丹参饮加味方对胃癌细胞SGC-7901体外生长抑制及细胞周期的实验研究

目的:探讨丹参饮加味方对胃癌细胞SGC-7901体外生长情况及细胞周期的影响。方法:采用MTT法和流式细胞仪检测丹参饮加味方不同浓度和不同作用时间对胃癌细胞抑制率和DNA含量的变化。结果:与空白对照组相比较,丹参饮加味方各浓度组细胞抑制率明显升高(P<0.05),G0/G1期细胞DNA含量明显升高(P<0.05)。结论:丹参饮加味方能抑制体外胃癌细胞SGC-7901的生长,且能将胃癌细胞周期阻滞在G0/G1期。     

莪术油对人胃腺癌SGC-7901细胞形态的影响

研究莪术油(Zedoary Turmeric Oil,ZTO)对体外培养的人胃腺癌SGC-7901细胞形态变化的影响。不同浓度的ZTO作用人胃腺癌SGC-7901细胞24 h后,通过普通光学显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞形态变化情况。光学显微镜和荧光显微镜下可见未加药物组细胞呈梭形,胞浆丰富,核质均匀,核仁呈现黄色荧光,加药组细胞体积变小,胞浆浓缩、胞膜有起泡脱落现象,胞膜崩解,部分细胞核破碎或消失,细胞核呈现绿色或亮黄色荧光。透射电镜下可见未加药组细胞呈圆形,细胞核较大,胞浆较多,细胞器丰富,加药组细胞积明显变小,核固缩,微绒毛消失,部分坏死细胞的胞核溶解,细胞器结构崩解消失。ZTO作用人胃腺癌SGC-7901细胞24 h能致见未加药组细胞胞浆较多,细胞器丰富,加药组细胞体积明显变小,坏死细胞的胞使细胞发生明显的形态改变,且具有剂量依赖性。     

丝裂霉素对胃癌细胞SGC-7901 miRNA表达谱的影响

目的分析丝裂霉素(MMC)治疗对胃癌细胞miRNA表达谱的影响,为MMC的胃癌治疗机制提供理论参考。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,根据噻唑兰(MTT)法评估MMC的作用效果和作用浓度;利用miRNA芯片技术评估MMC干预后SGC-7901的miRNA表达谱改变,并通过qRT-PCR验证差异表达miRNA。结果SGC-7901细胞生长抑制率与MMC作用浓度间存在正相关;MMC干预48 h后SGC-7901细胞有59个miRNA出现表达改变,与正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,SGC-7901胃癌细胞的miR-205*和miR-3924等11个miRNAs表达上调,而miR-498,miR-18b,miR-196b,miR-1247等22个miRNA表达下调;经MMC干预后,部分异常表达得到恢复。结论 MMC可能调控miR-498在内的59个miRNA在胃癌细胞的表达。     

加味半夏泻心汤联合化疗对胃癌术后患者生存质量的影响

目的:观察加味半夏泻心汤联合化疗对胃癌术后患者生存质量的影响。方法:将57例符合诊断标准的胃癌术后患者随机分为治疗组29例及对照组28例,两组均在术后1个月内开始化疗,治疗组在化疗基础上予以加味半夏泻心汤口服,观察两组患者临床症状、生存质量、体质量变化情况、血红蛋白含量及化疗周期完成情况。结果:治疗组胃脘痞满、恶心呕吐、嗳气反酸、胸骨后灼痛、口苦等中医证候与对照组比较改善明显(P<0.05);两组患者治疗后生存质量均有所改善,且治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组患者贫血及体质量减轻程度明显优于对照组,化疗完成率高于对照组(P<0.01)。结论:加味半夏泻心汤不仅可帮助患者顺利完成化疗,而且可以提高患者生存质量。     

