明日叶查尔酮制备方法与抗衰老作用研究进展

查尔酮是药食兼用植物明日叶中一类具有多种生物活性及药理活性的特殊黄酮类物质。综述了国内外明日叶中查尔酮类化合物的提取分离方法及抗衰老作用研究进展,介绍了衰老和抗衰老机理模型,以及抗衰老作用的研究方法,为明日叶查尔酮的进一步研究和利用提出了建议。     

超声波辅助提取明日叶查尔酮的工艺优化

探讨超声波辅助萃取技术在明日叶查尔酮提取应用中的最佳工艺,并测定明日叶中查尔酮的含量。采用单因素实验研究超声功率、乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对明日叶查尔酮提取率的影响,在此基础上,利用正交试验确定超声波辅助提取明日叶中查尔酮的最佳工艺条件。在所探讨的因素中,对明日叶中查尔酮提取的影响程度为:料液比乙醇浓度提取温度提取时间超声功率。最佳工艺参数:超声波功率300 W,乙醇浓度为70%,提取温度为50℃,料液比为1∶50,萃取时间为20 min,提取二次后吸光值为1.191,查尔酮得率为7.53 mg/g。明日叶中查尔酮含量较高,优化的提取工艺简便、高效、节能、可行,为明日叶查尔酮的工业化提取提供参考。     

串叶松香草超氧化物歧化酶提取工艺优化及对D-半乳糖致衰老模型小鼠的保护作用研究

目的 优化串叶松香草超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的提取工艺, 并研究串叶松香草SOD对D-半乳糖致衰老模型小鼠的保护作用。方法 采用高压脉冲电场法提取SOD, 以串叶松香草为原料, 进行最佳提取工艺的研究, 以SOD酶活力为指标, 在单因素实验基础上, 进一步通过响应面实验对提取工艺进行优化。同时采用随机法把小鼠分为空白对照组、模型组、串叶松香草SOD低、中、高剂量组、维生素C (vitamin C, VC)阳性对照组。除空白对照组外, 其余5组均皮下连续注射D-半乳糖, 采用注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型。通过观察和测定各组小鼠的行为和体质量, 研究其衰老的变化情况; 采用分光光度计法测定小鼠血清中SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。结果 最佳提取工艺条件为: 电场强度20 kV/cm、脉冲数10个、提取时间32 min, 在此条件下, 提取的串叶松香草SOD酶活力为3878.67 U/g。串叶松香草SOD对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用表明: 串叶松香草SOD能改善衰老小鼠的体征, 提高衰老小鼠的体质量, 具有较好的抗肝萎缩和脑萎缩作用, 同时还能提高衰老小鼠血清中SOD、GSH-Px、CAT的活力, 降低其MDA含量, 达到延缓衰老的作用。结论 该研究获得了串叶松香草SOD的最佳提取工艺, 得到的串叶松香草SOD能够延缓小鼠衰老。     

高效液相色谱测定明日叶中查尔酮的含量

以明日叶为原料,乙醇为提取溶剂,用高效液相色谱法测定明日叶中查尔酮含量。采用单因素和正交试验对料液比、乙醇浓度、提取时间和提取温度进行了考察。结果表明:对查尔酮的含量影响最大的是料液比,超声时间对明日叶中查尔酮含量的影响最低,乙醇浓度和超声温度对查尔酮含量影响不大。最佳工艺参数为乙醇浓度80%,提取温度80℃,料液比1∶30(g/mL),提取时间为30 min,此时查尔酮得率为22.765 mg/g。     

明日叶查尔酮对增强免疫力和抗运动性疲劳的效果

目的:研究明日叶查尔酮增强过度训练小鼠的免疫力及抗疲劳的能力。方法:建立雄性ICR小鼠8周跑台的过度训练模型,将模型小鼠分为4个免疫大组(共200只,每大组n=50),每个免疫大组又分为低、中、高3个剂量组(160、320、800 mg/kg)、过度训练组及阳性对照组(红景天西洋参胶囊200 mg/kg)(n=10),各剂量组以不同剂量的明日叶查尔酮灌胃并分别与过度训练组和阳性对照组进行比较,评价过度训练小鼠抗疲劳能力相关指标;并通过体液免疫、细胞免疫、单核巨噬细胞功能和自然杀伤细胞水平评价其免疫能力。结果:与过度训练组比较;明日查尔酮中、高剂量组的肌、肝糖原含量显著升高(P0.05),血尿素氮含量、血清乳酸脱氢酶活力、血清肌酸激酶含量显著降低(P0.05),并与阳性对照组没有显著差异;中、高剂量明日叶查尔酮能够提高自然杀伤细胞水平,促进小鼠抗体形成细胞增殖,促进脾淋巴细胞增殖转化。结论:明日叶查尔酮具有较好缓解运动性疲劳、增强免疫力的作用。     

