金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响

目的:观察金线莲多糖(ARP)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖,细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响。方法:MTT法检测ARP单独及协同Con A、LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;ELISA法检测细胞因子IL-2和IFN-γ的含量。结果:在试验浓度范围,ARP对小鼠脾淋巴细胞没有毒性作用,与空白对照组相比,OD值明显升高(P0.05),在一定范围内呈量-效关系;ARP与Con A或LPS共同作用小鼠脾淋巴细胞时,其OD值明显高于Con A、LPS单独刺激组(P0.05);与空白对照组相比,ARP组G_0/G_1期淋巴细胞百分率降低(P0.01),S期、G2/M期淋巴细胞百分率升高(P0.01);ARP组IL-2、IFN-γ分泌量明显高于空白对照组(P0.05)。结论:ARP可促进小鼠脾淋巴细胞增殖并与Con A、LPS具有协同作用。其作用机制可能与促使小鼠脾淋巴细胞通过G_1期限制点,加速G_0/G_1期向S期,S期向G2/M期转化进入细胞增殖周期,并且可能与其促进IL-2、IFN-γ的分泌有关。     

米糠多糖的免疫增强作用

从脱脂米糠中提取的粗多糖SPK-1以及纯化精制多糖SPK-2、SPK-3、SPK-4具有显著生物活性,具有增强免疫调节的功能。从细胞因子的层次考察了米糠多糖SPK-1,2,3,4对小鼠脾脏淋巴细胞活性、Con A和LPS丝裂原诱导的脾脏淋巴细胞活化增殖以及LPS、Con A诱导脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,IL-2,IL-10,IL-12,IL-17等细胞因子的影响。研究发现,SPK-1,2,3,4在体外都有显著增强小鼠脾脏淋巴细胞活性,而且均有促进小鼠脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,IL-2以及抑制IL-10,IL-12,IL-17因子分泌的作用。     

副干酪乳杆菌VL8胞外多糖协同ConA对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响

本研究以前期从viili中分离得到的一株副干酪乳杆菌VL8为基础,对其胞外多糖(VL8-EPS)的免疫活性进行了初步探究。首先分离制备小鼠脾淋巴细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的VL8-EPS对小鼠脾淋巴细胞增殖及在其与有丝分裂原共同作用下对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用;双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测细胞因子白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-6(IL-6)的含量。结果表明,VL8-EPS在浓度12.5~800μg/m L范围内,能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖;VL8-EPS协同刀豆蛋白(Con A)也显著地增强了脾淋巴细胞的增殖作用,且诱导效果高于单独施用VL8-EPS;并能显著促进协同Con A诱导的细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6的分泌水平。综上,VL8-EPS显著地促进了脾淋巴细胞的增殖,并对Con A诱导的脾淋巴细胞的增殖有协同促进作用,还通过促进细胞因子的分泌发挥了免疫增强作用,说明VL8-EPS在一定程度上对免疫机制进行了调控。     

金线莲多糖协同ConA对小鼠脾淋巴细胞分泌Th1、Th2型细胞因子及其mRNA表达量的影响

目的:研究金线莲多糖(ARP)调节Con A刺激小鼠脾淋巴细胞细胞因子分泌水平及其m RNA表达影响,探讨其免疫调节作用机制。方法:小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度的金线莲多糖协同Con A体外刺激,ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞上清液中Th1(IL-2、IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-6)细胞因子的含量;q RT-PCR检测上述细胞因子及其转录因子T-bet、GATA-3 m RNA表达量。结果:在试验质量浓度范围,ARP能显著提高小鼠脾淋巴细胞Th1、Th2细胞因子的分泌量,促进Th1、Th2细胞因子及转录因子(T-bet、GATA-3)m RNA表达(P0.01)。结论 :ARP能协同Con A促进小鼠脾淋巴细胞分泌Th1、Th2型细胞因子及其m RNA表达,从而发挥免疫调节的作用,作用机制可能与上调核转录因子T-bet、GATA-3的m RNA表达水平有关。     

白藜芦醇对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响

研究了白藜芦醇(Res)对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)、脂多糖(LPS)以及5、10、20、40μg/m L不同浓度的Res,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:Res能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能与Con A协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。综上,Res能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

