米曲霉粗酶和商业蛋白酶对马氏珍珠贝肉酶解特性的比较

以麸皮为原料固体发酵制备种曲,通过磷酸盐缓冲液提取得到粗酶(CP)。采用粗酶、Protamex、Papa-in、PTN6.0S、Flavorzyme以及内源性蛋白酶水解马氏珍珠贝肉蛋白,比较了各种酶的酶解特性、酶解液风味、分子量分布规律及氨基酸组成,并探究了酶解液组成和呈味特征的关联。结果表明:内源性蛋白酶的蛋白质回收率、水解度均最低,麸皮成曲粗酶CP酶解液的蛋白质回收率达68.36%、水解度达64.27%,显著高于其余商业蛋白酶。各酶解液中,CP的酶解液分子质量主要集中在小于3 000 U,其中小于1 000 U的寡肽及游离氨基酸占84.65%,均显著高于其余商业蛋白酶;游离氨基酸释放量和鲜味氨基酸释放率达38.27%,均显著高于其余商业蛋白酶的酶解液。CP酶解液风味最佳,苦味、腥味减弱明显,与内源性蛋白酶酶解液相比,腥味值降为26%,且鲜味值提高至2.75倍。     

不同酶水解马氏珍珠贝蛋白的特性研究

本研究采用Alcalase2.4L、Protamex、Papain、PTN6.0S、Flavorzyme500MG、Neutrase和内源酶水解马氏珍珠贝肉蛋白,探讨了各种酶的酶解特性、产物的氨基酸组成及肽相对分子质量分布规律和呈味特征的差异.结果表明,PTN6.0S酶解产物的蛋白质利用率、肽得率和水解度均较高,而内源酶均最低.各酶解产物中,谷氨酸,精氨酸和天冬氨酸的含量均较高.同一氨基酸在不同酶解产物中回收率存在较大差异,色氨酸、苏氨酸、脯氨酸和天冬氨酸在马氏-爹珠贝蛋白酶解产物中主要以多肽的形式存在,各酶解产物中氨基酸的回收率和释放率较高的氨基酸与各酶的主要作用位点有很好的对应关系;各种酶均能不同程度地降解马氏珍珠贝肉蛋白和相对分子质量大于5000Da的肽断.各酶水解产物肽相对分子质量分布差异主要体现在3000以下.在各酶解产物中,Papain酶解产物风味最佳,鲜味最高,苦味和腥味最低.     

企鹅珍珠贝肉蛋白酶解及酶解产物的抗氧化活性

用水解蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶对企鹅珍珠贝蛋白进行水解,以酶解液中的氨基态氮及风味为指标,确定风味蛋白酶为水解企鹅珍珠贝蛋白的最适蛋白酶,单因素及正交实验确定风味蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量0.8%、温度55℃、起始p H6.0、固液比1∶1.0、酶解6h后的氨基酸态氮为3.65g/100m L。抗氧化实验表明,酶解产物具有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基抑制及还原能力。研究结果将为企鹅珍珠贝肉的开发提供参考。     

企鹅珍珠贝肉蛋白酶解及酶解产物的抗氧化活性

用水解蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶对企鹅珍珠贝蛋白进行水解,以酶解液中的氨基态氮及风味为指标,确定风味蛋白酶为水解企鹅珍珠贝蛋白的最适蛋白酶,单因素及正交实验确定风味蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量0.8%、温度55℃、起始p H6.0、固液比1∶1.0、酶解6h后的氨基酸态氮为3.65g/100m L。抗氧化实验表明,酶解产物具有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基抑制及还原能力。研究结果将为企鹅珍珠贝肉的开发提供参考。      

马氏珍珠贝肉蛋白水解特征及其ACE抑制肽的筛选

为探索马氏珍珠贝肉的水解规律及快速鉴定血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性肽,本研究以不同时间(2、4、6、8、10h)的酶解物为对象,采用三羟甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、分子质量分布、反相高效液相色谱(reversed-phase high...     

风味酶酶解马氏珠母贝肉的工艺研究

对风味酶酶解马氏珠母贝肉的工艺进行了研究.结果表明,酶解最适条件为1 g底物加酶量为7200 U,底料与水的质量比为1/3,反应温度为50℃,反应pH值为7.0,反应时间为4h,此时酶解率为43.45%,1 kg马氏睐母贝肉可得118.3 gEAP干粉,产品中粗蛋白占56.6%.酶解产物经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析分离,获得4个组分,分子量分布范围为57543～79.其中分子量小于6026的占83.4%,是良好的食物蛋白基料.     

