99Tcm标记HYNIC-Anx13用于细胞凋亡显像的研究

为探讨⁹⁹Tc^m标记的HYNIC-Anx13用于细胞凋亡显像的可能性，分别以N-［三（羟甲基）甲基］甘氨酸（Tricine）, 乙二胺-N,N'-二乙酸（EDDA）和EDDA/Tricine为协同配体，对经6-肼基烟酰基（HYNIC）修饰的膜联蛋白V（Annexin V）片段（HYNIC-Anx13）的⁹⁹Tc^m 标记条件和主要影响因素进行了研究，并完成了HYNIC-Anx13的⁹⁹Tc^m标记物在正常小鼠体内的生物分布和大鼠细胞凋亡模型的显像实验。实验结果表明，标记物在反应溶液和小牛血清中较稳定，但在与半胱氨酸的竞争反应中及在生物体内的稳定性较差。生物分布实验及体内显像结果表明，⁹⁹Tc^m标记HYNIC-Anx13的血液清除较快，在体内主要经肾脏排泄；在模型组的靶器官中的放射性摄取明显高于对照组（p<0.05），但靶与非靶组织的放射性比值较低，细胞凋亡组织的显像图像不够理想。     

NGR短肽的188Re标记及其在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像

采用¹⁸⁸Re标记含有天冬酰胺、甘氨酸、精氨酸（Asn-Gly-Arg,NGR）序列的肿瘤血管靶向性短肽,得到¹⁸⁸Re-NGR,观察了¹⁸⁸Re-NGR在荷HepG2肝癌细胞严重联合免疫缺陷（Severe Combined Immunodeficiency,SCID）裸鼠肿瘤模型中的生物分布,并对其进行了SPECT显像。结果显示,¹⁸⁸Re-NGR的标记率>85%,放化纯度>90%。¹⁸⁸Re-NGR在肿瘤模型鼠体内的生物分布显示,注射¹⁸⁸Re-NGR后12 h,肿瘤放射性摄取达最高,为(4.62±0.71)%ID/g,24 h时仍有(2.01±0.38)%ID/g,说明标记物在肿瘤内停留时间较长;竞争性抑制组中,12 h肿瘤放射性摄取为(1.43±0.61)%ID/g,明显低于实验组。肿瘤与肌肉组织的放射性摄取比(T/NT) 12 h为4.76。注射后1 h肿瘤可显像,4～8 h显像逐渐清晰,12 h时更为清晰。以上结果提示,¹⁸⁸Re-NGR具有良好的肿瘤血管靶向性。     

利卡汀的人体显像和组织分布

摘要：研究我国具有自主知识产权的国家一类新药—碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2注射液的人体显像和组织分布特征。拟定纳入标准、排除标准和剔除标准，严格按标准选择患原发性肝细胞肝癌的受试者24例，平均分为3组，分别为低剂量组（注入量18.5 MBq/ kg人体）、中剂量组（注入量27.75 MBq/ kg人体）和高剂量组（注入量37 MBq/ kg人体），每组8例。再采用溴代琥珀酰亚胺法标记制备碘[131I]-肝癌单抗片段 HAb18 F(ab’)2注射液后，各组每位受试者经插至肝固有动脉或肿瘤的供血肝动脉的导管注入相应的碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2注射液，并在给药后不同时刻进行全身显像，用感性趣区技术测定受试者组织的放射性计数率，计算受试者组织的放射性药物摄取率及肝肿瘤组织/非瘤组织（T/NT）比值，以观察药物在各组织及肿瘤内分布的动态变化。研究显示：碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2在肝癌组织中有明显的摄取，早期主要浓聚于肝癌组织及肝组织中，体内其他组织的浓聚甚少；随着时间的延长，肝癌组织的放射性浓聚相对于肝组织持续增强，而肝组织的放射性逐渐减少；在显像期间（8 d），除肝外的其他正常组织的T/NT值为1.04～3.79，而肝脏的T/NT值随时间推延而增加，至d8时为1.09。因此，碘[131I]-肝癌单抗片段 HAb18 F(ab’)2注射液能特异性结合肝癌组织。     

