3(STAT3),B细胞淋巴因子2(Bcl-2),人Bcl-2相关X蛋白(Bax)信使mRNA表达水平。免疫蛋白印记法检测各组OVCAR-3细胞中STAT3,磷酸化受体型酪氨酸激酶2(p-JAK2),磷酸化信号传导与转录激活因3(p-STAT3),Bax,Bcl-2蛋白的变化,Caspase3活性试剂盒检测Caspase3活性。结果:MTT检测结果显示槲皮素组与对照组相比,人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖率明显下降(P<0.05)。流式细胞仪检测显示槲皮素组OVCAR-3细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.05)。RT-PCR检测显示槲皮素组与对照组JAK2和STAT3信使mRNA表达水平无明显差异,而槲皮素组Bax信使mRNA水平比对照组明显增高,槲皮素组Bcl-2信使mRNA水平比显著低于对照组。Western blotting检测显示,槲皮素组的JAK2和STAT3蛋白表达与对照组比较,无明显差异(P>0.05),而槲皮素组的p-STAT3,p-JAK2和Bcl-2蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05),槲皮素组的Bax表达显著高于对照组(P<0.05)。Caspase3活性试剂盒检测结果显示,槲皮素组Caspase3活性表达水平显著高于对照组。结论:槲皮素能明显抑制人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖,促进人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,其作用机制可能是通过激活JAK2/STAT3信号传导通路。     

葛根素抑制人子宫颈癌细胞株HeLa增殖和诱导凋亡作用研究

目的:探讨葛根素对人子宫颈癌细胞株HeLa的作用及其机制。方法:取对数生长期的HeLa细胞分别用不同剂量的葛根素处理(0μmol,12.5μmol,25μmol,50μmol)。细胞培养48 h后,利用MTT法检测HeLa细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA水平。Western blotting法检测Wnt、β-catenin、Bax、Bcl-2、p53和p21表达水平。结果:葛根素成剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖,促进细胞凋亡,促进BaxmRNA表达,减少Wnt、β-catenin、Bcl-2 mRNA、p53和p21表达。结论:葛根素可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制与减少Wnt/β-catenin信号通路活化相关。     

顺铂致大鼠急性肾损伤肾组织细胞凋亡及NGAL的相关性研究

目的:研究顺铂(Cisplatin,CDDP)致大鼠急性肾损伤(AKI)模型中肾组织细胞凋亡及肾组织中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)变化及相关性。方法:将36只健康雄性Wistar大鼠随机分为盐水对照组(CN组)与顺铂模型组(CP组),CP组为腹腔单次注射顺铂10 mg/kg,CN组腹腔注射同顺铂组等容量生理盐水,观察应用顺铂后12、24、48、96、144 h各组大鼠血清肌酐(Scr),肾组织细胞凋亡及NGAL变化。结果:与CN组相比,CP组48 Scr开始升高,144 h达峰值;CP组12 h肾组织凋亡细胞开始增多,48 h增加最明显;CP组12 h NGAL在肾小管上皮细胞中表达增强(P<0.05),48 h表达最明显。肾组织细胞凋亡同NGAL表达显著相关(r=0.925,P<0.01)。结论:细胞凋亡可能是CDDP致大鼠AKI早期致病机制之一,NGAL不仅是早期肾损伤的标记物,还可能参与AKI发病机制。     

三氧化二砷对耐伊马替尼K562细胞株增殖、凋亡和bcr/abl基因表达的影响

目的观察三氧化二砷（ATO）对耐伊马替尼K562（K562G）细胞增殖、凋亡和bcr/abl融合基因（bcr/abl基因）表达的影响。方法用不同浓度的伊马替尼（STI571）（0.25、2.50、10.00μmol.L-1）、ATO（1.0、5.0、10.0μmol.L-1）以及两者联合作用于K562G细胞,用MTT比色法测定药物对K562G细胞生长抑制率的影响、PI单染色法流式细胞仪检测K562G细胞凋亡率、荧光定量PCR检测K562G细胞bcr/abl基因的表达水平。结果 STI571作用于K562G细胞的细胞生长抑制率、细胞凋亡率和bcr/abl基因水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,ATO作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）,bcr/abl基因表达水平明显降低（P〈0.05）;细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度5.0μmol.L-1时最明显。ATO＋STI571联合用药作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组以及单用ATO组比较差异有统计学意义（均P〈0.05）,细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度ATO（5.0μmol.L-1）＋STI571（2.50μmol.L-1）时最明显,bcr/abl基因水平降低比单用ATO组更明显（P〈0.05）。结论 K562G对≤10.0μmol.L-1浓度的STI571耐药;ATO能明显抑制K562G细胞生长和诱导K562G细胞凋亡,使K562G细胞bcr/abl基因表达水平降低;ATO与STI571联合用药作用于K562G细胞时,细胞抑制率和细胞凋亡率比单用ATO效果好,bcr/abl基因表达水平降低更明显,两者有协同作用。     

