鸡肉蛋白酶解条件及产物降解规律

采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白,通过单因素实验和正交实验确定水解鸡肉蛋白的最适条件,并在此水解条件下酶解24 h,研究水解过程中酶解液中游离氨基酸含量和肽分子质量分布的变化规律。结果表明,最佳的酶解条件为:温度45℃,pH6.5,酶用量6.0%,固液比1∶2,水解时间6 h;酶解产物中游离氨基酸种类齐全且含量较高,水解过程中,游离氨基酸总量变化呈增长的趋势,16 h后变化不大;酶解液的肽分子质量都集中在3 000Da以下,酶解过程中大分子质量肽不断减少,小分子质量肽不断增加;酶解24 h后,分子质量小于1 000 Da的小分子肽和氨基酸含量可达97.19%。     

胰酶水解猪皮胶原蛋白及其产物氨基酸分析

采用胰酶水解猪皮胶原蛋白,研究其降解规律及酶解产物氨基酸组成.研究表明:95℃热处理猪皮胶原蛋白10 min能显著提高酶解速率;整个酶解过程中,可溶性氮、氨肽氮含量呈增加趋势,但3 h后增势变缓,而肤含量在3 h后达到最大值;大部分不溶性蛋白在酶解6h后已经变成可溶性多肽和氨基酸;从酶解产物氨基酸组成可表明,采用胰酶水解猪皮胶原蛋白能显著提高其营养价值.     

不同酶水解马氏珍珠贝蛋白的特性研究

本研究采用Alcalase2.4L、Protamex、Papain、PTN6.0S、Flavorzyme500MG、Neutrase和内源酶水解马氏珍珠贝肉蛋白,探讨了各种酶的酶解特性、产物的氨基酸组成及肽相对分子质量分布规律和呈味特征的差异.结果表明,PTN6.0S酶解产物的蛋白质利用率、肽得率和水解度均较高,而内源酶均最低.各酶解产物中,谷氨酸,精氨酸和天冬氨酸的含量均较高.同一氨基酸在不同酶解产物中回收率存在较大差异,色氨酸、苏氨酸、脯氨酸和天冬氨酸在马氏-爹珠贝蛋白酶解产物中主要以多肽的形式存在,各酶解产物中氨基酸的回收率和释放率较高的氨基酸与各酶的主要作用位点有很好的对应关系;各种酶均能不同程度地降解马氏珍珠贝肉蛋白和相对分子质量大于5000Da的肽断.各酶水解产物肽相对分子质量分布差异主要体现在3000以下.在各酶解产物中,Papain酶解产物风味最佳,鲜味最高,苦味和腥味最低.     

木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的研究

以大豆分离蛋白为原料,以细胞生长抑制率为指标,用木瓜蛋白酶对其进行酶解,得到大豆抗癌活性肽。木瓜蛋白酶的最佳作用条件为:温度55℃、酶添加量7 000 U/g、反应pH 7.5、底物质量分数6%、酶解时间4 h。在抗癌活性肽制备过程中,对水解度和肽活性之间的关系进行了研究。结果表明,水解度与大豆肽的抗癌活性不呈线性关系。用10 000 u和5 000 u的超滤膜处理木瓜蛋白酶的酶解产物,在不同分子质量的超滤组分中,分子质量小于5 000 u组分的癌细胞生长抑制率最高,达32.58%。     

木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白及其产物氨基酸分析研究

本文采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白研究其降解规律及酶解产物氨基酸组成。研究表明:热处理鸡肉蛋白不利于酶解;整个酶解过程中,可溶性氮、氨态氮含量呈增加趋势,但4h后增势变缓,而肽含量在水解8h达到最大值;肽分子量分布图显示大部分不溶性蛋白和分子量大于10000Da肽段在酶解4h后已经变为可溶性多肽和氨基酸,分子量在5000～10000Da间肽段酶解24h后仍大量存在,分子量在3000～5000Da间以及小于3000Da的肽占总肽量比值在整个酶解过程中呈增加趋势。与原料蛋白氨基酸组成比较表明采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白能显著提高其营养价值。     