卵转铁蛋白体外免疫活性研究

研究卵转铁蛋白(OVT)的体外免疫活性。分别采用中性红吞噬法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;MTT法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬和脾淋巴细胞增殖作用的影响;双抗体夹心ELISA法测定卵转铁蛋白对脾淋巴细胞IL-2分泌水平的影响。结果表明,OVT能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对中性红吞噬能力(P<0.01),协同LPS促进腹腔巨噬细胞的增殖(P<0.05),并显著改善由CsA引起的对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活性的抑制作用(P<0.05);OVT能显著促进脾淋巴细胞的增殖(P<0.01),协同LPS和ConA促进小鼠脾淋巴细胞的增值(P<0.05),并能显著促进小鼠正常脾淋巴细胞IL-2的分泌(P<0.01)。在体外培养的条件下,卵转铁蛋白对正常小鼠免疫细胞的免疫能力有促进作用。     

不同来源Lfcin对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子影响的对比研究

本文以牛乳铁蛋白素Lfcin B和人乳铁蛋白素Lfcin H为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响并比较两者的差异及相关性。采用CCK-8法检测不同浓度的Lfcin单独作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及不同质量浓度Lfcin与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响;ELISA法测定IL-2、IL-4和TNF-α的含量。结果显示:Lfcin B和Lfcin H能显著促进脾淋巴细胞增殖及增强Con A诱导的T淋巴细胞的增殖和LPS诱导的B淋巴细胞的增殖,并且能显著促进脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、TNF-α(P0.01)。研究结果表明:Lfcin能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,其机制可能是通过促进细胞因子的分泌发挥免疫增强作用。     

黑灵芝多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的：研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1 在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1 单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B 淋巴细胞增殖作用的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果：PSG-1 在20～160μg/mL 质量浓度范围能显著促进脾细胞的增殖,且48h 效果最佳;PSG-1 能显著增强刀豆蛋白A (Con A)诱导的T 淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B 淋巴细胞的增殖作用;并且能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2 和TNF- α。结论：PSG-1 能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS 对T、B 淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,还可以通过IL-2 和TNF-α发挥免疫增强作用。     

苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响（网络首发、推荐阅读）

以苦瓜多糖(MCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的MCP体外刺激,检测MCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mRNA表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(P<0.05),MCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05);与空白组相较,细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌量最大增幅分别为:42.73%、18%、27.81%、29.42%;IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的mRNA表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,MCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mRNA表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。     

费菜粗多糖对小鼠免疫活性的研究

目的 :研究费菜(Sedum aizoon L.)粗多糖对小鼠免疫活性的研究 方法 :首先采用水提醇沉法以及Sevage法去蛋白等工艺提取费菜粗多糖。体外实验需将配置成不同浓度的多糖提取液分别与脾脏细胞,RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2,IFN-γ, IL-6,TNF-α浓度的变化。采用cck-8法,研究费菜粗多糖对RAW 264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。结果 :与正常组相比,费菜粗多糖组显著增加IL-2,IFN-γ,IL-6,TNF-α,NO的分泌量,差异具有统计学意义(p0.01)。促进RAW 264.7增殖,差异具有统计学意义(p0.05)。结论 :费菜多糖轮增加脾淋巴细胞与RAW264.7分泌IL-2、IFN-γ、 IL-6、TNF-α、NO,促进RAW 264.7增殖.     

菠萝蜜多糖对脾淋巴细胞抗氧化作用及免疫功能的影响

本研究旨在探明菠萝蜜多糖(polysaccharide from jackfruit pulp,JFP-Ps)对正常小鼠脾淋巴细胞增殖和免疫调节的影响。通过体外小鼠脾淋巴细胞的培养实验,测定不同质量浓度JFP-Ps对正常小鼠脾淋巴细胞增殖、抗氧化能力(总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量)及细胞因子(肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β))分泌水平的影响。结果显示,JFP-Ps可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,质量浓度为80μg/mL和160μg/mL时效果显著(P0.05);当JFP-Ps质量浓度为40μg/mL甚至更高时,T-AOC及GSH-Px、SOD和CAT活力显著升高(P0.05),但MDA含量显著降低(P0.05);JFP-Ps在质量浓度40~160μg/mL范围内可显著促进脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ和IL-1β的分泌(P0.05)。结果表明JFP-Ps的免疫增强活性可能与其促进小鼠脾淋巴细胞增殖、提高抗氧化活性及诱导细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1β分泌水平有关。     

