微生物发酵法产环氧化物水解酶的研究

从土壤中筛选出一株能将模型底物缩水甘油苯基醚水解为3-苯氧基-1，2-一丙二醇的环氧化物水解酶的芽孢杆菌H-14-1．此茵培养的最佳碳源为1％的葡萄糖，最佳的氮源为1％的NH4Cl和1％牛肉膏，培养基的初始pH为6．5，培养的最佳温度和时问是30℃下培养36h，低浓度底物缩水甘油苯基醚对该酶具有诱导作用，同时培养基中金属Cu外离子对产酶有促进作用．酶学性质的试验表明，该酶的最适反应温度为35℃，最适pH为7．5，40℃以下酶具有较好的热稳定性，pH6．5～8．0范围内酶的稳定性较佳，Mg^2＋和Ca^2＋离子对酶的活性有促进作用．     

木薯醇腈酶部分酶学性质研究

对利用基因重组技术获得的木薯醇腈酶（HNL）的酶学特异性进行研究，确定了其部分酶学性质。重组木薯HNL的最适温度为50℃，最适pH值为5．5。重组木薯HNL在60℃条件下，保温30min后仍具有90％的酶活力，说明温度稳定性较好；在pH4．0～6．0的条件下，获得的相对酶活仍大于80％。     

节杆菌10137产β-呋喃果糖苷酶条件及酶学性质

研究表明，节杆茵10137产β-呋喃果糖苷酶的最佳条件为：温度为30℃，pH值7．5，接种体积分数为2％，装液体积为40mL．该条件下β-呋喃果糖苷酶的转移酶活为177．78U／mL，酶作用最适pH值为6．5，最适温度为30℃，在pH值为6．0～8．0和45℃以下稳定．Ag^ 和Cu^2 对该酶有较强烈的抑制作用，EDTA和Mg^2 对酶活也有一定影响。     

热纤梭菌纤维素酶的研究

本文对热纤梭菌ATCC27405和NCIB10682发酵所产生的纤维素酶的酶系比例，酶作用的最适温度和pH值以及产酶条件进行了研究。结果表明，在热纤梭菌的纤维素酶系中，C1酶、Cx酶和β-葡萄糖苷酶在这二菌株中的比值分别为1．0：8．4：27．9和1．0：6．4：14．7。酶作用的最适温度为55～60℃，pH值为6．1～7．7。同时发现这二菌株中的Cx酶具有较高的热稳定性。     

液体洗涤剂中复合酶稳定性的研究

研究了由碱性蛋白酶、淀粉酶通过微胶囊复配而成的复合酶在不同温度和pH下的特性，以及含水量、保护剂和表面活性剂对酶活力稳定性的影响。结果表明，该复合酶的最适反应温度为50℃，最适pH为9．0，在温度20～50℃，pH6～10，水的体积分数小于40％及各表面活性剂的洗涤浓度范围内均有良好的稳定性。     

康氏木霉发酵液提取木聚糖酶的酶学性质研究

对康氏木霉（Trichoderma Koningii）发酵产木聚糖酶的酶学性质进行了研究。结果表明；该木聚糖酶的最适反应温度为65℃，酶反应最适pH为6．0；该酶在20～60℃范围内能保持87％以上的酶活，在pH3．0-9．0范围内能保持85％以上的酶活；金属离子K^＋、Ba^2＋、Pb^2＋、Fe^2＋、Fe^3＋、Al^3＋和12mmol／L的Cu^2＋对木聚糖酶的活性有抑制作用，而Ca^2＋，Zn^2＋和4mmol／L Cu^2＋等金属离子对该酶有激活作用。     

解酯假丝酵母脂肪酶的性质及固定化

以解酯假丝酵母(Candida lipolytica)为出发菌株,采用摇瓶发酵法产酶,对发酵产的脂肪酶粗酶液进行了性质及固定化研究。该酶反应的最适温度为40℃,最适pH为7.5,在pH 6.0～8.0酶活较稳定,热稳定性较差。脂肪酶的最佳固定化条件为:载体硅藻土与脂肪酶质量比为14,固定化温度为30℃,缓冲液pH为8.0,固定化时间为2h。     