酶水解猪血红蛋白过程蛋白质降解和氨基酸释放

采用商业酶(Pancreatin,Protamex,Pancreatin/Protamex)水解肉品加工业的副产品猪血血红蛋白.水解后的血红蛋白产物采用凝胶过滤色谱(GPC)及HPLC分析水解过程蛋白质降解及氨基酸释放规律.Protamex水解产物具有宽泛的分子量分布且含有大量的大分子肽(＞15kDa);Pancreatin水解产物同样具有宽泛的分子量分布,但含有大量的小分子肽(＜5kDa).氨基酸组成分析结果表明,Pancreatin酶和Protamex酶均对疏水性氨基酸有较强的作用能力,而且这两种酶的作用住点有互补效应.Pancreatin/Protamex水解产物具有最为复杂的分子量分布图谱,在酶解24h后.水解得到最高的蛋白质回收率为92.34%.在Pancreatin/Protamex水解后期,产物中的肽尤其是大分子肽(＞15kDa)和含有较多疏水性氨基酸的肽容易聚集沉降,导致蛋白质回收率的降低.     

琥珀酸脱酰胺对小麦面筋蛋白酶解特性的影响

研究琥珀酸不同脱酰胺程度对小麦面筋蛋白Pancreatin酶解过程中蛋白回收率、水解度、总酸、总糖的影响,并对酶解48h酶解液的肽分子量分布、氨基酸及风味进行分析评价.结果表明:蛋白回收率、水解度、总酸在酶解过程中逐渐上升,总糖含量在酶解12h后下降,脱酰胺后酶解产物的蛋白回收率和水解度增大,而高脱酰胺程度下又略有降低;琥珀酸脱酰胺后酶解产物分子量大于10000Da的肽段减少,3000～5000Da的肽段增加;琥珀酸脱酰胺使酶解产物风味明显提高,其中琥珀酸高脱酰胺程度预处理的酶解液苦味最低,且具有较强的鲜味和成味;氨基酸分析表明,琥珀酸高脱酰胺预处理使酶解液游离氨基酸中鲜甜味氨基酸比例增大,苦味氨基酸比例降低,同时必需氨基酸含量升高.     

几种蛋白酶对文蛤肉的水解效果

在一定的酶解条件下,用Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、复合风味酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶等几种蛋白酶对文蛤内进行水解,测定了这几种蛋白酶的水解度,以及其水解物的氨基态氮含量、可溶性蛋白含量和透明度,并用凝胶过滤色谱(Sephedex G-25)对水解物的分子质量分布进行了粗略分析。结果表明,Alcalase水解物分子质量的分布范围较广,适合制备具有一定肽链要求的短肽,酸性蛋白酶水解物分子质量较小,适合制备文蛤调味品,中性蛋白酶水解物分子质量主要集中在1 000 u左右与10 000u左右,胰蛋白酶和复合风味酶的水解物分子质量大部分在1 500 u以上。     

鸡骨蛋白酶解过程中的产物性质研究及电泳分析

研究风味蛋白酶酶解鸡骨过程中的氨基氮、可溶性氮、肽基氮的变化规律以及产物的呈味特性的变化趋势。结果表明:氨基氮和可溶性氮在酶解过程中逐渐增加,肽基氮增加到最大值后下降;酶解产物鲜味随时间延长而增加,苦味值在酶解后期逐渐稳定。游离氨基酸含量在24h达到最大值,呈味氨基酸的大量释放对酶解液的风味有重要影响。酶解液的Tricine-SDS-PAGE电泳结果显示,在酶解过程中,多肽分子质量逐渐降低,酶解24h,酶解液分子质量约都集中在10.0kD以下。     

珍珠贝水解肽的制备、氨基酸组成及抗炎活性

目的:高值化利用马氏珠母贝肉生物活性成分及马氏珠母贝肉抗炎活性肽。方法:以马氏珠母贝肉为原料,以水解度(DH)为指标,通过单因素试验和响应面试验优化珍珠贝水解肽工艺制备,并对珍珠贝水解肽的氨基酸组成和抗炎活性进行评价分析。结果:中性蛋白酶为最适酶,酶解最优工艺条件为料液比1∶1 (g/mL),酶解温度46.3℃,酶解时间1.4 h,酶底比0.3%,此时水解度为22.88%,与理论值无显著差异,回归模型可靠。酶解物中必需氨基酸含量达19.84%,疏水性氨基酸含量占比21.19%,带正电荷氨基酸含量为10.46%。在LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7抗炎模型中,珍珠贝水解肽在0～4.0 mg/mL的质量浓度范围内无细胞毒性且有利于巨噬细胞增殖。质量浓度为2.0 mg/mL时,珍珠贝水解肽可有效抑制NO的产生,以及细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的生成,NO抑制率达到70.00%,TNF-α、IL-6和IL-1β抑制率分别达到83.01%,85.04%,83.11%。结论:珍珠贝水解肽的氨基酸种类齐全,其能有效抑制RAW264.7巨噬细胞NO及细胞炎症因子TNF-α、IL-...     

