滤纸干血-新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本方法的灵敏度为0.5mIU/L,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%,回收率为90.1%～103.3%。本方法所制备的试剂盒与NeonatalTSH-IR-MA(磁颗粒法)试剂盒具有良好的相关性,相关方程为y=1.01x+0.34,相关系数为r=0.873。本试剂盒无放射性,操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒

以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用     

高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH)酶联免疫分析试剂盒

本工作以辣根过氧化物酶标记链亲合素（SA）、二株识别人促甲状腺激素（hTSH）高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素-亲合素酶联免疫分析（sTSH-BA-ELISA）试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为0.02mIU/L,批内变异系数<7.8％,批间变异系数<9.6％,回收率为93.3％～1078％,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素（如 FSH,HCG,LH）无明显的交叉反应性。正常参考值范围为0.3～4.1。本方法所制备的试剂盒与同位素研究所53室的     

人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制

TSH多抗用于固相包被，一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH标记物，以四甲基联苯胺（TMB）为底物，采用二步法，建立了TSH酶联免疫吸附分析法（ELISA）。本方法灵敏度为0.06mIU/L，批内CV≤5.9%(n=8)，批间CV≤9.1%(n=7)。回收率为（98．4－101．4）％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L，用本法与IRMA法同时23例病人血样，两者相关方程为Y＝1．01X－0．47，相关系数r=0.992。本方法具有简便，快速和准确的特点，适于临床检测和科研应用。     

甲胎蛋白干血滤纸免疫放射分析试剂盒的研制

用氯胺Ｔ法制备＾１２５Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ，用ＡＦＰ ＭｃＡｂ包被试管，以全血作标准，建立了ＡＦＰ干血滤纸片免疫放射分析方法。该方法灵敏度为７．２μｇ／Ｌ，批内变异系数为５．１－１０．０％，批间变异系数为４．７％－８．６％，正常参考值≤１０μｇ／Ｌ，与血清ＡＦＰ免疫分析方法比较，相关系数ｒ＝０．９７９。     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸(T_3)酶联免疫检测试剂盒

以T_3抗体包被微孔,经处理的T_3生物素化,辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),四甲基联苯胺(TM)为底物,建立了T_3生物素-亲合素酶联免疫分析(T4-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为0.2ng/mL,批内变异因数<8.3％,批间变异因数<10.5％,回收率为98.3％～107.3％,正常参考值范围为1.4～3.8ng/mL,本试剂盒具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。     

人血清总甲状腺素(T_4)酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒引入生物素-亲合素系统,采用竞争性ELISA法检测人血清中T_4含量。以抗T_4抗体包被96孔微孔板,经处理的T_4与生物素结合形成生物素化T_4,链亲合素与辣根过氧化物酶结合形成链亲合素化酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了T_4生物素-亲合素酶联免疫分析     

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%～6.48%和4.61%～13.1%,回收率为95.8%～117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别＜0.05%和＜0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y＝1.10x-0.207,相关系数r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y＝1.00x+0.191,相关系数r＝0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

癌胚抗原(CEA)酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

人绒毛促性腺激素(HCG)免疫放射分析试剂盒的研制

拟建立一种简便、快速的人绒毛促性腺激素(HCG)免疫放射分析方法.     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T₃抗体包被微孔,T₃生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T₃）生物素-亲合素酶联免疫分析(T₃-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1％～8.3％和6.5％～10.5％,回收率为98.1％～107.2％;高浓度T₃血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

~(125)I-6-酮-前列腺素F_(1α)放射免疫分析试剂盒的研制

研制了~(125)I标记的PGI_2稳定的代谢产物6-酮-PGF_(1α)RIA试剂盒。以碳化二亚胺法将6-酮-PGF_(1α)与BSA联接免疫家兔制备抗血清,其效价为1:32000,平衡常数为6.26×10~9L/mol,与其它前列腺素的相对百分交叉反应<1%。用氯胺T法制备~(125)I-组织胺-6-酮-PGF_(1α)标记物,比放射性活度>14.8MBq/μg(400μCi/μg),最高结合率>80%,二月内无脱碘现象。放免测定按常规法,最低检出值为2,2pg/管,检出率为97.2～102.3%,精密 度为6.62%,批内和批间C.V.分别为7.17、8.41%,Cerceo“效点系统”评分为31分,属优良。直接测定健康成人血浆6-酮-PGF_(1α)浓度为22.9±6.3pg/mL。     