穿心莲内酯对胃癌AGS细胞增殖侵袭的影响

目的观察穿心莲内酯(AD)对胃癌细胞增殖侵袭以及Na+-K+-ATP酶活性的影响。方法体外培养胃癌细胞系AGS,分别用1.0、3.0、5.0μmol/L穿心莲内酯作用24~72 h,无机磷法检测AGS细胞Na+-K+-ATP酶活性改变情况;MTT和ELISA分析AGS细胞的增殖与断裂DNA含量;同时采用ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平;荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性;小室侵袭实验检测细胞侵袭。结果 1.0~5.0μmol/L穿心莲内酯能显著降低Na+-K+-ATP酶活性,并能在此浓度下抑制AGS细胞生长增殖以及增加断裂DNA水平。同时,穿心莲内酯也能减少VEGF和TGF-β1的水平(P<0.05),降低MMP-9酶的活性,并能有效减少癌细胞的侵袭(P<0.05)。结论穿心莲内酯是一种有效的抗胃癌药物,它可能具有阻碍胃癌细胞侵袭的能力。     

“广西大瑶山瑶族文化记忆研究”系列论文之四 瑶族歌谣的艺术特征与民族记忆表征

广西大瑶山瑶族歌谣不仅种类繁多而且具有独特鲜明的艺术审美特征,这些歌谣蕴含着深厚的文化内涵,它们是大瑶山瑶族历史记忆、生活习俗、民族交往、文化传承的民族记忆表征。研究大瑶山瑶族歌谣的类别与艺术特征,深入阐释其内在丰富的文化内涵,对拓展深化大瑶山瑶族文化的研究具有重要的价值与意义。     

三草降压汤含药血清对人脐静脉内皮细胞活性及NO分泌的影响

目的:观察三草降压汤(SCD)含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性及NO分泌水平的影响,探讨其降压作用的有效组分和作用机制。方法:采用大孔树脂富集纯化技术制备SCD的4种组分(SCD-DW、SCD-10ET、SCD-50ET、SCD-95ET),分别用血清药理学方法制备SHR大鼠含药血清,以5%、10%、15%的血清浓度作用于HUVEC,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力,Griess比色法检测培养液中NO含量。同时观察eNOS抑制剂L-NAME对其作用的影响。结果:SHR空白血清可显著抑制HUVEC活性(P<0.05),降低NO含量(P<0.01)。SCD-DW、SCD-10ET含药血清可增强被SHR空白血清抑制的HUVEC的活性(P<0.05,P<0.01),SCD-10ET可以提高HUVEC的NO分泌水平(P<0.05),此效应在15%血清浓度下可被L-NAME明显抑制(P<0.01)。结论:SCD-10ET可以通过调节内皮细胞NO分泌,减少血管内皮细胞损伤,eNOS-NO途径可能是该组分降低血压的机制之一。     

SGX523对舌鳞癌 Tca8113细胞增殖与 c-Met 表达的影响

目的：体外观察 SGX523对舌鳞癌细胞株 Tca8113中 c-Met 的表达情况及细胞增殖的影响。方法实验分为2组：对照组（Tca8113＋DMSO）;SGX 组（Tca8113＋不同浓度范围30～600 nmol· L－1的 SGX523）。采用Western blotting 检测不同浓度的 SGX523作用下的 Tca8113细胞中 c-Met、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和 AKT的表达情况,MTT 法检测不同浓度的 SGX523对 Tca8113细胞作用24、48、72 h 后细胞增殖的抑制率。结果与对照组相比,SGX 组在相同时段的 Tca8113细胞的增殖抑制率明显增加（P ＜0．01）,表明 SGX523对 Tca8113细胞的增殖抑制作用具有浓度依赖性。在相同浓度（100 nmol·L－1）SGX523作用下,24、48、72 h 的半数抑制率 IC50分别为（60．31±7．11）、（26．71±4．54）、（7．87±4．92）nmol·L－1,组间比较差异有统计学意义（P ＜0．01）,表明SGX523对 Tca8113细胞的增殖抑制作用有时间依赖性。对照组细胞抑制率在24、48、72 h 差异均无统计学意义（均 P ＞0．05）。Western blotting 法检测结果显示不同浓度 SGX523的 SGX 组 c-Met、MAPK 和 AKT 蛋白表达都明显下调,与对照组比较差异有统计学意义（均 P ＜0．05）,且不同浓度 SGX523的 SGX 组间比较差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论SGX523具有以浓度和时间依赖性方式抑制 Tca8113细胞增殖和下调 c-Met 蛋白表达作用,是一种有前景的舌鳞癌治疗的药物。