NP-HPLC分离测定1-[3,5-双（三氟甲基）苯基]乙醇对映异构体

目的 研究1-[3,5-双（三氟甲基）苯基]乙醇对映异构体分离测定的方法.方法 采用CHIRALPAK AD-3 （0.46cm×15 cm,5μm）色谱柱,以正己烷-异丙醇（200：1）为流动相,流速0.5 mL/min,柱温25℃.结果 采用本方法能完全分离对映异构体,灵敏方便,检出限为0.2011 μg/mL,约为供试品溶液浓度的0.04％,供试品溶液在12h内稳定.结论 本方法简单,专属性强,可有效控制1-[3,5-双（三氟甲基）苯基]乙醇中对映异构体含量.     

烟碱对映异构体手性分离方法研究进展

烟碱对映异构体[S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱]的手性分离是研究其药理学差异的基础,是近几年的研究热点。综述了近40年烟碱对映异构体的手性分离方法,如液相色谱法、超临界流体色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法和核磁共振法等,对各方法进行了讨论,并对该领域的发展前景作了展望。其中,基于改性多糖类及大环抗生素类手性固定相的液相色谱法和超临界流体色谱法具有快速、高效、灵敏和环保等优势,在烟碱手性分离中应用最为广泛。     

茶叶中挥发性成分对映异构体研究进展

茶叶香气是多种挥发性化合物以不同的浓度存在的混合体,是评价茶叶品质的重要因素之一。茶叶中多数 挥发性化合物都具有一个或多个立体中心,存在香气特征与香气阈值迥异的对映异构体,其不同组成比例引发的致 香效果对茶叶香气的形成有着重要的影响。本文围绕近些年国内外关于茶树等植物或食品的挥发性成分对映异构体 的研究,比较分析不同挥发性成分对映异构体的香型特性,阐述了手性挥发性成分的研究现状及分析方法,并对未 来研究及发展趋势等进行展望,以期从对映异构体的角度更深层次了解茶叶香气品质的化学实质。     

HPLC测定恩替卡韦对映异构体

目的建立测定恩替卡韦对映异构体的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用CHIRALPAK?AD-H色谱柱;以正己烷-乙醇-三乙胺(55:45:0.1)为流动相;检测波长254 nm;流速0.6 mL/min。结果恩替卡韦对映异构体浓度在0.20~0.76mg/mL(r=0.9999,n=6)范围内线性关系良好;平均回收率99.2%,RSD=1.12%。结论本法简便、灵敏、专属性强,可用于恩替卡韦对映异构体的测定。     

手性农药在红曲菌发酵过程中的立体选择性行为研究

采用高效液相色谱-串联质谱联用技术,研究了手性农药腈菌唑、己唑醇在红曲菌液态发酵和红曲酒酿造过程中的立体选择性降解情况,以及对红曲菌产酶(糖化酶、纤维素酶)和典型代谢产物(红曲色素、桔霉素)的影响.结果表明,腈菌唑、己唑醇的对映异构体的降解速率基本一致,无选择性降解现象发生.腈菌唑、己唑醇的外消旋体及对映异构体对红曲菌产酶和代谢物呈现一定的差异性,其中,在5,0.5 mg/L己唑醇条件下,红曲菌产酶及代谢物表现出显著性变化,且(+)-己唑醇显著性大于(-)-己唑醇,5 mg/L质量浓度下显著性大于0.5 mg/L;在0.05 mg/L己唑醇条件下,红曲菌产酶及次级代谢均不存在显著性差异.此外,不同质量浓度的腈菌唑外消旋体及对映异构体对红曲菌产酶及次级代谢也不存在显著性影响.     

柱前衍生化法测定莫西沙星小环的对映异构体

目的 建立柱前衍生化法测定莫西沙星小环对映异构体的方法.方法 采用Symmetry C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(60∶40),柱温为35℃;衍生试剂为2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯,检测波长为252 nm.结果 莫西沙星小环对映体衍生物获得了基线分离,并确认了R,R-衍生物的色谱峰;浓度1.44～72 mg/L范围内与峰面积呈线性关系,回归方程为A=34 801C-6472 (r=0.9999).结论 所建方法简便、快速,可用于莫西沙星小环对映异构体的拆分.     

