乳清蛋白复合酶解条件优化及其水解产物对HMG-CoA还原酶活性的影响

采用胰蛋白酶、中性蛋白酶A.S1398组成复合酶联合水解乳清蛋白,建立了三因素(水解温度T℃,初始pH,胰蛋白酶活性占总活性的百分比)与乳清蛋白水解度(DH)之间的回归模型,通过模型优化了胰蛋白酶、中性蛋白酶A.S1398联合水解乳清蛋白的条件参数,并研究了在优化的水解条件下,乳清蛋白不同阶段水解产物在体外对HMG-CoA还原酶活性的影响。     

响应面优化具有抗菌活性的乳清蛋白肽的酶解工艺

以乳清蛋白肽对金黄色葡萄球菌的抑制作用为指标,通过胰蛋白酶水解乳清蛋白的单因素试验,确定乳清蛋白肽具有抗菌活性的最佳水解条件,试验结果表明,乳清蛋白肽的抗菌能力与底物浓度、加酶量、pH值、水解温度等因素有关,利用响应面优化得到的胰蛋白酶最佳水解工艺条件是底物质量分数为8.3%,pH值为8.5,加酶量5 000 U/g,温度46.0℃,酶解时间3 h。结论:乳清蛋白经胰蛋白酶水解,该条件下得到的乳清蛋白水解肽可以有效地抑制金黄色葡萄球菌生长,具有较好的抗菌能力。     

乳清蛋白酶解条件优化

用二次回归正交旋转组合设计对乳清蛋白酶解条件进行优化,建立酶法水解乳清蛋白的水解度与水解温度、水解时间、加酶量等三因素的正交回归模型。结果表明:在反应温度57℃、加酶量8 214U/g·蛋白条件下酶解114min,可获得中性蛋白酶水解乳清蛋白的最大水解度11.72%,与模型值基本相符。     

双酶水解乳清蛋白ACE抑制肽的制备工艺优化

以乳清蛋白为原料,采用胃蛋白酶和胰蛋白酶双酶先后水解乳清蛋白,通过单因素试验和正交试验优化胃蛋白酶和胰蛋白酶水解乳清蛋白制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的工艺,将水解物以3 kDa超滤膜过滤,研究表明,胃蛋白酶水解乳清蛋白最佳酶解工艺条件为水解温度37℃、底物质量浓度6 g/100 mL、酶与底物比3 728 U/g,此时乳清蛋白ACE抑制率为86%;胰蛋白酶水解乳清蛋白最佳酶解条件为温度55℃、底物质量浓度6 g/100 mL、酶与底物比3 480 U/g,此时ACE抑制率为72%。利用超滤离心管获得分子量小于3 kDa的乳清蛋白ACE抑制率96%。     

大豆乳清蛋白的胰蛋白酶改性研究

大豆乳清蛋白虽然具有一些较好的功能特性,但由于其主要组分胰蛋白酶抑制剂存在热稳定性差,抑制血清中胰蛋白酶的活性等缺点。采用相应的改性技术对超滤提取的大豆乳清蛋白进行了胰蛋白酶改性研究,确定的改性条件为:底物浓度2%,酶用量3500 U/100 g蛋白,水解时间3h,水解温度60℃。改性后的大豆乳清蛋白起泡性和乳化稳定性、NSI值、相对抗氧化能力均得到提高,分别提高108.33%、6.29%、0.96%、23.15%。     

乳清多肽茶饮料的研究

以乳清为原料,经胰蛋白酶水解后与茶汁调配成乳清多肽茶饮料,通过单因素及正交实验确定了此饮料的最佳配方及生产工艺。茶叶浸提的最优条件为:95℃,11 min。胰蛋白酶水解乳清蛋白的最适处理条件为:温度为40℃、时间为6 h、[E/S]为0.4%,乳清蛋白的水解度可达16.7%。乳清多肽茶饮料的最佳配方为:茶汁为50%,白砂糖为7.0%,柠檬酸为0.04%,稳定剂量(黄原胶和CMC质量比1:1)为0.10%。     

复合酶解乳清蛋白制备降血压肽的研究

采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽,通过体外检测法测定其ACE抑制率。通过正交试验,得出最优水解条件,即碱性蛋白酶和胰蛋白酶[E1/E2]之比为5:4,温度为45℃,pH值为8.0,时间为150min,水解度11.92%的条件下,乳清蛋白肽对ACE的抑制能力最强,达到60.19%。     

乳清蛋白酶解的工艺条件研究

利用二次旋转回归试验设计较系统地研究了乳清蛋白在碱性蛋白酶催化下的水解作用，得到了在一定的条件变化范围内乳清蛋白水解物的水解度变化规律。建立的回归模型所得结果与实际结果相符，所以该模型可用于对水解度的预测；二次旋转回归设计还可对于乳清蛋白的限制水解进行优化条件选择。     