患病草鱼主要消化酶活性变化的研究

分析了健康鱼和患肠炎病草鱼的淀粉酶和蛋白酶活性。其淀粉酶最适pH值均为7．2，蛋白酶最适pH值分别为7．0和6．0；其淀粉酶最适温度分别为30℃和35℃，蛋白酶最适温度均为40℃，且患肠炎病草鱼蛋白酶和淀粉酶活性较健康鱼低，但pH值在5．7以下时，患病鱼的蛋白酶活性较健康鱼高；温度在28℃以下时，患病鱼的淀粉酶活性比健康鱼高。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

菊粉酶酵母菌株的筛选及鉴定

从菊芋周围土壤和实验室保存的菌株中分离筛选产菊粉酶的酵母菌株 ,得到产菊粉酶活力较高的酵母菌 7株。以K .Marxianus为对照 ,对其中 5株未知菌进行菌种鉴定 ,并将它们归列到属。经进一步复筛 ,选定酶活最高的酵母KI0 7,初步研究KI0 7菊粉酶的酶学性质。结果表明该酶的最适作用 pH为 4 .5、最适反应温度为 5 5℃ ,作用于菊粉、蔗糖和棉子糖 ,其I/S、I/R值分别为1/ 2 .80、1/ 2 .89,该酶为外切型菊粉酶。     

米曲霉β-半乳糖苷酶的纯化与性质研究

以40％饱和度的硫酸铵溶液去除杂蛋白，用80％饱和度的硫酸铵和75％的丙酮纯化米曲霉β-半乳糖苷酶，其比活力为147．7U／mg，回收率为38．1％。该酶最适反应温度和pH分别为50～55℃和4．0～6．0，作用于乳糖的米氏常数Km为16．7mmol／L，最大反应速度Vmax为5．56μmol／min。     

大肠杆菌生产重组极耐热木聚糖酶的诱导条件及其酶学性质

构建重组菌(JM109／pTre-99A-xylIV)作为极耐热木聚糖酶的生产菌株，研究了IPTG诱导时间、IPTG浓度、重组菌生长的不同阶段加IPTG和温度对重组菌生产极耐热木聚糖酶的影响以及它的酶学性质．结果表明，IPTG诱导8h后极耐热木聚糖酶的表达量基本维持不变，0．5～5mmol／L浓度的IPTG诱导重组菌表达极耐热木聚糖酶的效果基本相同；当重组菌生长到OD600为1．2左右时加IPTG诱导最好，诱导温度对极耐热木聚糖酶表达水平的影响不大．重组耐热木聚糖酶的最适反应pH值为5．4～5．8，重组极耐热木聚糖酶的最适反应温度大于100℃，重组极耐热木聚糖酶在pH值4．2～7．5都比较稳定，重组极耐热木聚糖酶的温度稳定性好，在90℃下保温2h后残存酶活还有90％。     

表面复合修饰磁性颗粒固定化脂肪酶效能研究

以表面复合修饰的纳米超顺磁性Fe_3O_4颗粒聚集体为载体固定胰脂肪酶,比较分析固定化脂肪酶的固载效能及酶学特性,研究了固定化及游离脂肪酶的最适温度和pH值、不同环境下的操作稳定性等应用特性及基本动力学特征。结果表明:在室温下脂肪酶质量浓度为4.01 mg/mL时具有最大的固载酶量0.72 mg/10 mg,固定化脂肪酶最适作用pH为6,最适温度35℃,与游离脂肪酶相比,对酸性环境pH的变化更敏感,但具有更广泛的温度耐受性。固定化脂肪酶催化水解Lineweaver-Burk曲线线性相关,米氏常数K_m值为9.65 g/mL,远高于游离脂肪酶,亲和性弱于游离脂肪酶。固定化脂肪酶重复催化反应7次,相对酶活力仍剩余51.6%,半衰期为6.2次,重复操作较稳定。     

海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及其酶学性质

对海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及酶学性质进行了研究．结果表明，最佳提取条件为：pH6．0的磷酸盐浸提液0．05mol／L，NaCl浓度为0．05mol／L，缓冲液体积与海参肠质量之比为4：1，硫酸铵饱和度为80％；该酶最适反应条件为：温度40℃，pH6．0；该酶在10-40℃，pH5．O～6．5酶活力稳定．Mn^2＋对酶具有一定的激活作用，Cu^2＋、Cd^2＋、Mg^2＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Bd^2＋、K^＋、Ag^＋对酶存在不同程度的抑制，其中Cu^2＋对酶的抑制作用最强．     

