松口蘑菌丝体生长的最适培养基的选择

松口蘑是专一性很强的菌根菌,难以人工培养.不同的培养基对松口蘑菌丝体的生长有明显的影响.本文报道通过松口蘑菌丝得率为指标的实验,确定松口蘑菌丝体液体发酵培养基.结果表明最适培养基为：蔗糖70g/L、硝酸铵5g/L、KH2PO4 1g/L、MgSO4·7H2O0.5 g/L和酵母膏8g/L.     

灵芝菌丝发酵及胞内多糖提取条件的优化

通过摇瓶培养研究了灵芝液体发酵的适宜培养条件,探讨了灵芝菌丝体胞内多糖的最佳提取条件和方法.结果表明:最适发酵培养时间为6 d,pH6.5,可溶性淀粉15 g.L-1,大豆蛋白胨10 g.L-1,硫酸亚铁1 g.L-1,所得菌丝体为44.8 g.L-1;热水浸提法的最佳条件为料液比为1∶20,浸提时间4 h,浸提温度90℃,多糖含量最高为17.5%;酶法的最佳提取条件为料液比1∶20,加酶量2%,处理时间3 h,多糖含量最高为20.8%.通过对比,确定酶法为灵芝菌丝多糖的较佳提取方法.     

松口蘑菌丝体生长的最适培养基的选择

松口蘑是专一性很强的菌根菌,难以人工培养。不同的培养基对松口蘑菌丝体的生长有明显的影响。本文报道通过松口蘑菌丝得率为指标的实验,确定松口蘑菌丝体液体发酵培养基。结果表明最适培养基为:蔗糖70 g/L、硝酸铵5 g/L、KH2PO41 g/L、MgSO4.7H2O 0.5 g/L和酵母膏8 g/L。     

羊肚菌液体发酵培养条件优化

以羊肚菌为材料,采用液体发酵技术,研究了碳源、氮源和培养条件对菌丝体生物量及胞外多糖产量的影响。羊肚菌液体发酵的最佳培养基为:麦芽汁1.5%,玉米粉40mg/L,黄豆粉20mg/L,酵母粉3mg/L。最优培养条件为24℃、140r/min、pH 6.0、接种量10%。在此培养条件下测定羊肚菌的生长曲线,0~48h为延滞期,48~120h为旺盛生长期;在培养144h时菌丝体生物量和胞外多糖质量浓度达到最大,分别为14.11g/L和268.9mg/L。研究结果可为大规模液体发酵生产羊肚菌胞外多糖提供一定的理论依据。     

双酶协同加压热水法提取与纯化香菇多糖

香菇多糖具有增强免疫、抗肿瘤、降血压、降血脂等功效,广泛应用于食品与医药领域。以新鲜香菇为原料,采用木瓜蛋白酶和纤维素酶双酶协同加压热水法提取香菇多糖,优化双酶预水解的工艺条件。在此基础上,以凝胶层析法纯化香菇多糖,并鉴定纯化的香菇多糖。研究结果表明:纤维素酶加入量为1.00 g/g(以1 g绝干香菇质量计)和木瓜蛋白酶加入量为0.024 g/g(以1 g绝干香菇质量计),在p H 4.5和45℃的条件下,双酶协同预水解香菇原料10 h,接着采用加压热水法提取香菇多糖,在固液比1∶50(g/m L)和提取温度115℃条件下,提取80 min,香菇多糖得率可达23.6%。采用凝胶层析法纯化香菇多糖,以Superose 6 PG为分离介质,流动相为脱气纯水,在流速0.6 m L/min和柱温48℃的条件下,分离纯化香菇多糖粗品,经过两步分离纯化后,获得均一的多糖样品。以蒽酮-硫酸法、高碘酸钠法和红外光谱法鉴别纯化组分为香菇多糖;以凝胶渗透色谱法测定香菇多糖的重均分子量为3.75×104;以刚果红法分析香菇多糖,香菇多糖与刚果红形成络合物,最大吸收波长移向长波长,发生红移现象,表明纯化的香菇多糖中存在螺旋构象。研究结果为香菇多糖的高效提取与分离纯化提供了新的路线。     

一株海洋真菌Sw-25产胞外多糖发酵条件研究

通过对海洋真菌Sw-25发酵,研究不同碳源、氮源、培养基初始pH、温度及接种量、装液量对海洋真菌Sw-25产胞外多糖的影响.结果表明,最适培养基组成为:麦芽糖20 mg/L,酵母膏5 mg/L,海水400 mL/L,蒸馏水600 mL/L,培养基初始pH 6.0～6.5.最适发酵条件为:250 mL三角瓶装量80 mL,接种量为6%,24℃培养96 h.在此条件下,海洋真菌Sw-25产胞外多糖1.28 g/L.     