轮叶党参粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及RAW 264.7细胞的免疫活性

目的:研究轮叶党参多糖对小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)作用以探究其免疫增强的功效。方法:浓度为1000,500,250,125 μg/mL多糖体外分别与脾脏细胞、RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6和TNF-α浓度的变化。采用MTT法,研究轮叶党参粗多糖对RAW 264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。通过RT-PCR法检测iNOS mRNA的生成情况。结果:与正常组相比,轮叶党参粗多糖组IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α和NO的分泌量极显著增加(p<0.01),显著促进RAW 264.7增殖(p<0.05)。与正常组比较,iNOS mRNA明显增加。结论:轮叶党参粗多糖可与ConA协同增强T细胞活性,也可参与活化单核-巨噬细胞对特异性免疫与非特异性免疫活性起到正向调节的作用。     

乳铁蛋白对卵清白蛋白过敏小鼠外周血中Th1/Th2细胞平衡的影响

利用卵清白蛋白(OVA)建立BALB/C小鼠食物过敏模型,观察乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)对该食物过敏机体的免疫调节作用。小鼠分别接受预防性乳铁蛋白处理和胃肠道刺激期间灌胃乳铁蛋白,最后一次处理1h后检测其外周血中IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-6、IL-10、IL-12p40和IgE的变化。结果表明:2mg/(kg.d)(以体质量计)的Lf在胃肠道刺激期间显著提高了IFN-γ和IL-12p40水平而降低了IL-4和IL-6水平,但20mg/(kg.d)的Lf降低了所有这些细胞因子。同时,Lf明显降低了血清中IgE浓度而提高了IFN-γ/IL-4比值,20mg/(kg.d)的Lf对IgE影响较大,2mg/kg的Lf对IFN-γ/IL-4比值影响较大。此外,预防性处理中的Lf均显著降低了IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TGF-β和IgE水平,并且20mg/(kg.d)的Lf效果较好,且该剂量明显提高了IFN-γ/IL-4比值。因此,Lf能够改善OVA诱导的食物过敏小鼠Th1/Th2细胞的平衡,具有重要的免疫调节作用。     

人乳β-酪蛋白酶解产物体外对小鼠淋巴细胞的刺激作用

采用离子交换色谱法从人乳中分离、纯化得到人乳β-酪蛋白,利用胰蛋白酶对其进行酶解,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同孵育时间下,不同质量浓度的酶解产物对刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠脾T淋巴细胞增殖情况的影响;ELISA法测定Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)分泌量。结果表明,人乳β-酪蛋白酶解产物对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖具有显著的促进作用,且48 h效果最佳;对Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)的分泌具有显著的促进作用、对Th2型细胞因子(IL-6)分泌有显著下调作用;显著增加IFN-γ/IL-4的比值。     

嗜酸乳杆菌对β-乳球蛋白过敏诱发Thl/Th2细胞平衡的影响

目的:观察嗜酸乳杆菌对牛乳β-乳球蛋白(BLG)致敏小鼠Th1/Th2细胞平衡及血清抗体水平的影响,以研究其缓解过敏反应的作用。方法:用牛乳BLG和弗氏佐剂的混合液腹腔注射诱发BALB/c小鼠致敏,建立动物过敏模型。将实验动物随机分为空白组、过敏组与不同剂量的嗜酸乳杆菌组。采用ELISA法测定各组小鼠血清总IgE、BLG特异性IgE和总IgG含量。体外分离培养各组小鼠脾淋巴细胞,采用ELISA法检测细胞上清液中Th1型细胞因子(IL-12、IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的水平。结果:中、高剂量嗜酸乳杆菌组小鼠的IFN-γ/IL-4比值(代表Th1/Th2细胞平衡)显著高于过敏组(P<0.05);而其血清中的总IgE、BLG特异性IgE和总IgG水平显著低于过敏组(P<0.05),与空白组相比无差异性(P>0.05)。结论:嗜酸乳杆菌干预可改善小鼠的BLG过敏症状,其作用可能与促进Th1占优势的Th1/Th2细胞平衡,阻断IgE及IgG分泌相关。     

拐枣多糖对环磷酰胺诱导免疫低下小鼠免疫功能的影响

本文旨在研究拐枣多糖(Hovenia acerba Lindl.polysaccharide,HAP)对环磷酰胺(CTX)诱导免疫低下小鼠免疫功能的影响。除空白对照组用生理盐水(NS,0.1 m L/10 g)灌胃外,其它各组小鼠于给药的第1、3、5、7、9 d腹腔注射CTX(30 mg/kg)造模。将建模成功体重相近的小鼠随机分为模型组、HAP高、中、低剂量(400、200、100 mg/kg bw)处理组,另设正常对照组。连续灌胃给药28 d,研究HAP对模型小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖、廓清指数、吞噬指数、半数溶血值、血清中IL-2、IL-4、IFN-γ生成水平和足趾厚度差等指标的影响。结果显示,HAP各剂量均能显著提高模型小鼠脾脏指数、脾淋巴细胞增殖作用、廓清指数、吞噬指数、半数溶血值及足趾厚度差(p0.05);HAP低、中、高剂量促使IL-2、IL-4、IFN-γ生成水平均明显提高(p0.05)。研究结果表明,拐枣多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的非特异性免疫和特异性免疫具有增强作用。     

