从三七茎叶皂苷中分离纯化人参皂苷C-Mx1和Rb3

利用两步硅胶柱层析法,从三七茎叶皂苷中分离纯化人参皂苷Rb3和C-Mx1单体。30g三七茎叶皂苷,经分离得到纯度为50%~60%的粗品C-Mx1 4.66g和Rb3 8.58g;将C-Mx1和Rb3粗品皂苷进行二次硅胶柱分离,得到纯度为95%的C-Mx1单体0.92g和Rb3单体3.1g。以核磁共振法证明了分离产物为C-Mx1和Rb3皂苷。     

高产人参发根系的建立及发根中皂苷Rb1的分离纯化

利用发根农杆菌A4菌株在2年生人参根外植体上直接诱导产生人参发根。对16个人参发根系比生长速率及人参总皂苷含量进行测定,得到3个具有较高比生长速率和人参皂苷含量的发根系。其中发根系R9923具有最高的比生长速率,在连续培养4周后生长量比最初提高了28.8倍。研究R9923发根系的生长曲线和皂苷含量变化规律发现,随着发根生物量的增加,发根中皂苷含量积累得也越多。利用HPLC法测定了R9923发根系中单体皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。生长4周的人参发根总皂苷含量达15.2 mg/g,其中人参皂苷Rb1的含量为68.3%,比3年生栽培人参中Rb1含量高1.3倍,可以用于大规模培养。用硅胶柱层析法从人参发根总皂苷中分离提纯人参皂苷Rb1,当洗脱剂中氯仿∶甲醇=7.5∶2.5(体积比)时洗脱效果较好。用硅胶柱法提取的皂苷Rb1纯度为89.95%,得率为72.7%。     

微生物转化人参皂苷Rb1为Rg3的研究

利用18种菌株对人参皂苷Rb1进行生物转化研究,发现一种绿毛状GY-06菌使人参皂苷Rb1有效地转化为Rg3．经形态学和内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）基因序列分析,确定其为一种扩展青霉（Penicillium expansum）．     

RP-HPLC测定人参中Rb1的含量

探讨了分析人参提取液中人参皂苷的液相色谱方法。Rb1在人参水提取液、醇提取液、超声提取液中的含量分别为0 116、0 135、0 224mg/g(以每克生药计),加样回收率分别为96 3%、98 6%、96 9%。实验结果还表明人参提取液在25℃条件下24h内保持基本稳定。     

乳酸菌对人参皂苷Rb1的生物转化研究

从酸奶、酸菜汁、辣白菜、水果中分离得到5种乳酸菌(L1-L5),并利用分离得到的乳酸菌进行人参皂苷Rb1的生物转化.结果表明,除了菌株L2外,其他4种乳酸菌均能将人参皂苷Rb1转化为稀有人参皂苷F2或C-K.经鉴定,菌株L1为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),菌株L5为植物乳球菌(Lactococcus plantarum),其他3种均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究.结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉 5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28 ℃;酶反应的最适条件为25 ℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL.     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28℃;酶反应的最适条件为25℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL。     

人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc

利用基因构建克隆的E.coli C41菌产人参皂苷酶Ⅲ型,研究了酶转化人参皂苷Rc制备高活性稀有皂苷C-Mc的方法。结果发现,人参皂苷酶Ⅲ型先水解人参皂苷Rc的3-O-末端葡萄糖基生成C-Mc1,再水解C-Mc1的3-O-葡萄糖基生成C-Mc。人参皂苷酶Ⅲ型水解4.8g的人参皂苷Rc,得到2.8g产物,经HPLC检测,其纯度为90%。经核磁共振检测,产物结构为20-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖基-20(S)-二醇苷元,即C-Mc。     

RP-HPLC测定人参中Rb1的含量

探讨了分析人参提取液中人参皂苷的液相色谱方法。Rb1在人参水提取液、醇提取液、超声提取液中的含量分别为0．116、0．135、0．224mg／g(以每克生药计)，加样回收率分别为96．3％、98．6％、96．9％。实验结果还表明人参提取液在25℃条件下24h内保持基本稳定。     

酶解产物人参稀有皂苷Rh3的制备与分离

人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到Rh2 和Rh3为主的混合物.经常压硅胶柱分离,得到纯Rh2,也得到Rh3粗品;Rh3粗品再经高压硅胶柱分离,成功地得到了Rh3单体.其纯度达到95%以上.     

人胰岛素和胰岛素原单克隆抗体制备及分析

应用杂交瘤技术获得针对胰岛素和胰岛素原的各4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞.其中4株分泌胰岛素单克隆抗体的细胞(NI1、NI7、NI13、NI15)所分泌的抗体亚型均为IgG1;分泌胰岛素原单克隆抗体的细胞株所分泌的抗体亚型分别为IgA(NPI1)、IgG1(NPI3、NPI5)和IgG2a(NPI9);所有抗体的轻链均为κ型.所制备的胰岛素原单克隆抗体均不与胰岛素和C肽交叉反应,但所有胰岛素单克隆抗体均与胰岛素原交叉反应.     