小麦面筋蛋白深度酶解过程中呈味物质变化趋势的研究

以麸皮和面粉制曲,利用米曲霉生长过程中产生的复合酶,对小麦面筋进行深度酶解,研究了产物的呈味变化趋势及酶解过程中蛋白质、氨基酸、总酸、总糖、肽的释放规律。酶解产物的鲜味、酸味随着酶解时间的延长不断增强,苦味、甜味不断下降。蛋白质回收率、氨基酸转化率、总酸在酶解的过程中逐渐增加,但是36h后增速均趋于平缓,总糖的含量不断下降。随着酶解时间的延长,大分子肽渐渐分解成小分子肽,主要表现为1000～5000u分子段的肽的含量减少和小于1000u分子段的肽的含量增加。     

活性炭静态吸附马氏珠母贝胰酶水解产物中氨基酸特性研究

采用胰酶酶解马氏珠母贝肉蛋白,研究了活性炭静态吸附前后酶解产物中氨基酸及各组分的变化情况。结果表明:在马氏珠母贝胰酶水解体系中,结合态和游离态芳香族氨基酸分别被吸附67.4%和42.3%,处于结合态的芳香族氨基酸更易于被活性炭吸附,并且活性炭吸附后,分子量较大组分的蛋白或多肽含量明显下降。     

Preparation and characterisation of the pearl oyster (Pinctada martensii) meat protein hydrolysates with a high Fischer ratio

The primary aim of this study was to obtain high Fischer ratio oligopeptides from the pearl oyster Pinctada martensii meat via proteolysis. Pinctada martensii meat protein was hydrolysed using seven proteases, with pancreatin showing the most protein recovered (90.30%) and the highest degree of hydrolysis (30.22%). In addition, pancreatin treatment liberated aromatic amino acids (AAA) and preserved branched-chain amino acids (BCAA) in the peptide chain more efficiently than other proteases. In our enzymatic hydrolysis system, the AAA are adsorbed by activated carbon much easier in the form of proteins and peptides compared with the free state. The fraction purified from the pancreatin hydrolysate after adsorption onto activated carbon gave a yield of 38.42% based on nitrogen content. It was composed primarily of low molecular weight peptides and had a Fischer ratio of 24.58, with phenylalanine (Phe) and tyrosine (Tyr) content below 1.2%. This oligopeptide mixture can be used for the assistance treatment of patients with hepatic encephalopathy, phenylketonuria and tyrosinemia according to different dietetic requirement.     

Proteolysis in biceps femoris during Jinhua ham processing

Sixty experimental Jinhua hams were processed by a traditional method. The nitrogen fractions and free amino acids in biceps femoris were analyzed. Intense proteolysis was found in ham muscle and totally more than 10% of muscle proteins were degraded during the course of Jinhua ham processing. The proteolytic index of Jinhua ham was between 14 and 20. Both insoluble and soluble proteins were degraded to some degree and the later showed more intense degradation. In the soluble fraction, the percentage of non-protein nitrogen (NPN) increased gradually whereas that of protein nitrogen decreased during processing (P<0.05). However, very small amount of peptides larger than 1kDa was accumulated during the whole course of processing, which proved that intense degradation reactions were also happened to them, especially at the post ripening stage when dramatic decrease of nitrogen fraction from all the peptides larger than 1kDa was found. As a result, more than 90% of the NPN products from muscle proteolysis were free amino acids and peptides of MW less than 1kDa that might make important contribution to Jinhua ham taste and provide precursors for the generation of volatile flavor compounds in ham muscle. The pattern of muscle proteolysis coincided with the reported changes of muscle proteolytic enzymes during processing, seemingly indicating that the enzymes could have played important roles in ham muscle proteolysis.     