贡菊多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

目的:探讨贡菊多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老的作用。方法:将小鼠随机分为5组:空白对照组,D-半乳糖衰老模型对照组(80mg/kg·d bw),贡菊多糖低、中、高剂量组(50、100、150mg/kg·d bw),考察血清和肝中SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC和血清、肝及脑中的MDA等指标。结果:贡菊多糖能拮抗D-半乳糖所致的小鼠衰老,使小鼠血清及肝组织SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活性明显回升,血清、肝脏和脑组织中MDA的水平下降。结论:贡菊多糖具有延缓衰老的作用。     

明日叶查尔酮抗肿瘤作用研究进展

明日叶为原生于日本的食药兼用植物,其主要活性成分为查尔酮类化合物。近年来,明日叶查尔酮因其显著的抗肿瘤活性而受到科研工作者的关注。本文总结了目前已从明日叶中分离鉴定的查尔酮类活性物质的种类及其在明日叶中的分布情况,并主要从其体内外抗肿瘤活性,抑制细胞生长及增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞血管生成、抗氧化作用、增强机体免疫力、抑制肿瘤细胞侵袭和转移等方面综述其抗肿瘤作用研究进展,以期为明日叶天然查尔酮资源的进一步研究及开发利用提供方向和建议。     

响应面法优化黑果枸杞蛋白提取工艺及其抗衰老活性研究

采用响应面法优化黑果枸杞蛋白(Lycium ruthenicum protein,LRP)提取最佳工艺,研究黑果枸杞蛋白的抗衰老活性。在单因素试验基础上,以蛋白提取率为响应值,提取时间、提取次数及液料比为考察因素,采用响应面法对LRP提取工艺进行优化。试验结果表明LRP提取最佳条件为pH 7,提取时间21 h,提取次数2次,液料比17∶1(m L/g);经验证试验得出平均蛋白提取率为8.62%,与模型预测值相近,优化后的提取工艺稳定可行。以D-半乳糖制衰老模型小鼠为研究对象,评价LRP对衰老模型小鼠抗衰老的作用。昆明种小鼠随机分为空白、模型、黑果枸杞蛋白高、中、低剂量组(125、250、500 mg/kg)。给药30 d后,测定衰老模型小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(gutathion peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果显示,LRP能显著降低MDA含量并提高SOD、GSH-Px和CAT活力。结果表明黑果枸杞蛋白对D-半乳糖诱导的衰老小鼠具有延缓衰老作用,其机制可能与清除体内自由基有关。     

胡萝卜多糖与维生素E抗衰老作用比较研究

目的:研究胡萝卜多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用.方法:对小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖制造衰老模型小鼠,采用维生素E和不同剂量的胡萝卜多糖对小鼠灌胃处理.结果:胡萝卜多糖能显著提高小鼠血清、肝、脑中SOD、CAT的含量,降低小鼠血清、肝、脑中MDA的含量,提高小鼠血清、肝、脑T-AOC(总抗氧化能力);高、中剂量的胡萝卜多糖效果与一定量维生素E效果相当.结论:胡萝卜多糖有一定的抗氧化作用,从而起到抗衰老作用.     

明日叶中总黄酮的提取工艺优化和检测方法的对比研究

采用单因素和正交试验对明日叶中总黄酮的提取工艺进行优化,并对检测方法进行对比研究。硝酸铝显色法确定最佳提取工艺:60%乙醇回流,30倍溶剂用量,提取100 min,提取2次,总黄酮提取率为1.946%;氯化铝显色法确定最佳提取工艺:80%乙醇回流,40倍溶剂用量,提取为100 min,提取1次,总黄酮提取率为1.811%。所选取的提取工艺提取效率高、稳定,为明日叶的综合利用提供了依据。     

葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠抗氧化作用

目的：研究葡萄籽原花青素提取物对衰老小鼠心脏、肝、脑和血清抗氧化功能的影响。方法：采用纤维素酶辅助浸提葡萄籽原花青素,经大孔树脂吸附纯化后灌胃由D-半乳糖连续皮下注射诱导的亚急性衰老模型小鼠,以各组小鼠心脏、肝、脑和血清中的总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量为指标,全面评价葡萄籽原花青素提取物在小鼠体内的抗氧化能力。结果：与空白对照组相比,模型对照组小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活力均有不同程度的降低,MDA含量有不同程度的升高,其大多变化差异显著,说明小鼠衰老模型构建成功。与模型对照组相比,葡萄籽原花青素提取物各剂量组能增强模型小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活力,同时降低MDA值,其中大多变化差异显著,而血清中各值变化差异极显著。结论：葡萄籽原花青素提取物能够显著增强亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,具有延缓衰老的作用。     

刺梨预防D-半乳糖诱发小鼠皮肤衰老的作用研究

考察刺梨对D-半乳糖引起的皮肤衰老模型小鼠的保护作用。实验测定服用刺梨期间动物皮肤水含量,服用结束后皮肤超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)及透明质酸(hyaluronic acid,HA)水平,同时对血清中抗氧化指标进行检测,并以苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察皮肤组织结构。结果表明:在慢性注射D-半乳糖诱发皮肤衰老的小鼠模型中,刺梨能显著增加皮肤水含量,增强皮肤中SOD活力,减少脂质过氧化产物MDA的积累,增加HYP和HA水平,改善衰老皮肤的组织结构。可见,刺梨能显著减轻D-半乳糖引起的小鼠皮肤衰老。     

平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的抗氧化作用

为了探讨平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的体内抗氧化作用,采用颈背皮下注射D-半乳糖(500mg/(kg ·d))建立亚急性衰老小鼠模型,通过对各组小鼠一般体征、脏器指数、血清或肝组织抗氧化酶活性及脑组织单胺氧化酶(MAO)活力的比较分析,全面评价平贝母多糖FUP-1的抗氧化衰老作用。结果表明：与模型组相比平贝母多糖FUP-1能显著降低D-半乳糖诱导衰老小鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量(P＜0.05),提高肝组织中总抗氧化能力(T-AOC)、显著提高肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P＜0.05),同时降低脑组织中MAO活力。提示平贝母多糖FUP-1具有一定的延缓衰老作用,其作用可能与其提高抗氧化酶活性和抗脂质过氧化有关。     

低共熔溶剂提取江南卷柏穗花杉双黄酮的工艺优化

采用低共熔溶剂超声辅助技术提取江南卷柏中穗花杉双黄酮(AME）,并优化其工艺参数。通过一步法制备3种低共熔溶剂,并筛选出提取江南卷柏AME效果最佳低共熔溶剂,通过核磁共振、傅里叶红外光谱和热重分析表明低共熔溶剂被成功制备,并采用单因素和响应面法优化江南卷柏中AME的提取工艺。结果表明,最佳低共熔溶剂为氯化胆碱:香叶醇,最佳提取工艺条件为:摩尔比1:2,含水量20%,液固比10 mL/g,超声时间31 min,超声功率为240 W。在此条件下,AME的提取得率为（2.75±0.12） mg/g。与热浸法、冷浸法、离子液体超声提取法、乙醇超声提取法进行对比表明,低共熔溶剂结合超声提取不仅能够节约提取时间,还能显著增加AME提取得率。     

GA的提取分离工艺优化及其体内抗氧化活性作用

目的：探讨利用漆酶破壁结合超声波辅助法提取灵芝孢子粉中灵芝酸（ganoderma acid,GA）组分以及GA对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的体内抗氧化活性的影响。方法：利用正交试验将工艺条件优化;D-半乳糖连续皮下注射进行亚急性衰老小鼠造模,建模同时,以抗坏血酸为阳性对照组,GA设立高、中、低剂量组对衰老模型小鼠进行灌胃,另设立空白对照组和模型对照组,灌胃0.5%的羧甲基纤维素钠溶液（sodium carboxymethylcellulose,CMC-Na）,每周测一次体质量,6 周后分别测所有小鼠血清、肝脏、脑组织的总超氧化物歧化酶（totalsuperoxide dismutase,T-SOD）活力、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,血清和脑组织的谷胱甘肽过氧化物歧化酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）活力、血清和肝脏的总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）值。结果：得到最优工艺条件为料液比1∶60、加酶量0.04 g/mL、超声3 次、每次超声时间3 h,在此工艺条件下得到GA的提取率为1.69%;GA可明显提高小鼠体内T-SOD、GSH-PX活力和T-AOC值,降低MDA含量。结论：得到GA的最佳提取工艺稳定可行;GA能显著提高衰老模型小鼠的体内抗氧化能力。     