马氏珍珠贝蛋白降解与抗氧化性关系的研究

以马氏珍珠贝肉为原料固体发酵制备米曲霉,采用还原力、DPPH自由基清除力、氧自由基清除能力(ORAC)三种指标评价酶解过程中抗氧化性的变化。利用总氮、氨氮、肽含量以及色泽表征蛋白质降解规律,并进一步探究其蛋白降解规律与抗氧化活性之间的内在联系。结果表明,酶解液的抗氧化性随酶解时间的延长大体呈现增加的趋势,酶解36h后,还原力增加到初始的2.20倍;DPPH自由基清除力增加至初始的1.55倍;ORAC最大达到2834.67μmolTrolox/g,是等质量的谷胱甘肽的1.13倍。总氮增加到初始的1.89倍,氨氮增加到初始的2.57倍。在颜色变化方面,色深物质和色率均随着酶解时间的延长而增加。通过相关性分析发现氨氮的变化与抗氧化性之间有显著的相关性。     

马氏珍珠贝酶解液澄清工艺条件优化的研究

以珍珠贝蛋白酶解液为研究对象,考察不同澄清剂对酶解液浑浊体系浑浊度的影响.结果表明,带正电的壳聚糖与带负电和电中性的澄清剂相比,能较好脱除酶解液体系中的浑浊物质,经测定浑浊物质的表面电位呈电负性,表明壳聚糖通过静电吸附作用与浑浊物质结合达到澄清目的.壳聚糖的澄清效果在一定范围内与壳聚糖分子量无关,随脱乙酰度增大而增强,进一步证明静电作用为壳聚糖吸附的决定作用力.经澄清处理的酶解液分子量在10000Da以上的肽段明显减少,说明壳聚糖主要与分子量在10000Da以上的肽段作用而使酶解液澄清.酶解液经壳聚糖吸附澄清处理后,Q值为744.20cal/mol,低于1300cal/mol,无苦味.     

马氏珍珠贝酶解液澄清工艺条件优化的研究

以珍珠贝蛋白酶解液为研究对象,考察不同澄清剂对酶解液浑浊体系浑浊度的影响。结果表明,带正电的壳聚糖与带负电和电中性的澄清剂相比,能较好脱除酶解液体系中的浑浊物质,经测定浑浊物质的表面电位呈电负性,表明壳聚糖通过静电吸附作用与浑浊物质结合达到澄清目的。壳聚糖的澄清效果在一定范围内与壳聚糖分子量无关,随脱乙酰度增大而增强,进一步证明静电作用为壳聚糖吸附的决定作用力。经澄清处理的酶解液分子量在10000Da以上的肽段明显减少,说明壳聚糖主要与分子量在10000Da以上的肽段作用而使酶解液澄清。酶解液经壳聚糖吸附澄清处理后,Q值为744·20cal/mol,低于1300cal/mol,无苦味。      

珍珠贝肉蛋白酶解液浑浊物质组成及形成机理研究

研究导致珍珠贝肉蛋白复合蛋白酶酶解液浑浊的浑浊物质基本组成及浑浊形成机理。结果表明：浑浊物质主要组成成分为：蛋白质(占干质量54.3%)和脂肪(占26.1%);十二烷基磺酸钠- 聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)显示浑浊物蛋白主要由小分子肽构成;氨基酸分析显示其疏水氨基酸含量为42%,高于酶解液(38.8%);十二烷基磺酸钠(SDS)比胍基盐酸、尿素和氯化钠能更加有效地解聚酶解液体系的浑浊物质,粒度分析验证显示,浓度为8% 的SDS 能够有效地降低浑浊物的粒径,浑浊物质平均粒径从1954.3nm 降低至97.9nm,表明该浑浊体系是由小分子肽通过疏水相互作用形成的,而脂肪对酶解液浑浊度影响不大。     

木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白及其产物氨基酸分析研究

本文采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白研究其降解规律及酶解产物氨基酸组成。研究表明:热处理鸡肉蛋白不利于酶解;整个酶解过程中,可溶性氮、氨态氮含量呈增加趋势,但4h后增势变缓,而肽含量在水解8h达到最大值;肽分子量分布图显示大部分不溶性蛋白和分子量大于10000Da肽段在酶解4h后已经变为可溶性多肽和氨基酸,分子量在5000～10000Da间肽段酶解24h后仍大量存在,分子量在3000～5000Da间以及小于3000Da的肽占总肽量比值在整个酶解过程中呈增加趋势。与原料蛋白氨基酸组成比较表明采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白能显著提高其营养价值。     

珍珠贝水解肽的制备、氨基酸组成及抗炎活性

目的:高值化利用马氏珠母贝肉生物活性成分及马氏珠母贝肉抗炎活性肽。方法:以马氏珠母贝肉为原料,以水解度(DH)为指标,通过单因素试验和响应面试验优化珍珠贝水解肽工艺制备,并对珍珠贝水解肽的氨基酸组成和抗炎活性进行评价分析。结果:中性蛋白酶为最适酶,酶解最优工艺条件为料液比1∶1 (g/mL),酶解温度46.3℃,酶解时间1.4 h,酶底比0.3%,此时水解度为22.88%,与理论值无显著差异,回归模型可靠。酶解物中必需氨基酸含量达19.84%,疏水性氨基酸含量占比21.19%,带正电荷氨基酸含量为10.46%。在LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7抗炎模型中,珍珠贝水解肽在0～4.0 mg/mL的质量浓度范围内无细胞毒性且有利于巨噬细胞增殖。质量浓度为2.0 mg/mL时,珍珠贝水解肽可有效抑制NO的产生,以及细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的生成,NO抑制率达到70.00%,TNF-α、IL-6和IL-1β抑制率分别达到83.01%,85.04%,83.11%。结论:珍珠贝水解肽的氨基酸种类齐全,其能有效抑制RAW264.7巨噬细胞NO及细胞炎症因子TNF-α、IL-...     