青霉素酰化酶制备光学纯β-苯丙氨酸的HPLC分析

建立了青霉素酰化酶制备光学纯β-苯丙氨酸(BPA)过程中各成分的HPLC分析方法。用ZorbaxXDB-C18柱在流动相为含35%(v/v)乙腈的7mmol/LpH3.0磷酸缓冲液(含SDS0.68g/L),流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长为210nm等条件下,四种物质苯乙酰胺、BPA、N-苯乙酰-BPA、苯乙酸可以被有效分离,且在≤0.2mg/mL浓度下,四种物质含量与出峰面积均呈良好的线性相关。用ChirobioticT和ChirobioticR手性柱分别对手性物质N-苯乙酰-BPA和BPA的对映异构体进行了分离检测,并确定了最佳的洗脱条件。     

青霉素酰化酶制备光学纯β-苯丙氢酸的HPLC分析

建立了青霉素酰化酶制备光学纯β-苯丙氨酸(BPA)过程中各成分的HPLC分析方法.用Zorbax XDB-C18柱在流动相为含35%(v/v)乙腈的7mmol/L pH 3.0磷酸缓冲液(含SDS 0.68g/L),流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长为210nm等条件下,四种物质苯乙酰胺、BPA、N-苯乙酰-BPA、苯乙酸可以被有效分离,且在≤0.2mg/mL浓度下,四种物质含量与出峰面积均呈良好的线性相关.用Chirobiotic T和Chirobiotic R手性柱分别对手性物质N-苯乙酰-BPA和BPA的对映异构体进行了分离检测,并确定了最佳的洗脱条件.     

两种方法合成L-酪氨酸丁酯的工艺

以L-酪氨酸、丁醇为主要原料,采用氯化亚砜法和氯化氢法,合成了L-酪氨酸丁酯,产物结构经IR、1H NMR确证。通过单因素试验和正交试验结果表明,氯化亚砜法合成L-酪氨酸丁酯的最佳工艺条件为:物料摩尔比mol(L-酪氨酸)∶mol(氯化亚砜)∶mol(丁醇)=1∶1.3∶10,加热温度120℃,加热时间2 h;氯化氢法合成L-酪氨酸丁酯的最佳工艺条件为:物料摩尔比mol(L-酪氨酸)∶mol(丁醇)=1∶5,通气时间1.5 h,加热温度120℃,加热时间1 h。两种方法均具有原料价廉易得,反应周期短,催化剂易得,产物易分离的特点,适于工业化大规模生产。     

交联大豆分离蛋白的制备及流变学性质

利用二元酶系(辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶)和葡萄糖,通过一步法或两步法对大豆分离蛋白进行交联处理.以修饰产物中相对二酪氨酸含量为指标,采用单因素实验确定一步法处理大豆分离蛋白的反应的适宜条件为:葡萄糖添加量1.8％、葡萄糖氧化酶添加量4.0U/g蛋白质、辣根过氧化物酶添加量200U/g蛋白质、反应时间3h.在一步法处理的反应条件下,一步法和二步法处理的大豆分离蛋白相对二酪氨酸含量分别为414和381.与大豆分离蛋白相比,交联蛋白分散液的表现黏度和黏弹性均有显著改变,同时其酸凝胶的胶凝时间缩短、胶凝温度降低.     

手性高效液相色谱法测定左旋肉碱中光学异构体的含量

以phenomenex LUX Cellulose-1(250mm×4.6mm,3μm)色谱柱,以α-溴代苯基乙基酮为衍生试剂,在流动相为乙腈-0.5mol/L高氯酸钠(26:74),流速为0.4mL/min,检测波长为235nm的条件下采用柱前衍生法测定左旋肉碱(L-肉碱)中右旋肉碱(D-肉碱)的含量。结果表明对映异构体L-肉碱、D-肉碱衍生物分离度均大于2,D-肉碱的检测限为0.2μg/mL,在1～50μg/mL范围内线性关系良好,相关系数γ=0.9998。结论是方法灵敏度高、重现性好,可用于左旋肉碱中右旋肉碱含量的测定。     

用拉曼光谱分析低压均质处理对大豆分离蛋白结构的影响

本文测定了不同均质处理条件下大豆分离蛋白溶液的拉曼光谱和圆二色谱,以此来研究低压均质对大豆分离蛋白结构的影响。研究表明:均质压力较低(0~8 MPa)时,大豆分离蛋白的二级结构基本保持不变;当均质压力为10~30 MPa时,α-螺旋和无规则卷曲结构明显增加,β折叠显著降低,色氨酸残基和酪氨酸残基由"埋藏态"逐渐转变为"暴露态",蛋白质分子表现出解聚的行为;均质压力继续增大到40 MPa过程中,酪氨酸费米共振线I850/I830比值略有下降,酪氨酸残基由"暴露态"向"埋藏态"转变,表明产生了蛋白聚集体,并且低压均质处理未显著改变二硫键的构型。综上可知,拉曼光谱通过对蛋白分子的二级结构和三级结构进行表征,揭露了低压均质处理使得大豆分离蛋白表现出先解聚后聚合的性质,并且圆二色谱的结果验证了上述结论。     

氨基酸手性拆分研究进展

氨基酸广泛应用于医药、食品及化妆品等行业。大多数氨基酸含有手性中心,存在D型和L型对映异构体。这两种异构体的生理作用多数情况下是不同或完全相反的。人工合成的氨基酸大多为外消旋体,必须手性拆分。本文综合国内外最新研究成果,对氨基酸拆分技术做了较系统综述。     