宝乐果(Borojo)水果浓缩粉对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的：研究宝乐果(Borojo)水果浓缩粉对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用。方法：昆明种雄性小鼠腹腔注射50mg/kg D-半乳糖建立衰老模型,用Borojo水果浓缩粉连续给小鼠灌胃30d,测定各组小鼠血清及肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)的含量。结果：Borojo水果浓缩粉的中剂量组(4.0g/(kg·d))和高剂量组(6.0g/(kg·d))小鼠血清和肝脏的SOD活力显著提高(P＜0.05)、血清MDA含量显著降低(P＜0.05);高剂量组小鼠血清和肝脏中GSH-Px活力显著提高(P＜0.05),肝脏MDA含量显著降低(P＜0.05)。结论：Borojo水果浓缩粉具有良好的体内抗氧化作用。     

红花籽油对D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用

为了研究红花籽油的抗衰老作用,采用红花籽油灌胃D-半乳糖致衰老小鼠模型,利用试剂盒测定这些小鼠脑肝组织的丙二醛(MDA)含量,单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。统计分析各组之间与衰老和抗衰老有关成分含量的差异显著性。结果表明:红花籽油组小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性显著(P0.05)或极显著(P0.01)低于衰老模型组;GSHPx、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性极显著高于衰老模型组。红花籽油的抗衰老机制可能是:通过清除自由基,抑制自由基诱导的脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物产生;通过改善机体新陈代谢,促进D-半乳糖分解和代谢,改善物质能量代谢,调节与衰老有关的基因表达,抑制MAO基因表达,降低脑肝组织的MAO含量;促进GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD基因表达,提高脑肝组织GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD含量。红花籽油能显著降低衰老模型小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性,显著提高GSH-Px、SOD-1和SOD-2活性,具有显著的抗老作用。     

超声波辅助-绿色低共熔溶剂提取 茉莉花黄酮的工艺优化

本文以茉莉花为原料,通过比对水、乙醇和8种低共熔溶剂在内的10种溶剂,以及超声波和微波提取,旨在探索一种绿色、高效的茉莉花黄酮提取技术。通过单因素试验考察低共熔溶剂的摩尔比、含水量、液料比、超声时间以及超声功率对黄酮得率的影响。在单因素的基础上,采用响应面法对提取工艺进行优化。研究表明:茉莉花黄酮最优提取技术为超声波辅助-绿色低共熔溶剂提取;最佳工艺条件为:甜菜碱盐酸盐:蔗糖:水=1:1:94.50,液料比为149:1 (mL/g),时间为20 min,超声功率为90 W,此条件下提取量为15.24 mg/g,实验结果与响应面模型预测值接近,表明模型适用。茉莉花黄酮经此工艺所得的提取量是传统水提的677%、正交优化超声波提取的200%,充分表明超声波辅助-绿色低共熔溶剂提取技术的高效性。研究结果为茉莉花资源的进一步开发利用提供数据支撑。     

原花青素B2对D-半乳糖模型小鼠的代谢组学研究

为探究原花青素B2对D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用及特征代谢产物的变化差异,将 C57BL/6小鼠随机分为3 组：对照组、模型组、原花青素B2组。采用旷场迷宫、Y型食物诱导型迷宫和Morris水迷 宫检测各组小鼠的学习记忆能力,并测定小鼠肝、脑、肾中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、总抗氧化能 力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物 酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力,通过液相色谱-质谱联用技术寻找各组间代谢产物的差异。结果显示： 原花青素B2能改善衰老小鼠的学习行为能力,在肝、脑、肾组织中,原花青素B2提高了T-AOC、SOD和GSH-Px活 力,而显著降低了MDA的含量（P＜0.05）。小鼠血浆代谢组学数据显示泛酸、丙酮酸、亚油酸、α-酮戊二酸、马 尿酸等17 种标志性代谢产物含量发生变化,其抗衰老机制可能涉及糖代谢、脂类代谢等多条代谢通路。