氮掺杂碳点的开关型荧光传感器检测蔬菜中的生物硫醇

研究并建立一种开关型荧光传感器模型快速检测Hg2+和生物硫醇。以柠檬酸和尿素为前驱体,通过一锅水热法制备了氮掺杂碳点(N-CDs),并对其进行了表面形貌、紫外和荧光光谱以及表面基团表征的检测,以检测体系pH、Hg2+浓度、孵育时间(荧光猝灭和恢复时间)为单因素,优化检测生物硫醇的最佳条件,并在最优检测条件下建立相应的标准曲线。结果表明,N-CDs的最佳激发和发射峰分别是340和432 nm,量子产率(FLQY)为32.72%。优化得到谷胱甘肽(GSH)的最佳检测条件为pH=5.0,Hg2+浓度为200 μmol/L,460 s荧光猝灭和380 s荧光恢复,最佳检测半胱氨酸(Cys)条件为pH=5.6,Hg2+浓度为300 μmol/L,440 s荧光猝灭和400 s荧光恢复,在最优条件下该传感器对0~300 μmol/L的GSH和100~400 μmol/L的Cys具有线性响应,检测限(LOD)分别为2.56和3.46 μmol/L,加标回收率为80%~120%。以上结果表明该传感器对检测蔬菜中生物硫醇有较好的选择性和准确度,能为食品基质中生物硫醇的荧光快速检测提供一种新思路。     

白酒中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯荧光探针测定方法的构建

目的 构建一种塑化剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)含量测定的荧光探针检测方法。方法 基于芘分子满足激基缔合物的要求,本文选择以芘为荧光探针,设计合成了芘-聚氧乙烯蓖麻油体系(芘-EL体系)。结果 芘荧光探针在该体系中结合DEHP后収生荧光猝灭,且荧光强度的降低与DEHP的浓度之间存在线性兲系。荧光探针检测的最优条件为波长为374 nm, 400μmol/L芘-EL体系,相互作用时间30min。该方法对DEHP测定的线性范围为5～30μmol/L,线性方程为△F=-23.153+24.179C,线性相兲系数r=0.9929,检出限为0.063μmol/L,相对标准偏差为4.43%(n=6)。结论 本方法具有可视化、成本低、高灵敏度、高选择性、操作简便等优点,适用于白酒中DEHP的测定。     

多功能净化柱高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1的研究

建立多功能净化柱净化高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1的方法。稻米样品经V（乙腈）∶V（水）=84∶16提取,多功能净化柱净化,三氟乙酸衍生化,高效液相色谱法荧光检测器检测。黄曲霉毒素B1浓度在0.010~100 μg/L范围内呈良好的线性关系,回归方程为y=60.431x+0.163 8,相关系数R2=0.999 9。该方法的检出限为0.1 μg/kg,加标回收率为82.25%~98.52%,标准偏差（SD）为2.23%~3.62%,比普通的0.45 μm微孔滤膜净化的要高。该法操作简便易行、选择性高、检测效果好,适合大批量粮油作物中黄曲霉毒素的检测,有利于推广应用。     

核酸适体分子信标探针用于三磷酸腺苷的 选择性检测

目的构建一种基于分子信标与核酸适体的荧光传感器,用于三磷酸腺苷分子的选择性检测。方法将三磷酸腺苷的核酸适体序列与分子信标结合形成新的荧光探针,利用腺苷和分子信标互补DNA的竞争,引发分子信标的构型转换,从而产生可检测的荧光响应信号实现检测腺苷的目的。结果荧光响应信号随着腺苷浓度的增加而减弱。在3.70×10~(-6)~5.56×10~(-4)mol/L的浓度范围内,腺苷浓度的对数和响应信号成线性关系,相关系数为0.9974。加标回收率为92.0%~110.0%,相对标准偏差为0.68%~1.85%(n=3)。结论该方法耗时较少、步骤简单,可满足当前生化分析快速而精确的分析要求。     