丁酸钠对β-乳球蛋白过敏小鼠淋巴细胞的体外影响

目的:研究丁酸钠对β-乳球蛋白(β-Lg)致敏淋巴细胞的体外调节作用。方法:通过腹腔注射β-Lg,建立BALB/c小鼠牛乳过敏模型。造模成功后,分离致敏小鼠脾淋巴细胞与不同浓度的丁酸钠体外共同孵育,采用MTT法检测丁酸钠对致敏淋巴细胞生长的影响,ELISA法检测淋巴细胞上清液中总IgE和细胞因子(IFN-γ、IL-4、TNF-β、IL-6、IL-17、TGF-β)的含量,RT-PCR法检测淋巴细胞中G蛋白受体mRNA的表达。结果 :与过敏组比较,不同浓度丁酸钠均可有效抑制β-Lg过敏淋巴细胞的异常增殖,并显著下调致敏细胞分泌总IgE。同时,高浓度的丁酸钠对炎性细胞因子TNF-β、IL-17和IL-6有显著抑制作用,并显著促进TGF-β分泌(P0.05)。丁酸钠还显著上调过敏淋巴细胞GPR41和GPR43受体表达,且呈剂量依赖效应。结论:丁酸钠通过结合G蛋白受体抑制致敏淋巴细胞的增殖并发挥其抗炎功能。     

荔枝果肉乙酸乙酯粗提物对Th1/Th2细胞平衡的影响

本研究分析荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物对小鼠细胞因子分泌的作用,进而探讨其对Th1/Th2细胞平衡的影响。将30只BALB/C小鼠随机分成对照组(生理盐水)、乙酸乙酯部粗提物低剂量和高剂量组(4.6、9.2 mg/kg.bw.d),连续灌胃7 d,观察各组小鼠的胸腺和脾脏指数变化以及脾细胞增殖情况,用ELISA检测小鼠脾细胞以及血清分泌IFN-γ和IL-4的含量以及IFN-γ/IL-4比值。实验结果表明:乙酸乙酯部粗提物高剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数显著提高。乙酸乙酯部粗提物低、高剂量都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ分泌水平,同时,高剂量组小鼠脾细胞和血清IL-4的分泌水平也显著提高。低、高剂量的乙酸乙酯部粗提物都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ/IL-4的比值。荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物诱导Thl/Th2平衡向Th1方向漂移,可能进而诱导机体的炎症性反应。     

发酵驼乳源生物活性肽的提取分离和免疫调节活性评价

分离发酵驼乳源生物活性肽,观察其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;测定培养上清细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)与白介素-4(IL-4)水平。对发酵驼乳离心,超滤,凝胶层析并对凝胶层析柱分离条件进行考察,提取分离发酵驼乳源生物活性肽。体外培养淋巴细胞观察其对细胞增殖的影响;ELISA法测定培养上清细胞因子的质量浓度。确定了层析柱分离条件。共得到4种组分;其中质量浓度0.25 g/L和0.5 g/L的肽段C的细胞增殖指数(SI)分别1.26±0.015,1.3±0.010,明显高于空白对照组;实验组培养上清中IFN-γ含量明显高于空白对照组,而两组间IL-4含量无统计学差异。发酵驼乳源生物活性物肽段C对小鼠脾淋巴细胞增殖和淋巴细胞表达IFN-γ水平有促进作用。     

壳寡糖及其磷酸化修饰产物对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的:研究壳寡糖及其磷酸化修饰产物对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测壳寡糖及其磷酸化修饰产物在不同质量浓度条件下对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果:壳寡糖及其修饰产物对小鼠脾细胞均具有明显的细胞增殖作用,并存在一定的剂量依赖关系,2种实验药物均能提高IFN-γ水平;IL-2测定结果显示,壳寡糖具有明显提高脾细胞分泌IL-2的作用。结论:壳寡糖及其修饰产物具有明显的免疫增强作用,该作用与诱导小鼠脾细胞增殖、提高脾细胞中IFN-γ、IL-2的水平有关。