125I标记重组MIF在炎症模型小鼠体内的生物学分布

为初步评价125I-rMIF(重组巨噬细胞移动抑制因子,Recombinant Macrophage Migration Inhibition Factor ,rMIF)在炎症显像中的应用价值,研究了125I-rMIF的稳定性、特异性及在炎症模型小鼠体内的生物学分布规律.结果显示,125I-rMIF的标记率为96.5%,室温下48 h内其生物学性质稳定.体内生物学分布研究显示,125I-rMIF主要由肝脏和肾脏代谢,血液清除较快.尾静脉注射125I-rMIF 0.5、1、6、24 h后,炎症肢体(靶)与对侧健肢(非靶)的放射性摄取比(T/NT)分别为1.42、1.35、2.18和2.05.以上结果表明,125I-rMIF具有在活体内炎症定位导向能力,但在早期优越性不明显,6 h后效果较佳,因此对隐匿性或亚急性炎症病灶的诊断具有潜在的临床价值.     

177Lu-DOTMP在荷瘤小鼠体内的生物分布和兔SPECT显像研究

以1,4,7,10-四氮杂环十二烷和亚磷酸为原料合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四甲撑膦酸（DOTMP）,并对其进行了¹⁷⁷Lu标记;观察了¹⁷⁷Lu-DOTMP在骨转移癌模型鼠体内的生物分布,并对日本大耳白兔进行显像。荷瘤鼠体内的生物分布结果显示：¹⁷⁷Lu-DOTMP可以选择性地在骨组织吸收,具有良好的靶向性,而且在血中清除较快,在其它脏器只有少量的摄取。日本大耳兔显像结果显示：¹⁷⁷Lu-DOTMP主要聚集于膀胱组织,即¹⁷⁷Lu-DOTMP主要通过肾排泄;注射后22 h 骨骼放射性摄取明显,46 h骨骼中放射性积聚更多。以上结果表明,¹⁷⁷Lu-DOTMP具有良好的骨靶向性,值得进一步研究。     

叶酸-青霉素G酰化酶对SKOV3实体肿瘤靶向性的实验研究

采用Iodogen法对叶酸-青霉素G酰化酶(Folate-conjugated Penicillin G Amidase,F-PGA)和PGA进行125I标记。将纯化后的标记物由尾静脉注入荷SKOV3实体瘤裸鼠体内,观察F-PGA对叶酸受体阳性的SKOV3的靶向性。结果显示:标记产品纯化后放化纯度>95%,且体内外稳定性较好;荷SKOV3肿瘤的裸鼠注射125I-F-PGA后4~24 h肿瘤显像较清晰,而注射125I-PGA组所有时相均未见明显的肿瘤部位放射性浓聚影;125I-F-PGA组的肿瘤与健侧肌肉的摄取比值(T/M)明显高于对照组(F=13.38,P=0.014 6),且在非靶组织中清除较快。表明F-PGA在荷瘤鼠体内能特异性地与叶酸受体阳性的SKOV3实体肿瘤进行靶向结合,其T/NT>1,有望用于靶向治疗。     

99Tcm标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用⁹⁹Tc^m标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（Asn-Gly-Arg）序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物⁹⁹Tc^m-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1 h肿瘤摄取达（2.52±0.62）%ID/g,最高达（7.26±2.71）%ID/g,12 h仍然达（3.93±1.93）%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为（1.29±0.85）%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比（T/NT）4 h时最高,可达3.25。注射后1 h肿瘤可见,12 h时最为清晰。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-NGR易于制备,具有良好的靶向性, 在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。     

125I标价重组MIF在炎症模型小鼠体内的生物分布

摘要：目的:初步评价125I标记巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在炎症显像中的应用价值。方法：Iodogen法制备125I-MIF,研究其稳定性、特异性及在炎症模型小鼠体内的生物学分布规律。结果：125I-MIF的标记率为96.5%,室温下48小时内标记化合物的生物学性质稳定。体内分布表明125I-MIF主要由肝脏代谢,经肾脏排泄,血液清除较快。尾静脉注射125I-MIF 0.5、1、6、24小时后,炎症肢体（靶）与对侧健肢（非靶）的%ID比值（T/NT）值分别为1.42、1.35、2.18和2.05。结论：125I-MIF具有在活体内炎症定位导向能力,但在早期优越性不明显,6小时后效果较佳,对隐匿性或亚急性炎症病灶的诊断有潜在的临床价值。     