新型荧光探针制备及茶叶中汞离子检测的研究

以S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）作为保护剂和还原剂合成了水溶性金纳米团簇AuNCs,建立了分析实际茶叶样品中汞离子（Hg2+）高灵敏的方法。通过透射电镜（TEM）、动态光散射仪（DLS）、紫外-可见吸收光谱（UV-VIS）和荧光光谱对所制备的S-亚硝基谷胱甘肽包被的金纳米团簇GSNO@AuNCs进行了表征,随着汞离子浓度的增加,体系的荧光被高效猝灭,以此构建了检测汞离子的荧光探针。探讨了pH值、盐离子浓度、反应时间和温度对其荧光性能的影响。在优化实验条件下,汞离子浓度在0.1～40.0 μmol/L范围内与GSNO@AuNCs的荧光强度呈良好的线性关系,线性回归方程为Y=1.392+27.28X,相关系数R2=0.999 5,检出限为0.033 μmol/L。同时初步构建了GSNO@AuNCs荧光探针应用于茶叶样品中汞离子的检测,结果满意。     

荧光试纸技术可视化定量检测食品中的乙二胺四乙酸

目的 建立荧光试纸技术对食品中乙二胺四乙酸(editic acid, EDTA)进行可视化定量检测的方法。方法 以豌豆荚为原料，采用水热法合成蓝色荧光碳量子点（carbon quantum dots, CQDs），利用透射电镜（transmission electron microscope, TEM）、X射线衍射仪（X-ray diffractomer, XRD）、X射线光电子能谱仪（X-ray photoelectron spectroscopy, XPS）和傅里叶变换红外光谱仪（fourier transform infrared spectrometer, FTIR）对制备的CQDs的形貌及表面结构进行表征；向豌豆荚碳量子点溶液中加入铜离子（Cu2+），使蓝色荧光淬灭，将CQDs-Cu2+溶液吸附于滤纸上，制得EDTA荧光检测试纸。结果 EDTA能使CQDs-Cu2+体系淬灭的荧光恢复，在20~120 μmol/L范围内与CQDs-Cu2+荧光恢复强度呈现较好的线性关系，检出限为6.29 μmol/L，回收率为98.73%~99.40%。结论 该试纸可用于定量检测食品中EDTA的含量，为EDTA的检测提供更加简便、直观的方法。     

量子点荧光微球免疫法定量检测小麦中黄曲霉毒素B1

摘 要: 目的 建立量子点荧光微球免疫法快速检测小麦中黄曲霉毒素B1的方法。方法 采用量子点荧光微球作为荧光标记物,与黄曲霉毒素B1的单克隆抗体偶联,构建量子点荧光微球探针。优化缓冲液pH、抗体最小标记量、荧光探针用量和包被抗原浓度等实验条件,建立检测卡上T线和C线信号峰值面积的比值与样本中黄曲霉毒素B1浓度的关系,构建定量标准曲线。针对小麦样品,将该检测方法与时间分辨荧光定量检测方法进行比较。结果 本研究建立的荧光定量免疫层析检测方法最佳反应条件为：pH 7.5磷酸钠缓冲液,抗体标记量为20 μg,荧光探针用量为4.0 μL,抗原质量浓度使用0.40 mg/mL。小麦中黄曲霉毒素B1的定量检测线性范围为0.05 μg/kg-25 μg/kg,其线性拟合方程为Y= -0.6058X + 12.523（r2=0.9994）,检出限为0.02 μg/kg,定量限为0.05 μg/kg。加标回收率在91.50%~115.00%之间,变异系数在1.88%~4.35%之间。结论 本研究建立的荧光定量免疫层析方法快速、准确、稳定性好、可靠性高,适用于小麦中黄曲霉毒素B1的现场快速检测。     