鼠李糖脂发酵条件优化和采油应用研究

铜绿假单胞菌WJ-1是从内蒙古自治区蒙古林油藏地层水中经筛选和驯化得到的一株兼性厌氧高产生物表面活性剂的烃降解菌株.经薄层层析、高效液相色谱及红外光谱分析,发现该菌株发酵的表面活性剂主要为鼠李糖脂(rhamnolipid,RL).运用单因素实验和正交实验对菌株WJ-1合成RL的发酵条件进行优化,获得最佳培养基,碳源为葵籽油80g/L,氮源为NaNO310g/L、K2HPO42g/L、CaCl20.12g/L、MgSO40.24g/L、FeSO40.12g/L、Na2MoO40.08g/L和酵母膏1.2g/L.菌体生长最适pH为7.0,最适温度为37℃;RL合成最适pH为7.5,最适温度为34℃,最适发酵时间为90～100h.在最优条件下使用3T智能发酵罐发酵,RL的产量达到55.1g/L.RL粗品能将水表面张力从72.14mN/m降至25.01mN/m,临界胶束浓度为22mg/L.物理模拟驱油试验表明,铜绿假单胞菌WJ-1产出的RL在微生物采油上将有良好应用前景.     

一株海洋真菌Sw-25产胞外多糖发酵条件研究

通过对海洋真菌Sw-25发酵,研究不同碳源、氮源、培养基初始pH、温度及接种量、装液量对海洋真菌Sw-25产胞外多糖的影响.结果表明,最适培养基组成为：麦芽糖20 mg/L,酵母膏5 mg/L,海水400 mL/L,蒸馏水600 mL/L,培养基初始pH 6.0～6.5.最适发酵条件为：250 mL三角瓶装量80 mL,接种量为6%,24℃培养96 h.在此条件下,海洋真菌Sw-25产胞外多糖1.28 g/L.     

黄原胶液化酶的反应条件

XT11菌种经过发酵能够产生黄原胶液化酶,该酶能够分解黄原胶生成寡糖。实验结果说明,黄原胶液化酶的最适温度为40℃,以磷酸盐缓冲液为最佳缓冲液的酶反应的最适pH值为6.0;酶反应最适底物质量浓度为3 g/L,Km=1.68,Vmax=0.203 7 g.mL-1.min-1。Ca2+在浓度较低时对黄原胶液化酶有激活作用,而其他离子在10和30 mmol/L时对黄原胶液化酶有不同程度的抑制作用,并且Fe3+和Cr3+的抑制作用表现最为突出。     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究.结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉 5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28 ℃;酶反应的最适条件为25 ℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL.     

香菇多糖和金针菇多糖的提取及其抑菌活性

为了探索食用菌多糖在抗菌方面的开发和应用,采用菌丝体发酵法,制得金针菇和香菇胞外多糖,采用热水浸提结合微波预处理法,提取香菇菌柄多糖,并采用正交试验方法对提取工艺进行优化,然后采用滤纸片法测试金针菇胞外多糖、香菇胞外多糖和香菇菌柄多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌的抑制活性．结果表明：香菇菌柄多糖提取的最佳工艺为微波预处理3mm（处理过程中微波炉的功率为480w）、料液比为1：30（g：mL）、浸提时间为1．5h和浸提温度为96℃．在8．5mg／mL的浓度下,金针菇胞外多糖,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌均无抑制作用;在4．8mg／mL的浓度下,香菇胞外多糖和香菇菌柄多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌均有抑制活性．香菇胞外多糖,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌的最小抑菌浓度分别为0．15、4．8、4．8mg／mL;香菇菌柄多糖,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌的最小抑菌浓度分别为2．4、4．8、4．8mg／mL．不同浓度的香菇多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白球念球菌的抑制活性不同;香菇胞外多糖和香菇菌柄多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白球念球菌的抑制活性存在差异．     

响应曲面法优化羊肚菌富硒深层发酵条件

以亚硒酸钠为无机硒源,对羊肚菌菌丝体的富硒深层发酵条件进行了优化研究。选择培养温度、发酵时间和硒浓度作为优化因素,研究各因素的不同水平对富硒羊肚菌菌丝生物量和硒含量的影响。通过单因素试验和响应曲面法得出了羊肚菌菌丝体富硒深层发酵的最佳条件条件:发酵时间5.22d、培养温度25.73℃、硒质量浓度86.67μg/ml;预测菌丝生物量的达到10.512g/L、硒含量达到18.8μg/ml,实际菌丝生物量的达到10.339g/L、硒含量达到18.6μg/ml。研究结果表明,响应曲面法可对羊肚菌富硒深层发酵条件进行优化。     