乳清多肽饮料的研制

用胰蛋白酶对乳清进行水解,制取乳清多肽饮料。对制取的工艺过程及操作要点进行了研究。结果显示,只要控制好水解条件和进行适当的处理,可以得到水解度适中、风味良好的酸溶性蛋白肽饮料。     

乳清蛋白水解程度与抗菌能力的相关性

利用不同方式水解乳清蛋白,测量水解程度及水解物的抗菌能力并探讨二者的相关性。结果表明:一定程度的水解可使乳清蛋白产生明显的抗菌能力,抗菌能力的强弱与水解程度密切相关(胰蛋白酶水解程度小于12mg氨基酸/mL时呈正相关,r=0.9740;水解程度大于12mg/mL时呈负相关,r=-0.9468)。胰蛋白酶在不同水解条件下水解乳清蛋白时均存在一个最适水解程度(10～12mg/mL),在此范围内的水解物呈现最大的抑菌能力。而盐酸水解法无论在乳清蛋白水解液的抗菌能力或在抗菌能力的稳定性方面均明显差于酶水解法。本研究证明了适当水解(酶法水解时控制水解程度为10～12mg/mL)能够显著提高乳清蛋白的抗菌能力,可为利用乳清蛋白开发新型食品天然保鲜剂提供依据。     

复合酶解法制备山楂绞股蓝乳清多肽复合饮料的工艺优化

以鲜牛乳为原料制备乳清,通过单因素实验、正交试验、响应面试验,结合测试多肽的胆固醇胶束溶解度抑制率,优化复合酶酶解乳清蛋白的工艺和多肽复合饮料的配方。结果表明,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶分段酶解乳清蛋白制取乳清蛋白肽的最佳工艺条件是酶添加总量6%、酶比例3:1,酶解总时间4 h,分段酶解时间比1:1。响应面法优化得到该饮料的最佳配方参数为山楂含量2.8%、枸杞含量1.56%、绞股蓝含量0.24%、柠檬酸含量0.05%、蜂蜜含量5.11%,经过调配、均质、杀菌等环节,得到pH为4.30、感官性能与稳定性较佳、具有原料风味、酸甜度适中、橙红色色泽均匀且不分层的山楂绞股蓝乳清多肽复合饮料。     

利用冷榨花生饼制备花生多肽饮料

以冷榨花生饼为原料,采用碱法和酶水解法制备花生蛋白,以蛋白质提取率为指标,确定蛋白提取条件,并利用所提取蛋白或蛋白水解物经乳酸菌发酵制备花生多肽饮料。结果表明NaOH溶液提取花生蛋白的最佳条件为：pH9.0、温度55℃、料液比1:8(g/mL)、浸提2h,蛋白提取率80.68%;胰蛋白酶水解蛋白的最佳条件为：酶与底物比1:50(m/m)、底物质量浓度5g/100mL、pH9.0、水解温度50℃,蛋白提取率96.26%。以花生水解蛋白和脱盐乳清粉为原料,采用直投式乳酸菌为发酵剂,发酵条件为：花生水解蛋白质量浓度2g/100mL、乳清粉加入量1g/100mL、发酵剂与发酵液比1:25(g/kg)、42℃发酵5h、4℃后熟15h、蔗糖质量分数9%时的口感最佳。     

Rheological and structural characterization of gels from whey protein hydrolysates/locust bean gum mixed systems

The gelling ability of whey proteins can be changed by limited hydrolysis and by the addition of other components such as polysaccharides. In this work the effect of the concentration of locust bean gum (LBG) on the heat-set gelation of aqueous whey protein hydrolysates (10% w/w) from pepsin and trypsin was assessed at pH 7.0. Whey protein concentrate (WPC) mild hydrolysis (up to 2.5% in the case of pepsin and 1.0% in the case of trypsin) ameliorates the gelling ability. The WPC synergism with LBG is affected by the protein hydrolysis. For a WPC concentration of 10% (w/w), no maximum value was found in the G′ dependence on LBG content in the case of the hydrolysates, unlike the intact WPC. However, for higher protein concentrations, the behaviour of gels from whey proteins or whey protein hydrolysates towards the presence of LBG becomes very similar. In this case, a small amount of LBG in the presence of salt leads to a big enhancement in the gel strength. Further increases in the LBG concentration led to a decrease in the gel strength.     

