微波辐射对不同介质均相壳聚糖的降解研究

在小同酸性介质中,采用微波辐射对壳聚糖进行均相降解反应,制备出不同分子量的壳聚糖。探讨反应介质、过氧化氢与壳聚糖配比、微波辐射功率和辐射时间对降解反应的影响。结果表明：选择不同的反应条件,微波辐射1～6min就可制备出相对分了量在1～10万之间不同分子量大小的壳聚糖,且反应产率高、重复性好。固定其他反应条件不变,在CH3COOH介质中,壳聚糖的降解速度最快,适合制备分了量为1～5万的水不溶性壳聚糖,产率在80％以上;在HCOOH介质中,降解速度最慢,适合制备分子量在5万以上的壳聚糖,产率在90％以上;在HCl介质中的降解速度则介于二者之间。     

壳聚糖氧化降解制备壳寡糖的研究

本文将脱乙酰度为96.7%的壳聚糖(COS)通过过氧化氢氧化降解制取壳寡糖,通过单因素变量的研究以及正交实验得出最优反应条件为:反应温度60℃,反应时间6 h,过氧化氢质量分数4.0%,乙酸质量分数4.0%,且四个因素对降解程度的影响为反应温度>过氧化氢质量分数>乙酸质量分数>反应时间。通过凝胶渗透色谱(GPC)对原料壳聚糖及最优条件下得到的降解产物的分子量分布进行检测,结果表明壳聚糖已完全降解且相对分子量达2000以下,降解产物经电喷雾质谱(ESI-MS)检测分析得聚合度为10以下,在控制降解的范围内,达到制备目的。     

微波固相合成寡糖工艺的初步研究

以葡萄糖（C6H12O6．H2O）为原料，以杂多酸为催化剂对生物活性物质寡糖的微波固相合成进行了研究。确定最佳反应条件为：微波功率800瓦，微波辐射时间10min，引发剂水的添加量30％，催化剂酸添加量10％；产物得率为50．6％。经高压液相色谱分析产物，确定微波固相合成物的组成为：葡萄糖49．34％，麦芽糖10.03％，异麦芽糖18．03％．麦芽三糖5.40％，潘糖10．13％，异麦芽三糖5．30％，四糖和五糖占1．61％。     

用于壳聚糖降解的复合酶制剂产生菌的筛选

以壳聚糖为唯一碳源,结合固态培养基发酵培养,从自然界中筛选得到一株产复合酶的菌株,初步鉴定为曲霉属.该菌产复合酶中以壳聚糖酶、纤维素酶和α-淀粉酶为主,它们的酶活分别为2.206、0.790、3.229U/mL.该复合酶降解壳聚糖的最适温度为50℃,最适pH为5.6,最适时间为4h.通过有机溶剂分级沉淀,发现该复合酶降解壳聚糖的最终产物以聚合度为8～16的壳寡糖为主,表明该复合酶在壳寡糖制备方面具有一定的应用价值.     

壳聚糖氧化降解制备聚合度6以下的壳寡糖

壳寡糖是壳聚糖经降解后的低聚物,其相对分子质量较小,水溶性好,易于吸收,生物活性高。本实验采用过氧化氢氧化降解脱乙酰度高于95%的壳聚糖,利用离子色谱-脉冲安培法对低聚合度的壳寡糖进行定性和定量分析,以制备聚合度在6以下的壳寡糖。以降解产物的离子色谱中聚合度6以下的峰面积和与产物得率之积作为响应指标,并结合凝胶渗透色谱来考察过氧化氢浓度、反应时间、反应温度对壳聚糖降解的影响及降解特性,并利用响应面分析法对氧化条件进行优化。研究结果表明,采用离子色谱测定聚合度6以下的壳寡糖在方法学上是可行的,具有良好的精密度、稳定性和重现性。得到的最佳降解工艺条件为:过氧化氢浓度4.50%、反应时间6 h、反应温度56℃。由最优条件下的降解产物离子色谱图可知,聚合度越低的壳寡糖越容易得到;可利用离子色谱法对壳聚糖的降解过程进行调控。     

壳聚糖降解制备低聚壳聚糖和壳寡糖的研究进展

壳聚糖降解制备的低聚壳聚糖和壳寡糖具有许多独特的生理活性。介绍和评述了酸降解法、氧化降解法、酶降解法以及复合降解法等各种制备方法的研究进展。     

用于壳聚糖降解的复合酶制剂产生菌的筛选

以壳聚糖为唯一碳源,结合固态培养基发酵培养,从自然界中筛选得到一株产复合酶的菌株,初步鉴定为曲霉属。该菌产复合酶中以壳聚糖酶、纤维素酶和α-淀粉酶为主,它们的酶活分别为2.206、0.790、3.229U/mL。该复合酶降解壳聚糖的最适温度为50℃,最适pH为5.6,最适时间为4h。通过有机溶剂分级沉淀,发现该复合酶降解壳聚糖的最终产物以聚合度为8～16的壳寡糖为主,表明该复合酶在壳寡糖制备方面具有一定的应用价值。      

复合酶对壳聚糖的降解作用研究

研究由胃蛋白酶、果胶酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶组合而成的复合酶对壳聚糖的降解作用.着重探讨反应温度、pH、酶底比和不同脱乙酰化度的原料对多种复合酶水解作用的影响.结果表明：复合酶E2对壳聚糖具有最高的水解活力,水解产物的DE值最高.结合酸预处理,以酶底比1∶10,可使壳聚糖的水解产物分子量低于4000.     