三重real-time PCR检测副溶血弧菌主要毒力基因

针对编码副溶血弧菌的特异性基因和主要毒力基因tlh、tdh、ureR进行引物及探针设计,通过优化反应条件,建立基于Taqman探针快速检测副溶血弧菌毒力基因的三重实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）方法。利用10 株副溶血弧菌和22 株非副溶血弧菌对设计的引物及探针进行特异性验证,结果表明设计的引物及探针具有很高的特异性;优化后的引物浓度分别为tdh 0.15 μmol/L、tlh 0.15 μmol/L、ureR 0.80 μmol/L,探针浓度分别为HEX 0.50 μmol/L、FAM 0.50 μmol/L;该方法即使在高浓度的背景细菌存在下,DNA浓度与Ct值均呈良好的线性关系,检出限为1.8×102 拷贝/mL;以完整菌细胞的悬液为模板时,预变性时间为30 min,扩增检测效果与以基因组DNA（gDNA）为模板相当（ΔCt＜1）。本研究建立的三重real-time PCR方法能实现快速定量检测副溶血弧菌,并能有效区分致病性及非致病性副溶血弧菌,为副溶血弧菌的快速定量检测和风险评估提供快速、灵敏、准确的方法。     

亮橙色荧光碳点探针快速检测水产品中孔雀石绿

摘 要：目的 建立以亮橙色荧光碳点（bright orange fluorescent carbon dots, BO-CNDs）为探针的荧光检测法快速灵敏测定水产品中的孔雀石绿（malachite green,MG）。方法 对工作参数进行优化后,研究该检测方法的线性范围、灵敏度、选择性及抗干扰性,探究BO-CNDs和MG之间的相互作用,进而提出MG对BO-CNDs荧光猝灭的机制,最终将该方法应用到水产品中MG含量的测定。结果 在最佳检测条件下,BO-CNDs对MG检测的线性范围为0.01~10.00 μmol/L,检测限低至4.23 nmol/L,表现出反应快、选择性好、灵敏度高的优势。MG对BO-CNDs的荧光猝灭是内滤效应（inner filter effect, IFE）和动态猝灭协同作用的结果。最终将该检测方法应用于白鲢鱼、黑鱼、武昌鱼、鲤鱼、草鱼等鱼类样品中MG含量的测定,回收率在96.00%~102.00%之间,相对标准偏差(relative standard deviations, RSDs)低于1.01%。结论 该方法检测限低、灵敏度高、准确性好,具有应用于水产品中MG快速检测的巨大潜力。     

基于2,7-二（4-吡啶基）吖啶的荧光探针灵敏检测烟草农药残留抑芽丹

为实现烟草农药残留抑芽丹的快速定量检测，利用实验室自行设计合成的有机小分子荧光探针2,7-二（4-吡啶基）吖啶与抑芽丹分子间存在荧光作用机制，建立了烟草中抑芽丹的快速检测方法。结果表明：(1)抑芽丹在0.5～100.0μmol/L范围内线性关系良好，检出限为0.1μmol/L(0.11 mg/kg)。(2)该方法荧光响应时间为1 min，测定快速。(3)10倍浓度的其他农药对待测液的荧光强度影响不大，方法选择性好；将其用于烟草中农药残留抑芽丹检测，加标回收率介于91.0%～106.7%之间，相对标准偏差为1.4%～4.8%。该方法适用于烟草中农药残留抑芽丹的快速定量检测。     

普洱茶-硒掺杂碳量子点和单质硒的同时制备及其在Fe3+检测中的应用

目的:为探讨普洱茶-纳米硒制备掺杂型碳量子点的可行性及其相关特性,实现水体系中Fe³⁺的快速检测。方法:以普洱茶水提取物稳定分散的普洱茶-硒原子为掺杂原子,采用水浴法,通过优化反应温度和时间,同时制备出普洱茶-硒掺杂碳量子点(Pu-erh tea nano-selenium doped carbon quantum dots,PT-Se-CQDs)和单质硒两种物质;采用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱等技术表征PT-Se-CQDs的紫外-可见吸收特性和荧光强度,采用透射电子显微镜、X射线光电子能谱及X射线衍射等技术表征其形态形貌、元素组成及结构特性;并以PT-Se-CQDs为荧光探针构建荧光传感器,用于水体系中Fe³⁺检测。结果:当反应温度100℃、反应时间10 h时,可同时制备得量子产率为3.41%、平均直径约为3.1 nm的类球形PT-Se-CQDs和单质硒。Fe³⁺对PT-Se-CQDs具有强荧光静态猝灭效应,当Fe³⁺浓度为0～300μmol/L时,比率荧光强度(F/F₀)...     