99Tcm-MIBI与99Tcm-GSH在荷瘤鼠体内分布的实验研究

对＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＭＩＢＩ和＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＧＳＨ在荷骨肉瘤裸鼠,荷乳癌ＥＡＣ和荷肉瘤Ｓ１８０小鼠体内的摄取分布进行实验研究,以探讨其在肿瘤诊断中的应用价值。结果表明,静脉注射＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＭＩＢＩ,小鼠肿瘤部位未见明显放射性浓聚,肝脏,心脏及膀胱有明显放射性浓聚,除血,脑及脾外,靶与非靶放射性比）Ｔ／ＮＴ）均〈１．０;１５及９０ｍｉｎ乳癌ＥＡＣ和肉瘤Ｓ１８０中的放射性摄取分别为１．４８、１．０     

^99Tc^m—DTPA在细菌性脓肿中的浓聚和显像

将１８．５ＭＢｑ＾５５Ｔｃ＾ｍ－ＤＴＰＡ经静脉注入股部荷细菌性脓肿的小鼠体内进行显像和生物分布检测。结果表明注药后短欺内即可获显示脓肿灶的满意图像。生物分布检测表明脓肿内放射性在０．５，１，３，６，２４ｈ均明显高于对侧未未致炎肌肉。     

~（99m）Tc直接法标记鼠／人嵌合抗体ccM_4及在动物体内分布研究和初步临床应用

ＳｎＣｌ２还原９９ｍＴｃＯ４后与２－巯基乙醇还原的ｃｃＭ４混合标记．薄层层析测定标记率为９８％．ｃｃＭ４嵌合抗体标记前后免疫活性没有明显变化（Ｐ＞０．０５）。动物体内分布实验结果显示：注射９９ｍＴｃ－ｃｃＭ４后１２ｈ．其放射性主要分布在肾（８．１７±１．０９ＩＤ％／ｇ）．肝（６．９４±１．７９ＩＤ％／ｇ）和血液（４．０３±１．０ＩＤ％／ｇ）；荷瘤裸鼠实验显示，１２５Ｉ－ｃｃＭ４瘤体内聚集量最多。９９ｍＴｃ－ｃｃＭ４初步应用于１０例胃癌患者．     

SA-gal在肿瘤放免治疗中清除作用的实验研究

研究半乳糖化链霉亲和素（Streptavidin-gal,SA－gal)和亲和素（Avidin,Av）在大肠癌预定位放免像中对血中标记生物素化单抗的“消除”作用。从荷瘤鼠的尾静脉内注射^131I标记的生物素化单抗（^131I-bt-McAb)预定位于肿瘤靶位,24h后2组实验组分别给予SA－gal和Av,再过6h分别行体内分布测定和显像。对照组未给予清除剂。结果表明,SA－gal、Av使用后6h,血中^131I-bt-McAb水平都明显降低,肿瘤／血比值明显提高（对照组、Av清除组、SA－gal清除组的肿瘤／血比值分别为0．42、2．09、5．23,3组之间P＜0．05）;与Av相比,SA－gal清除作用更强,而且在体内脏器分布上,其非特异性摄取也明显地较Av少。实验结果提示,SA－gal和Av作为清除剂在肿瘤预定位放免治疗中能有效地加快血中标记单抗的清除,使肿瘤靶／非靶比值得以明显地提高;两者相比,SA－gal优于Av。     