碘-125标记皮质醇放射免疫试剂盒(双抗体法)的研制

皮质醇(cortisol)是人类肾上腺皮质分泌的主要激素之一。它能影响机体的糖、脂肪、蛋白质等的代谢和水、电解质的分布,并且有抗炎和抑制免疫功能的作用。它属甾体类激素,也参与性激素的代谢。测定人体外周血和尿中的皮质醇含量及其变化能够较为精确地了解肾上腺皮质的功能状态,对皮质醇增多症的诊断有重要意义。近年来对人体皮质醇含量的测定已涉及到包括计划生育在内的广泛领域,世界卫生组织(WHO)把它列入计划生育研究用的放射免疫试剂盒之一。为此,我们研制了该试剂盒,并建立了新的放射免疫测定方法。     

酶促交换法制备[γ-~(32)P]ATP

利用3-磷酸甘油酸激酶及甘油醛-3-磷酸脱氢酶催化,使~(32)中和ATP末端磷酸基进行交换制备[γ-~(32)P]ATP,产品经DEAE-SephadexA-25阴离子交换柱分离纯化。[γ-~(32)P]ATP比度>30 Ci/mM。放化纯度95%,酶促转化率50—60%。柱层析回收率～90%,放化收率>50%。     

游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法。其灵敏度为0.90pmol/L,标准曲线范围0.9～45.0pmol/L,批内变异系数3.1%～8.1%,批间变异系数4.9%～10.6%。测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5～11.1pmol/L,均值为5.1±2.0pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7～37.3pmol/L,均值为20.5±7.1pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9～3.8pmol/L,均值为2.0±0.9pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4～8.5pmol/L,均值为6.0±2.5pmol/L。通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(RIA)的测定结果有良好的相关性。应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。     

多肽激素的酶促~(125)碘化及其保存稳定性研究

作者们自1978年起迄今三年间先后完成了HTSH、HGH、HCG、HLH、和OFSH等五种多肽激素的乳过氧化物酶(Lactoperoxidase,简称LPO)酶促~(125)碘化法,结合国内目前供应的~(125)碘化钠(含还原剂)的具体条件,选择酶促~(125)碘化的最佳条件;酶及其组分内杂蛋白的自身~(125)碘化问题;并对酶促法与氯胺T法制备的多肽激素的保存稳定性进行了对比研究,现总结如后。     

血清游离3，5，3’-三碘甲腺原氨酸（FT3）酶联免疫试剂盒研制

三碘甲腺原氨酸是人体中随血流循环的一种甲状腺激素,在血液中,它几乎全部(>99.5％)结合于载体蛋白,但只有游离三碘甲腺原氨酸(0.3％)具有生物学活性。而且与总三碘甲腺原氨酸浓度水平相比,游离三碘甲腺原氨酸浓度水平不受载体蛋白浓度的影响,可对临床状态显示可靠的相关性。本法采用T_3抗体包被酶标板微孔、生物素化T_3,辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),以配     

81-02对放射性核素~(234)Th、~(144)Ce 的促排效果

81-02为1,2-邻苯二酚3,6-双甲基亚胺二乙酸(代号7601)的衍生物。对~(234)Th,~(144)Ce 有较好的促排效果。可使大鼠~(234)Th 排出量为注入量的73.9%,为对照组的18倍,肝、骨组织中~(234)Th 的蓄积量亦有明显下降。促排效果优于811。可使大鼠尿中~(144)Cc 的排出量达到对照组的20倍,优于7601。81-02的有效剂量甚低,当剂量为12mg/kg 时,尚能使尿中~(234)Th 排出40%。     

~(188)Re诱发人离体外周血淋巴细胞染色体畸变的初步研究

将人离体外周血在不同剂量的188ReO- 4中培养 5 4h ,观察淋巴细胞有丝分裂中期的染色体型和单体型畸变 ,这两种类型的畸变均有随188Re活度的增高而增加的趋势 ,并与活度存在一定的依赖关系 ,染色体畸变以二次多项式的模式为佳。单体型畸变、畸变细胞、染色体断片也可配以直线回归。