PUMA 对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究外源性 p53正向细胞凋亡调控因子（p53 up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA）基因对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响。方法制备 PUMA 基因并插入 pcDNA 3．1（－）质粒,观察其转染胃癌SGC-7901细胞后 PUMA 蛋白的表达并用 MTT 法检测细胞的增殖力[实验设3组,分别为无转染空白胃癌细胞对照（SGC-7901）组,空载质粒转染胃癌细胞对照（SGC-7901-pcDNA3．1）组及重组 PUMA 质粒实验（SGC-7901-pcD-NA3．1-PUMA）组]。结果PUMA 经限制性核酸内切酶切及测序分析,与预期结果吻合。转染质粒后,SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3．1组 PUMA 表达比较差异无统计学意义（P ＞0．05,相对表达量分别为0．24±0．01和0．23±0．01）,SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组与另2组比较 PUMA 表达明显增高（P ＜0．05,相对表达量为0．39±0．01）。SGC-7901、SGC-7901-pcDNA3．1和 SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组的 A 值分别为0．43±0．04、0．46±0．04和0．32±0．03,SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组与另2组比较明显下降（均 P ＜0．01）,SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3．1组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论外源性人类 PUMA 基因对胃癌细胞增殖有抑制作用。     

藤梨根制剂对胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9和SDF-1表达的影响

目的:通过观察藤梨根制剂对胃癌细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)表达的影响,探讨藤梨根制剂的抗胃癌机制。方法:分别采用0 g·L~(-1)、15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)、30 g·L~(-1)藤梨根制剂处理胃癌SGC-7901细胞,分别处理12 h、24 h、48 h、72 h,采用噻唑蓝比色法(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验检测胃癌SGC-7901细胞增殖情况,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移能力,采用实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白印迹法检测胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1 m RNA及蛋白表达水平。结果:MTT检测结果可见,15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)、30 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,且呈现一定剂量、时间依赖性(P<0.05);细胞划痕实验结果可见,15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显降低胃癌SGC-7901细胞迁移能力,且呈现一定剂量、时间依赖性(P<0.05);15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭能力,且呈现一定剂量依赖性(P<0.05);15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1 m RNA及蛋白水平表达,且呈现一定剂量依赖性。结论:藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能为下调胃癌细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1表达。     

半夏泻心汤对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的:分析半夏泻心汤对改善糖尿病大鼠血糖水平以及胰岛素抵抗的作用,以期为糖尿病的治疗提供新方案。方法:选取Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组,模型对照组,二甲双胍组,半夏泻心汤高剂量组、中剂量组及低剂量组。除正常对照组外,其余各组均给予高脂高糖饮食及链尿佐菌素以建立糖尿病模型,并分别给予生理盐水、二甲双胍和不同剂量半夏泻心汤灌胃1周。分别于实验前后检测各组大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(insulinresistance index,IRI)。结果:实验前各组大鼠FPG和IRI均无显著差异(P>0.05)。实验结束时,正常对照组,模型对照组,二甲双胍组,半夏泻心汤高剂量组、中剂量组及低剂量组FPG分别为(4.4±0.3)mmol·L~(-1)、(21.2±3.4)mmol·L~(-1)、(12.4±4.2)mmol·L~(-1)、(11.8±3.5)mmol·L~(-1)、(15.7±3.4)mmol·L~(-1)及(19.8±3.7)mmol·L~(-1);而IRI分别为(1.1±0.1)、(5.3±0.3)、(3.1±0.2)、(3.2±0.4)、(4.7±0.3)、(5.0±0.3)。高剂量组大鼠FPG和IRI与二甲双胍组比较,无显著差异(P>0.05),但均显著高于正常对照组(P<0.05),低于其余各组(P<0.05)。结论:半夏泻心汤可有效降低糖尿病大鼠血糖水平,改善胰岛素抵抗状态。     