基于间酪氨酸和邻酪氨酸鉴定辐照海产品

利用超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱（ultra performance liquid chromatography-quadrupole linear ion trap tadem mass spectrometry,QTRAP-UPLC-MS/MS）技术测定海产品中与辐照相关的多种氨基酸及同分异构体,研究辐照剂量（0.5～20?kGy）与不同海产品中辐照标识性产物间酪氨酸和邻酪氨酸的产生和含量的关系。不同贮藏条件和加工方式对间酪氨酸和邻酪氨酸特异性和稳定性,以及对辐照海产品测定的影响。结果表明：辐照可诱导苯丙氨酸产生对酪氨酸、间酪氨酸和邻酪氨酸,无需其他酶和微生物的作用,且含量与辐照剂量呈线性关系;辐照剂量和样品含水量与辐照标识物的产生量密切相关;在－20?℃,间酪氨酸和邻酪氨酸具有良好的稳定性;不同贮藏条件和加工方式对辐照海产品中间酪氨酸和邻酪氨酸含量具有一定影响,但是仍能提取到足够量的间酪氨酸和邻酪氨酸用于辐照海产品的鉴定;利用QTRAP-UPLC-MS/MS对海产品中邻酪氨酸和间酪氨酸作为辐照标识物的测定,最低可检测到经0.5?kGy辐照的样品,可准确地对辐照海产品是否经过辐照进行判定,为辐照海产品的检测提供依据。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中3种杀虫剂手性农药

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定普洱茶(晒青毛茶和普洱熟茶)中呋虫胺、水胺硫磷、茚虫威等3种手性杀虫剂对映异构体的分析方法.方法 采用1％乙酸的乙腈作为提取溶...     

偏最小二乘速差动力学分光光度法同时测定酪氨酸和色氨酸

本实验采用速差动力学分光光度法对酪氨酸和色氨酸的混合物进行不经分离的同时测定.在碱性介质下,KMnO4可以氧化酪氨酸和色氨酸,同时KMnO4被还原为浅绿色的MnO42-,测定反应过程中MnO2-的吸光度可推知其浓度的变化情况.测定所得的数据采用化学计量学.偏最小二乘方法解析,从而可对酪氨酸和色氨酸分别进行测定.     

L-酪氨酸代谢工程研究进展

L-酪氨酸属于芳香氨基酸,广泛应用于食品、医药以及化工等领域。由于天然微生物合成积累L-酪氨酸的能力很低,近几年利用代谢工程的方法进行途径改造和全局代谢途径优化取得了显著成效。解除反馈抑制、增加前体供应、阻断竞争途径以及调控转运等代谢改造策略非常有效地提高了L-酪氨酸的产量。而模块化工程、全局转录装置工程、小RNA工程等新技术使L-酪氨酸产量更上一个水平。L-酪氨酸代谢途径是多基因和多调控方式协同控制的复杂代谢网络,随着生物技术的发展,重新合理设计、人工合成和全局优化将是未来L-酪氨酸代谢工程发展的方向。     

高效液相色谱法测定保健食品中丙氨酰-酪氨酸的含量

目的 建立高效液相色谱法测定保健食品中丙氨酰-酪氨酸含量的分析方法。方法 样品经一级水超声提取, 采用Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm, 2.7 μm)进行分离, 以乙腈-水溶液为流动相进行等度洗脱, 采用高效液相色谱法检测, 外标法定量。结果 很好地分离了丙氨酰-酪氨酸, 在浓度0.01~0.05 mg/mL之间呈现良好的线性关系, 平均回收率在95%~105%之间, 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为1.0%。 结论 该方法准确、灵敏度高、重现性好, 适用于保健食品中丙氨酰-酪氨酸含量的测定。     

一氯均三嗪型染料与蚕丝纤维键合的HPLC研究

采用高效液相色谱法定量研究一氯均三嗪型活性染料与酪氨酸模拟蚕丝纤维的结合情况,从而探讨活性染料与蚕丝纤维的键合机制。通过测定不同温度、pH值条件下染料的水解和酪氨酸的电离色谱峰面积,对活性染料与酪氨酸结合情况进行研究。结果表明:活性染料的水解量与色谱峰面积有较好的线性关系;活性染料与蚕丝纤维的模拟物酪氨酸的反应程度与酪氨酸的电离率及未水解的活性染料两者均有关,在pH值为9.5、温度85℃附近,活性红K-2BP与酪氨酸的结合率最大。     

福林—酚试剂法测定蛋白酶活力的条件试验

蛋白酶活力测定一般采用酪蛋白(干酪素、酪素)为底物,在一定的水解条件下生成氨基酸,其活力用生成酪氨酸的量表示,而酪氨酸量采用福林—酚试剂法测定。福林—酚试剂系磷钼酸盐与磷钨酸盐的杂多酸溶液,在碱性条件下易被酪氨酸中酚基还原,生成钼兰与钨兰,用比色法测定. 本文对酶的浸取、水解条件及比色条件进行了试验,目的是进一步了解蛋白酶活力测定中影响因素,使方法的重复性更好,准确度更高.