~(99m)Tc标记生长抑素类似物KE108的制备及生物学评价

为了探讨生长抑素类似物~(99m)Tc-HYNIC-KE108用于生长抑素受体阳性肿瘤显像的可行性,本研究设计合成了新型的生长抑素类似物HYNIC-KE108,并进行~(99m)Tc标记,优化标记条件,测定标记物的脂水分配系数和体外稳定性,研究其在正常小鼠及荷瘤鼠体内的生物分布。在优化条件下,~(99m)TcHYNIC-KE108的标记率90%,经Waters Oasis HLB小柱纯化后,放化纯度98%,标记物的脂水分配系数logP为0.43±0.02(n=3),体外稳定性良好。标记物在正常小鼠体内血液清除快,主要通过肾脏代谢,在胃、肺和肝脏中放射性摄取相对较高。荷瘤鼠体内分布结果表明,标记物注入体内4h时在肿瘤中的放射性摄取为(1.14±0.91)%ID·g-1,肿瘤与血、肌肉、心脏的放射性摄取比(T/NT)为1.78、8.14、3.35。本工作为进一步研究~(99m)Tc标记的KE108作为生长抑素受体阳性肿瘤显像剂提供了实验依据。     

经Avidin—Biotin系统^99mTc标记单抗及其在荷瘤裸鼠体内分布研究

采用Ａｖｉｄｉｎ－Ｂｉｔｉｎ系统进行了抗人黑色素瘤单抗Ｎｇ７３的＾９９ｍＴｃ标记、研究了标记条件，方法和标记抗体在荷裸鼠活体内的生物学分布１。结果表明，ｐＨ＝８和ＳｎＣｌ２适量时标记效果最好；两步法Ｂ的Ｔ／ＮＴ和ＩＤ％／ｇ值均明显优于两步法Ａ。经Ａｖｉｄｉｎ－Ｂｉｏｔｉｎ系统＾９９ｍＴｃ标记单抗可用于放射免疫显像。     

99Tcm标记小干扰RNA探针的干扰活性及其在荷瘤鼠体内的生物分布

使用双功能螯合剂NHS MAG3和氯化亚锡还原法构建99Tcm标记的小干扰RNA（Small Interference RNA,siRNA）探针。将标记和未标记的端粒逆转录酶（Human Telomerase Reverse Trancriptase,hTERT）靶向siRNA转染至肝癌HepG2细胞,72 h后,蛋白印迹法显示两者具有相近的蛋白抑制率（约76.7%）。标记物在荷HepG肿瘤裸鼠体内的生物分布显示,肾脏分布最高,其次为肝脏。注射hTERT靶向探针后 1～6 h内,肿瘤分布由（0.82 ± 0.16）%ID/g增加至（0.97 ± 0.15）%ID/g,肿瘤与血液和肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T/NT）分别为2.62 ± 0.70和6.02 ± 0.52,显著高于对照组（P< 0.05）。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-siRNA探针对活体肿瘤示踪具有良好的研究前景和潜在的应用价值。     

靶向CD93分子探针制备及其生物学实验研究

CD93分子作为一种新型新生血管生成激活剂,有可能成为肿瘤监测的重要分子靶点,因此制备125I标记抗CD93单抗(125I-anti-CD93 mAb),研究其在荷瘤鼠体内生物学分布及磷屏显像特点,探讨其对A549肺癌靶向性及CD93阳性肿瘤监测的可行性。本文制备125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG并进行鉴定;建立A549肺癌荷瘤小鼠模型,经尾静脉注射125I标记抗CD93单抗,并设125I-IgG为对照组,注药后不同时间进行生物学分布及磷屏放射自显影;肿瘤组织行HE染色及CD93免疫组织化学染色;采用统计软件对定量数据(x+s)进行统计学处理,组间数据用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果表明,125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG标记率、放射性比活度、放化纯度分别为91.37%和90.24%,1096.44 MBq/mg和1082.88 MBq/mg,96.49%和94.82%,放置72 h后两标记物的稳定性仍>90%,两者间无统计学差异(生理盐水组P=0.93,t=0.09,血清组P=0.13,t=1.90)。荷瘤鼠生物学分布结果显示125I-anti-CD93 mAb主要经肝肾代谢,注射后48 h时肿瘤组织放射性摄取率为(6.42±0.71)%ID/g,T/NT(瘤/对侧肌肉)摄取比值为4.45±0.86,显著高于对照组125I-IgG组(2.45±0.33/1.71±0.24),P<0.05,t=3.07和P<0.01,t=5.10。动态全身磷屏自显影结果可见,24 h两组小鼠轮廓清楚,48 h时实验组肿瘤显像最清晰,肿瘤放射性摄取比(肿瘤/对侧肌肉)为3.34±0.18,明显高于对照组(1.62±0.19),P<0.01,t=6.52。免疫组化染色结果证实肿瘤高表达CD93。125I-anti-CD93 mAb制备简便,对A549肺癌组织靶向性好,有望成为CD93阳性肿瘤监测的新型分子探针。     