PUMA／ASPP1双抑癌基因对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响

目的：探讨 p53正向细胞凋亡调控因子（p53 up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA）／p53促凋亡蛋白（apoptosis stimulating protein of p53,ASPP）1融合基因及单个基因对胃癌 SGC-7901细胞的杀伤作用。方法通过脂质体（lipofectamine）2000TM 将 PUMA／ASPP1融合基因及 PUMA、ASPP1单个基因分别转染胃癌SGC-7901细胞系[实验设5组,分别为胃癌细胞无转染空白对照（SGC-7901）组,空载质粒转染细胞对照（SGC-7901-pcDNA3．1）组以及重组 ASPP1质粒转染细胞实验（SGC-7901-ASPP1）组、重组 PUMA 质粒转染细胞实验（SGC-7901-PUMA）组、重组 PUMA／ASPP1质粒转染细胞实验（SGC-7901-PUMA／ASPP1）组],再次经 G418筛选,获得稳定表达融合基因 SGC-7901-PUMA／ASPP1细胞株。通过 MTT 法及使用流式细胞仪测定各组胃癌SGC-7901系细胞的存活数（光吸收度即 A 值）及细胞周期。结果SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3．1组 A 值比较差异无统计学意义（P ＞0．05）;SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA 组和 SGC-7901-PUMA／ASPP1组 A值明显低于 SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3．1组（均 P ＜0．01）;SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA 组和SGC-7901-PUMA／ASPP13组中,SGC-7901-PUMA／ASPP1细胞组 A 值最低（P ＜0．01）。与 SGC-7901组、SGC-7901-pcDNA3．1组比较,SGC-7901-ASPP1、SGC-7901-PUMA、SGC-7901-PUMA／ASPP1组的 G1期明显增多,S 期明显减少,尤以 SGC-7901-PUMA／ASPP1组 S 期减少为甚（均 P ＜0．01）;SGC-7901-pcDNA3．1组与 SGC-7901组比较 G1期、S 期差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论双抑癌基因可有效抑制胃癌 SGC-7901系细胞增殖,双抑癌基因较单个抑癌基因具有更强的抗肿瘤作用。     

半夏泻心汤联合川乌对胃溃疡大鼠血清胃泌素水平的影响

目的:观察半夏泻心汤加减半夏反药川乌对胃溃疡大鼠血清胃泌素水平的影响。方法:SD大鼠50只,随机抽出10只作为正常组,其余大鼠禁食不禁水24 h后,以冷水浸法诱导应激性大鼠胃溃疡模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、半夏泻心汤组及半夏泻心汤加川乌组。于次日开始给药,正常组及模型组给予生理盐水10 m L·kg~(-1)灌胃,半夏泻心汤组给予半夏泻心汤水煎液10 m L·kg~(-1)灌胃,半夏泻心汤加川乌组给予半夏泻心汤10 m L·kg~(-1)及川乌水煎液10m L·kg~(-1)灌胃,连续给药7 d,记录各组大鼠摄食量及体质量变化,末次给药后,大鼠禁食12 h,眼眶采血,分离血清,以酶联免疫法检测大鼠血清胃泌素水平,分离大鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、胸腺等脏器并称质量,以精密p H试纸检测大鼠胃液p H值,并以游标卡尺测量溃疡面积和溃疡抑制率。结果:半夏泻心汤及半夏泻心汤加川乌组大鼠体质量比给药前有所升高,其中半夏泻心汤加川乌组大鼠体质量高于半夏泻心汤组;与模型组比较,半夏泻心汤组及半夏泻心汤加川乌组大鼠摄食量增加,胃液p H值升高(P<0.05),溃疡面积及溃疡抑制率降低(P<0.01);此外,半夏泻心汤加川乌组大鼠血清胃泌素水平显著升高,肾脏系数显著降低,与正常组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:半夏泻心汤加川乌可升高胃溃疡大鼠血清胃泌素水平,且对胃溃疡大鼠肾脏有一定损伤。     