芘荧光探针应用于狭鳕鱼皮凝胶形成过程的可行性研究

在狭鳕鱼皮弹性水凝胶的动态形成过程中引入了芘荧光探针。结果表明,在6.67%的鱼皮明胶溶液中,芘单体的荧光强度和I1/I3值均随芘浓度的增大先升高后降低,当芘浓度为40μmol/L时,单体荧光强度达到最大值,而当芘浓度为20～60μmol/L时,I1/I3值均处于较高水平,数值相近;探针的IE/IM值随芘浓度的增大一直升高,当芘浓度为2～40μmol/L时,比值偏低。综合考虑上述三个因素,选用浓度为40μmol/L的芘作为荧光探针应用于狭鳕鱼皮水凝胶的动态形成过程。实验确定芘I1/I3值能够用来表征溶胶中分子间的交联情况,其凝胶时间点为7h;但是IE/IM值则无法表征分子间的交联。这为表征其它鱼皮凝胶的动态形成过程提供了重要基础。     

Determination of Gibberellin A3 residue in fruit samples by liquid chromatography–tandem mass spectrometry

A fast, simple, low cost, and high throughput method has been developed for the determination of Gibberellin A3 residue in fruit samples (apple, orange, peach, pear and grape). Analysis is performed by LC–MS/MS operated in the multiple reaction monitoring (MRM) mode, acquiring two specific precursor-product ion transitions per target compound. The method has been validated showing good linearity and selectivity. Limits of quantification (LOQs) were 10 μg kg⁻¹ for apple, orange, peach, pear and grape samples. The average recoveries, measured at three concentration levels (10, 20 and 200 μg kg⁻¹) were in the range 77.8–96.2% for the compound tested with relative standard deviations below 13.7%. The proposed method is rapid, simple and could be utilised for the routine analysis of Gibberellin A3 in fruit samples.     

衍生化/表面增强拉曼光谱快速检测乳制品中 亚硝酸盐

目的基于衍生化-表面增强拉曼光谱技术,开展奶粉中亚硝酸盐快速定量分析方法的研究,建立一种简单、快速、灵敏的奶粉中亚硝酸盐的检测方法。方法采用重氮化-偶合反应,以金纳米粒子为增强试剂,将弱拉曼活性的亚硝酸根衍生成具有强拉曼活性的偶氮染料,通过对偶氮染料的测定实现对奶粉中亚硝酸盐的间接检测,优化了衍生化、前处理及检测条件。结果在优化条件下,方法的线性范围为0.030~1.0 mg/L、RSD小于14.8%、检出限为0.014 mg/L。方法用于奶粉样品分析的回收率为99.6%~128.9%、RSD为4.6%~15.8%。结论该方法简单快速、准确可靠,适用于乳制品中亚硝酸盐的分析检测。     

Upconversion Nanoparticles Capped with Molecularly Imprinted Polymer as Fluorescence Probe for the Determination of Ractopamine in Water and Pork

A novel fluorescence probe was designed and synthesized to quantify ractopamine in foods using molecularly imprinted polymer (MIP) as a specific recognition element and YF₃:Yb³⁺, Er³⁺ upconversion nanoparticles (UCNPs) as a fluorescence signaling component. The developed UCNP@MIP probe was characterized using X-ray powder diffraction, scanning electron microscopy, and thermogravimetric analysis. The fluorescence of UCNP@MIP probe was quenched specifically by ractopamine, and good linear regression ranging from 1.66 × 10^?8 to 3.3 × 10^?7 mol/L was obtained with the limit of detection of 8.6 × 10^?10 mol/L. This method was further applied to determine ractopamine in water and pork samples. Recoveries between 76.61 and 88.97% were obtained with relative standard deviation ranging from 1.15 to 2.67% (n = 3). This UCNP@MIP probe combined high selectivity of MIP and high sensitivity of upconversion fluorophore and showed potential to determine various food chemical hazards.     

