复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究

将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉.用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果.然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性.     

蚕蛹蛋白酶法水解工艺优化

以水解度和多肽得率为评价指标,研究了中性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解工艺。采用单因素与响应面优化设计,得出最佳酶解工艺条件为:酶解温度56℃、酶解液p H 7.7、加酶量3.9%(质量分数)、料液比1∶12(g/m L)、酶解时间2 h。在此优化试验条件下,蚕蛹蛋白水解度和多肽得率的预测值分别为24.94%和72.16%,实际值则分别为24.22%及70.61%,与模型预测值吻合。此工艺可推广应用于蚕蛹蛋白多肽产业化生产的备选工艺。     

缫丝蚕蛹蛋白酶解产物体外抗氧化能力研究

目的:研究缫丝蚕蛹蛋白酶解产物的抗氧化能力,为缫丝蚕蛹蛋白的深度开发利用提供参考。方法:还原力法、DPPH自由基法、超氧阴离子自由基法、羟自由基法。结果:五种水解度较高的缫丝蚕蛹蛋白多肽中,蚕蛹蛋白水解专用酶的水解产物(E1)的还原力能力最强,酶解原液稀释100倍后吸光度为0.75;对O-2·和DPPH·的清除率也最高,酶解原液分别稀释10倍和100倍,其清除率分别为34.54%和79.38%,·OH的清除率次之,酶解原液稀释10倍清除率为43.77%。结论:蚕蛹蛋白水解专用酶水解得到的缫丝蚕蛹蛋白肽在体外表现出较好的抗氧化活性。     

大豆多肽复合酶解工艺条件优化的研究

以大豆蛋白为原料,采用 Protamex 与 Neutrase 两种蛋白酶酶解,得到小分子多肽(分子量≤2300),进行了两种酶的作用条件比较.采用新方法测定小分子多肽含量,通过正交试验对大豆多肽复合酶解工艺条件进行试验分析,确定了大豆蛋白复合酶解的最佳工艺条件为:Protamex 酶与Neutrase 酶的比例为 6:4,pH7.0,底物浓度为 5%,酶解时间为 8 h,温度为 60℃.为进一步水解制备小分子大豆肽的研究具有一定的参考意义.     

酶解蚕蛹蛋白制备蚕蛹活性肽工艺条件优化

以经超临界CO2萃取除去大部分蚕蛹油的脱脂蚕蛹蛋白质为原料,研究不同酶种类制备蚕蛹活性肽的酶解效果,选用碱性内切蛋白酶水解蚕蛹蛋白质制备活性肽,研究水解温度、酶用量([E]/[S])、底物浓度([S])和pH值等因素变化时水解度DH随时间的变化规律,结果表明,以DH为考察指标得到该碱性内切蛋白酶水解蚕蛹蛋白质的适宜条件为:水解时间300 min,酶用量[E]/[S]为0.3%,[S]为8%,pH值9.5,水解温度50℃,此时DH为22.66%,酶解物主要由小肽分子组成.     

蚕蛹蛋白的酶法水解工艺及其口服液的制备

为了制得蚕蛹免疫活性蛋白肽口服液,对蚕蛹蛋白酶解工艺进行了优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这五种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解,以水解度和小鼠脾细胞的增殖为检测指标,得出碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好,并通过单因素和响应面实验确定蚕蛹蛋白肽酶解的最佳工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量6%,酶解时间2 h,pH8,水和底物比20:1,此条件下水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD₄₉₀为0.2512±0.0125。并进行蚕蛹蛋白肽免疫活性口服液的研制,通过感官评定得到最佳工艺为:蔗糖量8%,柠檬酸量1%。     

蚕蛹蛋白酶解产物体外抗氧化和降血压活性筛选及响应面工艺优化

以蚕蛹蛋白为原料,使用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶对其进行酶解,采用1,1-一苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH自由基)法、超氧阴离子自由基(O2－ ·)法、羟自由基( ·OH)法和血压紧张素转化酶(ACE)法对酶解产物进行抗氧化和降血压活性分析,筛选同时具有较强抗氧化和降血压活性的酶解产物,并确定获得较强活性时的水解度,再通过响应面对该水解度下酶解工艺条件进行优化。结果表明：碱性蛋白酶在水解度为20%左右时获得的水解产物抗氧化和降血压效果较好,并由响应面分析结果表明酶解温度和加酶量之间存在显著的交互作用,同时得到最佳酶解工艺条件为：酶解温度51℃,pH值为9.05,加酶量为0.38%,酶解时间3h,在此条件下,水解度为20.53%,再通过实验验证其误差值小于5%,说明采用响应面试验设计方法对蚕蛹蛋白酶解体系进行优化具有较好的可靠性。此时酶解产物的DPPH自由基抑制率为51.2%,ACE抑制活性为50.3%。     

基于响应面法的蚕蛹蛋白降血脂肽的酶解条件优化

基于响应面法对中性蛋白酶降解蚕蛹蛋白制备降血脂肽的酶解条件进行了优化。得到制备蚕蛹蛋白降血脂肽的最佳酶解条件为:酶量5.1%(w/w),酶解时间5h,酶解温度52℃,酶解pH=7.0,底/水比(w/v)=3.9%。在此条件下,蚕蛹蛋白降血脂肽对3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)的抑制率为45.24%。建立了基于蚕蛹蛋白降血脂肽酶解条件的优化模型。验证实验结果表明该模型的预测准确率达97.31%。     

蚕蛹多肽制备工艺及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解蚕蛹蛋白,以水解度和清除DPPH·能力为指标对酶解过程进行分析,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶对蚕蛹蛋白具有较好的水解效果,其水解产物有较高抗氧化活性,对DPPH·、超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)都具有较强的清除能力。