三七中人参皂苷Rh1的分离与纯化

为了得到纯净的、具有较高生理和药理活性的单体人参皂苷Rh1,从三七中提取总皂苷,并对三七总皂苷进行分离纯化获得人参皂苷Rh1单体.分别经过乙醇浸提、石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取、大孔吸附树脂脱糖脱色及硅胶层析,从三七总皂苷中分离得到人参皂苷Rh1.结果表明,1 000 g三七干燥根经醇提、脱脂、萃取和脱糖脱色可制得三七...     

自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体的纯化与检测

为了提纯并鉴定自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体,探讨其在部分组织中的免疫定位．首先合成带谷胱甘肽转移酶标签的自噬基因融合蛋白,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,然后用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测抗体浓度,最后用免疫亲和纯化方法提纯抗血清中的多克隆抗体,酶联免疫吸附法检测抗体效价,蛋白印迹检测抗体特异性及在组织中的表达情况．结果表明：制备得到自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其质量浓度为每10μL含5μg,用酶联免疫吸附法显示此抗体效价及特异性较高,蛋白印迹显示蛋白大小为55kD左右．     

单克隆抗体 M1、R1 对材料表面吸附 FG 的作用的研究

在血液与生物材料的相互作用中,血浆蛋白特别是纤维蛋白原（Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ,ＦＧ）的吸附起着重要的作用。本文利用酶联免疫吸附检测手段（ＥＬＩＳＡ）,测定了两种鼠抗人ＦＧ的单克隆抗体Ｍ１和Ｒ１同吸附在材料表面的ＦＧ结合的亲合力（Ｋａ）。由于两种抗体与ＦＧ结合的位点不同,其Ｋａ值随温度和放置时间的变化呈现不同的变化规律,从而推测材料表面吸附的ＦＧ的构象变化。     

n型(AgSbTe2)x(PbTe)1-x热电材料的制备和性能

采用熔融缓冷法制备了组成为(AgSbTe2)x(PbTe)1-x(x=0.04—0.20)的热电材料,研究了AgSbTe2固溶量对材料微观结构和热电传输性能的影响。结果表明,当AgSbTe2固溶量增大时,样品易发生相结构偏析,样品由富Pb和富AgSb的两相组成。样品热导率随AgSbTe2固溶量增加而降低,电性能也有一定程度的降低。样品的无量纲热电优值(ZT)随AgSbTe2固溶量的减小而增加。     

鼠源抗AFB1噬菌体单链抗体库的构建与鉴定

研究以AFB1-BSA免疫的小鼠脾脏细胞为试验材料,利用RT-PCR技术,克隆了抗AFB1抗体重链和轻链可变区基因VH和VL,利用连接肽（Gly4Ser）3将VH和VL链接成单链抗体基因scFv,通过噬菌体展示载体pCANTAB-5E携带将其电转化E.coli TG1,经氨苄青霉素平板筛选,构建了库容为2.13×10^9 cfu/μg DNA的噬菌体单链抗体库,抗体库的克隆阳性率达到100%,且多样性良好,为高活性抗AFB1单链抗体的筛选提供了材料基础。     

嵌入知识的GM(1,1)模型及其在粮食产量预测中的应用

利用小样本、贫信息进行数据预测,传统的数学建模方法并不适合,灰色系统理论在解决该类问题有着明显的优势. 论文在分析河南粮食产量数据的基础上,应用嵌入知识的GM(1,1)模型,建立了河南粮食产量的预测模型,对未来5年的河南粮食产量进行了模拟和预测,进而提出了提高粮食产量的对策建议.     

La1-xSrxCoO3钙钛矿型复合氧化物的制备及其电催化特性

采用溶胶-凝胶法,通过高温炉焙烧工艺和微波炉焙烧工艺分别制备了La1-xSrxCoO3粉体．凝胶的差热-热重分析表明,粉体在600％：左右相变基本完成;钙钛矿相已形成．对200％：凝胶焙烧的粉体作了X—ray衍射相分析表明,粉体主要以金属氧化物的形式存在,还没有钙钛矿相形成．高温炉焙烧工艺和微波焙烧工艺的X—ray衍射相分析表明,高温和微波焙烧所得粉体为钙钛矿结构,出现的其他相较少．用电化学工作站测试仪器研究了电催化特性,焙烧9min样品的催化特性相对较好;高温焙烧温度越高,粉体的结晶越完全;800％：煅烧样品的催化特性相对较好．微波烧结样品的催化特性和结晶比电炉煅烧的稍好．     

几种典型的酰胺类手性臂固定相的合成与表征

本文以S-(-)-α-甲基苯乙胺为手性源,分别与甲基丙烯酰氯和10-+-烯酰氯酰胺化合成了两种典型的手性单体,并以此为基础合成出一系列手性同定相.其结构经红外(IR)、核磁氢谱(1HNMR)、DSC及元素分析进行了表征.