黑曲霉As．n.XEC-1液体发酵产β-葡萄糖苷酶条件及酶学性质研究

实验分离得到一株具有较高胞外分泌β-葡萄糖苷酶能力的黑曲霉（Aspergillus niger）菌株As．n．XEC-1,并对其液体发酵产伊葡萄糖苷酶的条件及酶学性质进行了研究．结果表明,发酵温度32℃,发酵周期7d,摇床震荡频率200r／min,装液量500mL的三角瓶中装量为60mL,接种量8％,伊葡萄糖苷酶的活性最高．经过发酵条件优化后酶活由原来的130u／mL提高到192u／mL．β-葡萄糖苷酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH值为4．6,在45℃以下时酶稳定性较好,在pH3．0～6．0之间较稳定．     

克雷伯杆菌甘油脱氢酶的分离纯化及性质

在有氧条件下，利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析和B1ue Sepharose CL-6B亲和层析提纯克雷伯杆菌胞内甘油脱氢酶．酶的纯化倍数和回收率分别为32．61倍和5．83％．通过SDS-PAGE电泳测得该酶亚基的相对分子质量约为34000．该酶最适表观反应温度和最适反应pH值分别为60℃和11．在30℃以下及pH值10～12时，该酶具有良好的稳定性．在45℃和pH值11条件下，该酶以甘油和NAD^ 为底物的米氏常数Km分别为0．75mmol／L和0．12mm01／L．甘油脱氢酶对甘油的生理反应活性最大，对其它醇类如1，2-丙二醇、乙二醇也有氧化能力．NH4^ 和Na^ 对酶有显著激活作用．巯基保护剂可明显地提高酶的活力．     

萝卜CBPs的分离及部分酶学特性研究

通过脱氨再生几丁质凝胶亲和层析和CM-纤维素离子交换层析从萝卜中分离出一组CBPs，并对CBP1和CBP2溶菌酶酶学特性作了研究。活力分析表明：CBP1和CBP2均为溶菌酶／几丁质酶双功能酶；CBP3和CBP4只有几丁质酶活力。SDS—PAGE纯度分析表明：CBP1和CBP2已达到电泳纯，相对分子质量分别为26900和24800；CBP3仍具有两个组分，CBP4则由于含量过低，在凝胶上无蛋白带。CBP1和CBP2部分酶学特性分析表明：CBP1的最适反应条件为PH5．8，55C，0．4g／L溶壁微球菌；CBP2的最适反应条件为pH6．8，45℃，0．4g／L溶壁微球菌；CBP1在pH3．4～10．6，0～55℃较稳定，CBP2在pH2．0～10．6，0～60℃较稳定。     

非专一性酶纤维素酶降解壳聚糖的研究

采用非专一性酶纤维素酶降解壳聚糖,探讨了不同条件对壳聚糖降解的影响．结果表明：在pH4．0～8．0、温度40～50℃、壳聚糖与酶比值为5：1～20：1范围内,该酶能达到较好的降解效果,在pH5．0、温度50℃、壳聚糖与酶比值为10：1的条件下,降解5min、30min、60min和240min,壳聚糖的平均相对分子质量从酶解前的5．18×10^5分别降到8．58×10^4、7．02×10^4、5．23×10^4和2．44×10^4,降解率分别为初始值的16．5％、13．5％、10．9％和4．7％．从降解情况可以得到酶降解过程中的几个特点：水解初期,溶液粘度迅速下降,说明酶以内切方式作用;提高酶浓度可加快反应速度．     

几种脂肪酶作用pH与温度比较研究

对三种不同来源的微生物脂肪酶作用ｐＨ，温度，热稳定性进行了研究。研究结果表明；脂肪酶Ａ最适ｐＨ为６左右，酶Ｂ和酶Ｃ均为７．０－８．０，脂肪酶Ａ和Ｃ最适温度为３０℃，酶Ｂ为４０℃，酶Ｂ具有较好的热稳定性。     

产黄芪甲苷酶的酶反应条件

为提高黄芪甲苷产率,研究了微生物所产的黄芪甲苷糖苷酶将3个糖基黄芪皂苷转化为黄芪甲苷的酶性质。该酶的最佳反应条件为：反应温度为35℃,底物质量浓度为30mg／mL,pH5．0,酶反应时间28h,K^＋、Na^＋对提纯酶有激活作用,Zn^2＋、Fe^3＋对酶有抑制作用,其中Fe^3＋抑制作用显著。在20～60℃、pH4．0～7．0时,酶活力相对稳定。在最佳酶反应条件下,黄芪甲苷的产率为8．7％。