基于黑磷纳米片的荧光适配体传感器检测雌激素17β-雌二醇

建立一种定量检测雌激素17β-雌二醇（E2）的荧光适配体传感器。以黑磷晶体为原料,利用超声辅助液相剥离技术制备了黑磷纳米片（BPNs）作为荧光受体,基于6-羧基荧光素标记的适配体（FAM-Apt）与BPNs间的荧光共振能量转移机制构建了荧光适配体传感器,对BPNs浓度、FAM-Apt浓度和反应时间进行优化,并对自来水和牛奶样品进行测定。结果表明,该BPNs具有独立的片层结构且粒径均匀;在最优条件下,即BPNs和FAM-Apt的浓度分别为10 μg/mL和7.5 nmol/L时,该传感器对E2检测的线性范围为1.5～60 ng/mL,检测限为1.0 ng/mL。自来水和牛奶样品中加标回收率分别为91.2%～104.8%和87.5%～104.3%;相对标准偏差（RSD）为4.99%～10.53%和4.48%～11.24%。该方法简便、灵敏,30 min即可完成检测,特异性强,能够实现对实际样品中E2的定量检测。     

高效液相色谱串联质谱法测定乳粉中低聚果糖

建立了测定乳粉中低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖)的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。乳粉样品用乙醇-水提取,上清液稀释后,采用XBridge TM Amide(3.5μm,4.6 mm×150 mm)柱,以乙腈-氨水溶液为流动相进行洗脱,电喷雾质谱负离子(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。该方法在0.5~20 mg/L范围线性良好(r0.9990,检出限最低为0.022 mg/kg)。分别在样品中添加标准物质1、5、10 mg/kg进行回收率实验,方法的回收率范围为90.8%~95.8%,相对标准偏差为3.6%~9.0%(n=6)。该方法样品前处理简单、快速,分析时间短,灵敏度、准确度和精密度均满足乳粉中低聚果糖的检测要求。     

基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌

将聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）与滚环扩增技术（rolling circle amplification,RCA）联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌（Salmonella）的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x＋2.872 3（R2=0.992 5）,线性范围为17 fg/μL～1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。     

中空纤维膜三相液相微萃取法测定猪尿及牛奶中的盐酸克伦特罗

本文建立了中空纤维膜三相液相微萃取(hollow fiber based liquid-liquid-liquid microextraction,HF-LLLME)富集浓缩猪尿及牛奶中的痕量盐酸克仑特罗,后续采用高效液相色谱/紫外(high performance liquid chromatography with a ultraviolet detector,HPLC/UV)对其进行定量分析。对影响HF-LLLME萃取效率的因素如有机溶剂种类、选择有机萃取时间、搅拌速率以及盐效应等进行了优化,最终溶剂为甲苯,萃取时间为30 min,搅拌速率为4000 r/min,给予相中不加盐,在最优条件下,考察了该方法分析性能,结果表明:该方法在1.5~1000 μg/L内具有良好的线性(r=0.9980),方法检出限(S/N=3)、定量限(S/N=10)分别为0.5和1.5 μg/L,HF-LLLME带来的高倍浓缩效率将HPLC/UV测定克仑特罗的灵敏度提高约2个数量级。萃取过程相对标准偏差(n=7)RSD=8.8%,对猪尿和牛奶分别进行5、50、500 μg/L三个水平的加标回收实验,回收率为:猪尿87.0%~102.4%(相对标准偏差为5.1%~9.8%),牛奶80.2%~94.4%(相对标准偏差为2.7%~6.4%)。该方法富集效率高、操作简单、环保、经济、可靠,适用于定量分析尿样及牛奶等中痕量的盐酸克伦特罗。