陶瓷膜微滤对马氏珠母贝肉酶解液理化特性的影响

以马氏珠母贝肉蛋白酶解液为原料,考察200 nm陶瓷膜微滤处理对酶解液色值、澄清度、蛋白质含量和分子量分布的影响。结果表明,200 nm陶瓷膜微滤处理可以改善酶解液的色值和澄清度,可以完全截留分子量15000 u以上的蛋白,能够截留绝大部分分子量10000 u以上的多肽,而分子量小于5000 u的多肽在透过液中得到了有效的富集。      

珍珠贝肉蛋白饮料的研制

研究了用马氏珠母贝肉水解液制作蛋白饮料的工艺。结果表明:采用枯草杆菌中性酶和胃蛋白酶复合水解,蛋白质水解率可达66.2%。水解液经脱腥、脱色处理,再用山楂、红枣、白砂糖进行调配,制成营养丰富,具有一定保健功能的蛋白饮料。     

珍珠贝肉抗氧化肽制备工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性

以马氏珠母贝肉为研究对象,采用ABTS自由基清除率为评价指标,通过单因素试验和响应面法优化制备抗氧化肽酶解物的工艺,并对酶解物冻干粉的抗氧化能力和酪氨酸抑制能力进行研究.结果表明,珍珠贝抗氧化肽的最优酶解工艺为温度50℃,pH 7.25,时间3 h,料液比1:1,酶底比0.4％,所得酶解液的ABTS自由基清除率为98....     

乳清蛋白的酶解及其性质研究

研究了碱性蛋白酶对乳清蛋白的水解作用。通过正交试验，得出最优水解条件为：[E／S]=5％、T=60℃、pH=8．0，水解度=21．6％；离子交换法脱盐处理，脱盐率77．1％，蛋白回收率81．8％；多肽水解液在等电点附近溶解度为90％，经灭菌处理后溶解度高达94％以上。     

马氏珠母贝酶解产物品质改良工艺优化

为了得到最佳酶解液呈味特性,以马氏珠母贝酶解产物（EHP）为研究对象,以感官评价、氨基酸态氮含量和挥发性物质为指标,通过单因素试验优化品质改良工艺。结果显示,原料经漂烫处理后,制备的EHP经美拉德反应（蔗糖8%、温度100℃、30 min,p H 7）改良、酵母脱腥（添加量0.5%,40℃,60 min）和气味掩盖法（蒜、姜提取物添加量2%,比例为1∶3）等处理后得到改良后的酶解产物（I-EHP）。与改良前的酶解产物相比,改良后的酶解产物感官评分由17分上升至19.4分,氨基酸态氮由99 mg/100 g下降至74 mg/100 g,游离氨基酸总量下降了49.85%,但鲜味氨基酸增加了7.23%,与电子舌结果相符;气相色谱-质谱联用（GC-MS）结果表明,改良后的酶解产物香气物质种类由72种升至99种,与电子鼻结果相符。因此,优化后的改良工艺有助于改善酶解产物品质。     

正常马氏贝与黑壳病马氏贝的氨基酸及其美拉德反应产物的对比分析

通过对正常马氏珠母贝和黑壳病马氏殊母贝的氨基酸及其美拉德反应产物的分析比较,黑壳病对马氏贝肉氨基酸的影响不大,方差分析的单尾概率值p=0.93>0.50.黑壳病对美拉德反应产物的影响很大,正常贝桩嘲恒0 19种物质,大部分为酯类.醇类和烷烃类,黑壳病贝检测到31种物质,大部分为烷烃类和醇类,酯类物质较少,且只有2种相同物质;正常贝中呈味物质相对含量占总物质的58.8l%,黑壳病贝呈味物质占18.26%.     

酶法制取罗非鱼水解动物蛋白的工艺研究

利用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶对罗非鱼肉进行水解制备水解动物蛋白，以水解度(DH)为指标对水解过程进行分析，选取中性蛋白酶作为适宜的单酶并研究其酶法水解最适宜的工艺条件。为进一步提高水解度，进行了中性蛋白酶与酸性蛋白酶复合酶解的研究，并对双酶法水解的工艺条件进行了优化。酶解液分别采用酵母发酵、风味酶处理、粉末活性炭吸附、海藻糖处理进行初步脱色脱苦除腥研究。结果表明，海藻糖和粉末活性炭脱色脱苦除腥总体效果最佳，但两者各有侧重，活性炭在脱色方面优于海藻糖，海藻糖则在脱苦除腥方面优于活性炭。