盐酸处理对壳聚糖的降解作用研究

研究以壳聚糖为原料,针对壳聚糖因水溶性差,反应物浓度小的难题,采用醋酸溶解和添加2%的盐酸,于90℃保温搅拌6h,可以使此壳聚糖体系的黏度从3.00Pa.s降至0.266Pa.s,溶液流动性好,同时可使壳聚糖浓度提高到10%。该处理方法不仅使壳聚糖浓度增加,而且又避免了采用高温加热法易产生单糖的缺陷。     

壳聚糖酶的研究进展

壳聚糖酶(Chitosanase,EC3.2.1.99)是一种对壳聚糖具有分解作用的专一性酶,可以特异性的水解壳聚糖,得到特异分子量范围的壳寡糖。壳寡糖是目前仅知的唯一的碱性寡糖,具有独特的生物活性。本文概述了近年来壳聚糖酶的研究进展,包括酶来源及性质、纯化方法的研究、分子水平的研究、作用方式及功能、应用及展望等方面,并探讨了壳聚糖酶研究中尚存在的主要问题及今后的研究方向。     

通过酶促反应制备壳寡糖

用酶降解法对壳聚糖进行降解 ,研究了温度、pH值、金属离子等对酶促反应的影响 ,降解的最佳温度和pH值分别为 5 0℃和 5 0 ,Mg2 + 和Ca2 + 对酶降解具有一定的促进作用 ,而重金属离子Cu2 + ,Ni2 + 和Zn2 + 对酶降解有强烈的抑制作用。通过降解过程中壳聚糖溶液粘度的变化可以得出 ,该壳聚糖酶是以内切方式作用于壳聚糖。采用离子交换色谱柱对降解产物进行分离 ,得到了聚合度为 2～ 9的壳寡聚糖。该酶促反应符合米氏动力学方程 ,米氏常数Km 值为 2 60 1g/L ,Vmax 值为 3 5 79× 10 - 2 g/min·L。     

响应面法优化微波辅助果胶酶制备壳寡糖的工艺

为优化壳寡糖制备工艺,提高壳寡糖得率,以壳聚糖为原料,采用微波法辅助果胶酶酶解壳聚糖制备壳寡糖,以还原糖含量作为壳寡糖的产率依据,通过单因素实验和响应面实验确定最佳工艺条件为:果胶酶加酶量2100 U/g,微波功率510 W,pH4.4,反应温度50℃,在此工艺条件下获得的降解产物中还原糖浓度为1.964 mg/mL,与单一果胶酶酶解法(1.747 mg/mL)相比提高了12%,与单一微波法(1.671 mg/mL)相比提高了18%。     

壳聚糖凝胶固定葡萄糖氧化酶制备酶电极的工艺

以壳聚糖作为固定GOD载体 ,研究了壳聚糖溶液的粘度 ,交联剂戊二醛的浓度、用量以及铂丝在酶膜母液中浸涂时间等对葡萄糖传感性能的影响。在优化固定化条件的基础上 ,建立了通过调整固定化条件来适应载体溶液粘度变化的工艺 ,制备出性能基本一致的酶电极     

壳寡糖膦酸酯对烟草花叶病毒抗性及其机理的初步研究

为开发新的生物源抗烟草花叶病毒(TMV)剂,对合成的5种壳寡糖膦酸酯进行了抗性盆栽试验研究,通过心叶烟的鉴定发现,5种药剂对TMV都具有显著的抗病效果,其中浓度为200 μg·mL-1的COS-P-3处理效果最佳,达到了90.79％的枯斑抑制率,分别比市售药剂二(辛基胺乙基)甘氨酸盐和宁南霉素提高51.8％和24.0％,显著提高了预防效果.用筛选出的抗病毒剂处理豫烟5号,烟草叶片的叶绿素含量比接种对照明显提高,而同时超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性均有不同程度的提高.结果表明,新型壳寡糖膦酸酯COS-P-3通过诱导烟草防卫反应、提高防御酶活性,保护叶片中叶绿体合成,从而减轻病毒的侵害.     

无甲醛壳聚糖直毛固定剂的研制与应用

用４％～６％盐酸水溶液在常温下将壳质包４～１２ｈ,提取甲壳质,然后加４０％～５０％浓度碱,控制温度６０～１４０℃,时间１～８ｈ,水洗两次制取粗壳聚糖,最后降解到相对粘度为３．７～５．０ｍＰａ．ｓ即得产品。     

壳寡糖的制备、纯化及应用研究进展

壳寡糖（Chitooligosaccharide,COS）是几丁质或壳聚糖降解后获得的N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖胺的同聚或异聚物,具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性,已被广泛应用于医药、食品、农业等领域。目前,酶法、物理法和化学法均已被报道用于制备COS。然而,单一法制备COS有一定的局限性,很难高效、绿色地获得具有特定聚合度和乙酰度的目标产物。因此,COS的制备已经从单一法转向至协同催化体系的探索。此外,借助超滤法、活性炭吸附法、色谱法等分离纯化技术也可以提高COS的纯度。本文对近年来COS的制备和纯化方法以及应用研究进展进行了综述,以期为高品质COS的生产以及应用领域的拓展提供理论基础。