Combined microwave and enzymatic treatments for ��-lactoglobulin and bovine whey proteins and their effect on the IgE immunoreactivity

Effect of combined microwave (MW) and enzymatic hydrolysis on the human immunoglobulin E (IgE)-binding properties of ??-lactoglobulin (??-lg) and other whey proteins (WP) was investigated. Separated ??-lg and full whey protein isolate (WPI) were hydrolyzed with trypsin, chymotrypsin, mixture of trypsin/chymotrypsin, and pepsin at three microwave power levels: 50?W during 1 and 5?min, 100 and 200?W during 1 and 3?min. The immunoreactivity of the obtained hydrolysates resulting from combined microwave protease treatment was assessed using sera of young patients allergic to bovine whey proteins. The application of microwave treatment at 200?W enhances the hydrolysis of ??-lg by pepsin in 3?min and decreases significantly its immunoreactivity. The extensive hydrolysis of the microwave-treated ??-lg and WPI with trypsin, chymotrypsin, and the mixture of trypsin with chymotrypsin did not have an impact on the IgE binding of the products obtained in all the studied conditions.     

不同酶酶解鸡胚蛋白工艺比较研究

以鸡胚蛋白为底物,通过单因素及正交试验,确定菠萝蛋白酶和胰蛋白酶对鸡胚蛋白水解的最佳工艺。结果表明：菠萝蛋白酶酶解鸡胚蛋白最佳工艺条件为底物质量分数6％、酶解温度55℃、pH5、酶解时间6h、酶与底物质量比（[E／S]）为1．5％,水解度可达45．53％;胰蛋白酶酶解鸡胚蛋白最佳工艺条件为底物质量分数6％、酶解温度55...     

基于乳清蛋白粉水解产物抗氧化活性优化酶解工艺

通过提高乳清蛋白粉水解产物(Whey protein powder hydrolysate,WPPH)的抗氧化活性,对乳清蛋白粉的酶解工艺进行优化。首先以WPPH水解度及抗氧化活性(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率、总抗氧化能力)为指标,从4种蛋白酶中筛选得到酶解效果较好的胰蛋白酶和菠萝蛋白酶。然后通过单因素与正交试验确定双酶协同水解乳清蛋白粉的最适酶解条件。结果表明:复合酶最优酶解条件为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶以1:1的比例同时添加,pH6.0、温度50℃、酶底比0.3%、底物浓度3 g/100 mL、酶解时间2.5 h,在此条件下WPPH水解度达到34.24%,分子量低于1000 Da的肽段占比在50%以上,DPPH自由基清除率91.42%±0.51%、羟自由基清除率80.85%±0.47%、总抗氧化能力(46±0.65)μmol/L。在本研究确定的酶解工艺条件下,乳清蛋白粉水解产物具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

Production of low antigenic cheese whey protein hydrolysates using mixed proteolytic enzymes

This study examined the effect of different proteolytic enzymes on the production of cheese whey protein (CWP) hydrolysates with low antigenicity. Four enzyme combinations (1:1) trypsin + papain W‐40 (TP), trypsin + neutrase 1.5 (TN), papain W‐40 + protease S (PP) and papain W‐40 + neutrase 1.5 (PN) were added at the rate of 1% of the CWP and it was incubated for 15, 30, 60, 90, 120 and 180 min at 50 °C. CWP hydrolysis and its non‐protein nitrogen concentrations were higher with TP and TN compared with PP and PN at all incubation times. The SDS‐PAGE revealed complete removal of α‐lactalbumin (α‐LA) and β‐lactoglobulin (β‐LG) from hydrolysates produced by trypsin‐containing enzyme mixtures. Reverse‐phase HPLC analysis ascertained the CWP hydrolysis and SDS‐PAGE results. The lowest antigenicity in CWP hydrolysates was observed with the use of trypsin‐containing enzyme mixtures compared with other enzyme combinations. Present results suggested that TP and TN combinations were the most effective for CWP hydrolysis for the removal of β‐LG from CWP. Further research is warranted to identify the peptides in CWP hydrolysates produced with these enzyme combinations that may help enhance the utilisation of whey protein in human food. Copyright © 2007 Society of Chemical Industry     

大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究

以大米蛋白为研究对象,比较了几种酶对大米蛋白的水解作用效果,确定了一种合适的酶源——精制中性蛋白酶。同时通过单因素试验和响应面分析,确定了采用精制中性蛋白酶制备大米蛋自抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.0%、[E]/[S]2.0%、pH7.0、温度37.5℃、时间4.16 h,该条件下制备的大米蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为60.54%。     

超声波辅助酶法制备大豆蛋白抗氧化肽的研究

采用超声波辅助木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的方法制备抗氧化肽。结果表明,大豆蛋白的最佳水解条件如下:90℃预处理15min,pH6.5,[E]/[S]为7%,超声波处理30min,65℃水解3h,水解度可达19.2%。大豆蛋白肽抗氧化性的高低和水解度的大小没有直接的线性关系,采用此法制备大豆蛋白抗氧化肽的效果较好,具有良好的应用前景。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。