Characterization of hydrolysates derived from enzymatic hydrolysis of wheat gluten

ABSTRACT:  The aim of this study is to investigate the characteristics of wheat gluten hydrolysates. Enzymatic hydrolysis was performed using a papain (food-grade enzyme) in the present study. The gluten proteins were hydrolyzed for 8 h. During enzymatic hydrolysis, average peptide chain length in the hydrolysate decreased rapidly. Increasing proteolysis resulted in the increase in the contents of the soluble forms of nitrogen. However, the content of peptide nitrogen increased within the 1st 6 h, and then began to decrease. The percentage of the released peptides with molecular weight (MW) of over 15 kD decreased with extending enzymatic hydrolysis, while those with MW below 5 kD increased significantly ( P < 0.05). The peptides with MW 10 to 15 kD and those having the MW 5 to 10 kD had different changes. The polymeric glutenin and monomeric gliadin in gluten complex showed different behavior after enzymatic hydrolysis. The monomeric protein (gliadin) and soluble glutenin were prone to enzymatic hydrolysis, while insoluble glutenin was resistance to enzymatic hydrolysis.     

马氏珍珠贝软体酶法制备降糖肽的工艺优化及肽段分析

目的:以二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase，DPP-IV）抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺，并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞（HepG-2）胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase，DPP-IV）抑制率为评价指标，比较筛选了酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对马氏珍珠贝软体的酶解效果，通过单因素及正交试验分析酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间等因素对酶解物降糖活性的影响，确定最佳酶解工艺，以液相串联质谱（Nano LC-MS/MS）分析酶解物中肽类物质组成。结果:酸性蛋白酶酶解的产物葡萄糖消耗量和DPP-IV抑制率优于其他种类蛋白酶，马氏珍珠贝软体制备降糖肽的最佳酶解条件为:45 ℃、3 h、料液比1:3.5（w:w）、加酶量1000 U/g，在此条件下的葡萄糖消耗量为37.53%、DPP-IV抑制率为74.21%。最佳工艺制备的马氏珍珠贝软体酶解物中93.88%的肽段分子量低于2000 Da，22.63%的肽段为疏水性肽段，74.92%的肽段N端至少有含有一个疏水性氨基酸。结论:本研究酶法制备的马氏珍珠贝软体降糖肽可通过抑制DPP-IV的活性及减少胰岛素抵抗发挥降糖作用，对功能食品的研发具有一定的指导意义。     

柠檬酸提取贝肉中镉及其提取液中氨基酸组成分析

以马氏珠母贝匀浆液为原料,利用柠檬酸络合提取马氏珠母贝匀浆液中的重金属镉,考查柠檬酸溶液浓度、溶液pH、料液比和反应时间对镉提取率的影响,优化镉的提取条件,并分析提取液中氨基酸组成,通过化学评分和必需氨基酸指数对其蛋白质的营养价值进行评价。结果表明,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液中的镉具有很好的提取效果,在最佳提取条件下,即柠檬酸溶液的浓度为0.08mol/L、pH 4.0、料液比1∶10(m∶V)、提取时间4h,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液镉的提取率达到92.2%。马氏珠母贝肉脱镉后所得的柠檬酸提取液中总氨基酸含量为2 940mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为51.7%,蛋白质的EAAI为78.06;马氏珠母贝肉总氨基酸含量为13 120.0mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为32.4%,蛋白质的EAAI为69.98,表明马氏珠母贝肉以及柠檬酸提取液均富含蛋白质、必需氨基酸,且必需氨基酸组成比较均衡。     

Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白规律及其产物清除DPPH活性研究

研究了Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白的规律及其产物清除DPPH自由基活性。结果表明,随酶解时间延长,可溶性蛋白质、氨基酸含量不断增加,而肽含量则在水解前8h达到最大,随后不断降低;肽的分子量分布趋势总体表现为大分子量的肽逐渐减少,小分子量肽的含量逐渐增多,肽分子量分布图中肽峰值不断向后推移;Alcalase对分子量在3000～15000Da间的肽段降解能力较弱,水解24h后,这部分肽占总肽量的比值仍为89.93%。水不溶性鸡肉蛋白Alcalase酶解产物有明显的清除DPPH活性,其清除DPPH活性在酶解4h时达到最大,随后不断下降;对于同一酶解时间的产物,浓度越大,其清除DPPH活性越强,但其清除DPPH能力并不与酶解液浓度成倍数关系。     

马氏珠母贝肉ACEIP分离及提取的初步研究

选用合适的蛋白酶对马氏珠母贝肉(Pinctada martensii)进行水解,水解液经过分离提取后,得到血管紧张素转换酶抑制肽(ACEIP)。2个较高 ACE 抑制活性的组分样品 A 和样品 B 的 IC_(50)分别为0．033mg/mL 和 0．041mg/mL。2个样品氨基酸含量最多的是 Phe,分别达到57．5%和53．2%,其相对分子量分别为1042和 256。