~(68)Ge/~(68)Ga发生器的临床应用

对新型~(68)Ge/~(68)Ga发生器的最佳淋洗时间、最佳峰段以及不同缓冲液对68 Ga显像及生物分布的影响进行研究,为动物实验和临床应用提供参考。采用4mL 0.05mol/L HCl淋洗740 MBq ITG~(68)Ge/~(68)Ga发生器,首次淋洗后分别隔2、4、6、8、10、12、14h再次淋洗,记录放射性活度;先以每段0.5mL收集淋洗液,在比活度较高段以每0.1mL收集淋洗液,记录放射性活度;分别用乙酸钠、NaOH、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)调节~(68)Ga~(3+)溶液pH,在正常小鼠体内行microPET显像。结果表明:在淋洗4h后,放射性活度可达平衡时的91%;最佳峰段为2~3 mL,放射性活度峰段的0.1 mL可收集22 MBq的~(68)Ga~(3+);~(68)Ga~(3+)在血液中摄取值高,1h仍有6.9%ID/g,表明游离的~(68)Ga~(3+)可能会影响图像的对比度,需要在标记放射性药物后去除残余的游离~(68)Ga~(3+);膀胱的放射性摄取高,提示~(68)Ga~(3+)通过泌尿系统排泄;乙酸钠、NaOH、HEPES调节pH后对~(68)Ga在正常小鼠体内显像及生物分布均无统计学差异(P0.05)。新型~(68)Ge/~(68)Ga发生器操作简便,每4h即可淋洗一次,淋洗液的峰段在2~3mL,建议临床采用乙酸钠缓冲液。     

生长抑素类似物EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA的99Tcm标记及动物实验

本文设计合成了新的生长抑素类似物99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA,并进行了正常小鼠及荷瘤裸鼠体内分布和显像,以探讨99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA作为生长抑素受体阳性肿瘤显像药物的可能性。合成了Nε-HYNIC-Lys0-TOCA及其中间产物,并经核磁共振谱和质谱等分析确证。在优化的标记条件下,99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA的标记率为96%左右,经Sep-Pak柱纯化后,放化纯达99%以上。体外稳定性实验及小鼠尿样分析表明标记物具有很好的体内外稳定性。99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA在正常小鼠体内的清除非常迅速(血液半衰期为20min左右),主要通过肾脏途径代谢,同时在胃、肺和肾上腺也有相对较高的放射性摄取。荷瘤裸鼠体内分布实验显示该药物在肿瘤组织有较高的放射性摄取,给药1h后肿瘤与血、肌肉等组织有较高的T/NT比值。γ显像表明,在给药后1h至2h,肿瘤组织有明显的放射性摄取,显像清晰。初步研究结果显示,该药物有望发展成为生长抑素受体阳性肿瘤的显像剂。     

用^111In标记单克隆抗体和动物分布与显象研究

研究了用~(111)In通过DTPA环二酸酐标记单克隆抗体(McAb)的各个实验环节,制备了超纯~(111)In,得到了高比活度1.11GBq/mgMcAb、具有免疫反应活性的~(111)In-McAb。对用~(111)In标记的抗CEA McAb C14-C50、抗人结肠癌McAb 2C10和鼠IgG在荷瘤裸鼠模型体内分布及体外显象进行了研究。注射单抗的动物得到清晰的肿瘤显象,而注射普通IsG的动物的肿瘤不显象。