胆固醇氧化酶高产菌株的诱变选育及产酶条件优化

在对细脚拟青霉、玫烟色拟青霉、粉拟青霉、香菇、平菇、金针菇等胆固醇氧化酶产生菌初筛的基础上．选择以产酶较高的玫烟色拟青霉作为紫外诱变的出发菌株,筛选出一株相对高产突变菌株MFEC006,其酶活达到了0．5483U／mL,比出发菌株提高了154％,经8次传代培养,突变株性质稳定．对MFEC006菌株产酶条件进行优化,得出其最佳产酶条件为：pH为6．5,温度27℃,接种量10％,摇床转速180r／min．     

蛹虫草菌产腺苷的培养基优化

以蛹虫草菌丝体中腺苷含量为指标,进行发酵培养,优化液体发酵培养基。通过单因素实验结果,选出最适宜的碳源是玉米淀粉,氮源是玉米浆粉和NH4Cl,金属离子是ZnSO4;然后采用9因素2水平Plackett-Burman设计实验得出对蛹虫草发酵水平影响显著的因素,分别为玉米淀粉、玉米浆粉和MgSO4;最后运用响应面分析方法对3个因素3个水平进行优化,获得最优组合浓度为玉米淀粉13.35g/L、玉米浆粉45.74g/L、MgSO4为0.40g/L,此时菌体腺苷含量为4 751μg/g。验证结果表明蛹虫草腺苷含量提高了210%,优化效果极为显著。     

米曲霉发酵产纤溶酶培养基的优化

通过单因素实验确定米曲霉NA-25产纤溶酶的最佳碳源为麸皮,最佳氮源为蛋白胨和NaNO3.利用SAS软件的Placket-Burman设计法对米曲霉NA-25产纤溶酶的培养基组成进行筛选,筛选出3个影响较大的重要因素,即蛋白胨、NaNO3、CaCl2,然后用中心组合实验设计进一步优化,经优化后,在上述因素分别为NaNO318.5 g/L,蛋白胨4.97 g/L,CaCl21.63 g/L时发酵液的酶活为98.13 U/mL,比原来提高了55.8%.     

响应面法优化重组枯草芽孢杆菌生产纤维素酶EGA的研究

通过响应面优化法（response surface methodology,RSM）对分泌表达纤维素酶EGA重组枯草芽孢杆菌的发酵条件进行优化。利用Plackett-Burman实验设计对淀粉、酵母粉、蛋白胨等8个因素对枯草芽孢杆菌产纤维素酶EGA的显著影响与否进行评估分析,筛选得到淀粉、酵母粉和MgSO4·7H2O为3个显著影响的因素,再利用Box-Behnken实验设计对这3个因素进行进一步优化,确定最佳培养基的配比为淀粉21g/L,酵母粉11.26g/L,蛋白胨25g/L,MgSO4·7H2O 1.52g/L,KH2PO40.395g/L,NaCl 3.25g/L,CaCl20.1g/L,FeSO4·7H2O 0.005g/L。在最优条件下,利用小型发酵罐对重组菌进行扩大培养,其最高酶活力达到1 264U/L。     

姬松茸茵丝体深层液体发酵条件的优化

主要研究了姬松茸深层液体发酵培养条件对菌丝生物量和胞内多糖产量的影响．确定了最佳培养条件为：培养基中玉米粉加量3％,豆饼粉0．3％,250mL摇瓶装液量45mL,发酵温度25℃．在此培养条件下,胞内多糖产量达到7．26g／L．并通过培养基中添加8种中草药提取液,发现生地黄对姬松茸多糖产量有一定的提高作用,多糖产量可达7．83g／L．     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

香菇与酵母共生发酵产纤维素酶

研究了香菇菌和酵母菌共生发酵葡萄渣和麸皮生产纤维素酶的条件。香菇菌和葡萄酒酵母菌可以在PDA液体培养基中共生,并产生纤维素酶。通过正交试验法确定了香菇菌与葡萄酒酵母菌共生的主要基质最佳组合:葡萄渣、蔗糖和麸皮质量分数均为3%,硫酸镁和磷酸二氢钾质量分数均为0.15%。正交试验法确定的2种菌共生发酵产生纤维素酶的最佳条件为:发酵产酶温度27℃,pH 5.5,共生发酵3~5d,纤维素酶活力为3.2U/g,香菇菌生物量为21.4g/L,酵母菌细胞计数为3.61×108个/mL。比较试验证明共生发酵产生的纤维素酶与香菇菌单菌发酵结果一致。