君子扶正汤对胃癌大鼠细胞凋亡及血管内皮生长因子的影响

目的:探讨君子扶正汤对胃癌模型大鼠细胞凋亡及血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌的影响。方法:选取健康Wistar大鼠110只为研究对象,自由摄食、饮水,适应性饲养1周后,抽取10只生长良好的MFC胃癌小鼠的腹水,制成癌细胞悬液,接种于其余小鼠右腋皮下,建立胃癌大鼠模型。随机分为对照组和研究组,每组50只,对照组采用生理盐水灌胃,研究组采用君子扶正汤灌胃。12 d后,处死大鼠取出肿瘤组织,测定平均瘤体质量、脾指数、胸腺指数,应用酶联免疫吸附实验测定胃癌细胞上清液中VEGF的分泌情况,应用流式细胞仪检测胃癌细胞的凋亡情况。结果:研究组大鼠瘤体质量低于对照组,而脾指数、胸腺指数、SGC-7901细胞和MFC细胞凋亡率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);研究组大鼠SGC-7901细胞和MFC细胞分泌VEGF浓度分别为(158.36±20.67)ng·L~(-1)、(131.75±18.63)ng·L~(-1),均低于对照组的(205.36±23.63)ng·L~(-1)、(182.57±22.12)ng·L~(-1),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:君子扶正汤可诱导胃癌模型大鼠细胞凋亡,抑制肿瘤细胞VEGF分泌,提高胃癌模型大鼠的免疫功能。     

苦参碱逆转人胃癌细胞株SGC7901/VCR耐药性实验研究

目的研究苦参碱（Matrine）对人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR的多药耐药的逆转效应及其机制。方法以长春新碱（VCR）诱导的人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR为研究对象,MTT法研究苦参碱对体外培养的人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR细胞增殖的影响及逆转效应、用间接免疫荧光法经流式细胞仪检测MRP的表达并分析其机制。结果 MTT法显示苦参碱在0.5、1.0、2.0 mg.mL-1浓度下处理SGC7901/VCR细胞72 h后,其生长抑制率依次为10%、15%、32%,且可以逆转SGC7901/VCR对VCR的耐药,呈剂量依赖性,逆转倍数分别为9.4、13.4、24.5倍。0.5 mg.mL-1苦参碱与SGC7901/VCR细胞共同培养24 h后,SGC7901/VCR细胞的MRP表达从（36.00±4.32）%降低至（25.00±3.85）%（P〈0.01）。结论苦参碱可以体外逆转人胃癌细胞多药耐药细胞SGC7901/VCR的耐药性,其逆转机制与降低MRP的表达有关。     

骨肉瘤患者细胞侵袭相关IL-6、IL-12血清水平检测的临床意义

目的:研究血清IL-6及IL-12水平在骨肉瘤患者与健康体检者之间的差异及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测160例骨肉瘤患者及250例健康体检者的外周血血清IL-6及IL-12水平,比较两组间IL-6、IL-12水平的差异及其相关性,探讨血清IL-6及IL-12水平与骨肉瘤发病及进展的关系。结果:骨肉瘤组患者血清IL-6水平明显高于对照组(P<0.01),IL-12水平明显低于对照组(P<0.01)。在骨肉瘤患者中,处于肿瘤发病Ⅲ~Ⅳ期的患者其血清IL-12水平低于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05);合并远处转移的患者血清IL-12水平低于不发生远处转移的患者(P<0.05)。血清IL-6水平与IL-12水平无明显线性相关(P>0.05)。结论:血清IL-6及IL-12水平在骨肉瘤患者表达异常,两者在骨肉瘤的发生中可能起免疫调节作用,IL-12的低表达可能与骨肉瘤的进展相关。     

半夏泻心汤加减治疗慢性咳嗽临床研究

目的:探讨半夏泻心汤加减治疗慢性咳嗽的临床疗效。方法:将198慢性咳嗽患者按随机数字表单盲法分为治疗组100例和对照组98例。治疗组给予半夏泻心汤加减(方药组成:姜半夏10 g,干姜10 g,黄连5 g,黄芩10 g,炙甘草10 g,南沙参30g,大枣10 g)治疗;对照组给予复方磷酸可待因口服溶液治疗,两组均治疗14 d后观察疗效。结果:治疗组有效率为89.00%,对照组有效率为54.40%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:半夏泻心汤加减治疗慢性咳嗽疗效显著。