郫县豆瓣原料蚕豆中黄曲霉毒素B1的提取

郫县豆瓣中所用蚕豆是产自四川省和云南省的优质干蚕豆,经筛选、浸泡、接种、制曲等一系列加工后形成调味豆瓣酱。采用酶联免疫吸附法(ELISA),根据Box-Behnken Design软件的设计原理,检测原料蚕豆中黄曲霉毒素B1。探讨了甲醇浓度、料液比、超声波提取时间等因素对样品中黄曲霉毒素B1提取的影响,以确定检测原料蚕豆中黄曲霉毒素B1含量的最优方案。以黄曲霉毒素B1含量为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:甲醇浓度43.41%,料液比1∶5.35,超声波提取时间39.89 min是检测原料蚕豆中黄曲霉毒素B1含量的最优条件,以该优化条件检测原料蚕豆中黄曲霉毒素B1其值达到最大,为1.50μg/kg。     

响应面法优化大曲中黄曲霉毒素B1提取工艺

该研究利用单因素试验和响应面法对大曲中黄曲霉毒素B1（AFB1）的提取条件进行优化,分别考察了甲醇体积分数、超声波提取功率、提取时间和提取温度对AFB1提取效果的影响。结果表明,大曲中AFB1的最佳提取工艺为甲醇体积分数55%、超声波功率为200 W、提取时间为25 min、提取温度30 ℃。在此最优条件下,AFB1得率为2.58 μg/kg,可为大曲中AFB1的提取提供简便、准确、可靠的分析方法。     

响应面法优化成曲蚕豆瓣子中黄曲霉毒素B1的提取

郫县豆瓣中所用蚕豆是产自四川省和云南省的优质干蚕豆,经筛选、浸泡、接种、制曲等一系列加工后形成成曲蚕豆瓣子。采用酶联免疫吸附法(ELISA),根据Box-Behnken Design软件的设计原理,检测成曲蚕豆瓣子中黄曲霉毒素B1。探讨了甲醇浓度、料液比、超声波提取时间等因素对样品中黄曲霉毒素提取的影响,以确定检测生产过程中样品黄曲霉毒素含量的最优方案。以黄曲霉毒素含量为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:甲醇浓度39.66%,超声波提取时间27.70min,超声波提取功率88.97%是检测成曲蚕豆瓣子中黄曲霉毒素含量的最优条件,以该优化条件检测成曲蚕豆豆瓣子中黄曲霉毒素其值达到最大,为1.47μg/kg。     

酶联免疫法检测混合植物油中黄曲霉毒素B1的含量

目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B_1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B_1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未结合杂质。将底物加入孵育,产生蓝色产物,加入终止液终止反应蓝色产物变成黄色产物,450nm处测量吸光度。结果本方法在2h内完成混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的测定。黄曲霉毒素B_1的加标浓度在1.0～20.0μg/kg之间时的回收率为76.5%～120.2%,方法定量限为1.00μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1。     

郫县豆瓣加工过程中黄曲霉毒素B1的变化及关键控制点研究

采用酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒法测定豆瓣在加工过程中各关键环节样品（包括制曲过程、甜瓣子发酵、辣椒醅发酵和豆瓣酱的后熟期等阶段）的黄曲霉毒素B1（AFB1）含量的变化,探究影响AFB1含量的关键控制点,为以后降低豆瓣中AFB1含量的研究提供方向。测定结果表明,豆瓣制曲阶段AFB1含量变化不明显,在0～0.25 μg/kg范围内;甜瓣子发酵过程和豆瓣酱后熟阶段AFB1含量呈显著上升趋势,从甜瓣子发酵初期的0.175 μg/kg增加至1.09 μg/kg,最后到成熟豆瓣酱的2.63 μg/kg;辣椒醅阶段AFB1含量总体保持稳定,为0.80 μg/kg。由于AFB1含量从制曲后期到豆瓣酱的成熟总体呈上升趋势,且甜瓣子的发酵阶段与豆瓣酱的后熟期是控制豆瓣AFB1含量的关键点,应加强对相关操作及其环境的控制与管理。     

降解黄曲霉毒素B1土曲霉发酵工艺优化的研究

对黄曲霉毒素B_1(Aflatoxin B_1,AFB_1)降解菌土曲霉(Aspergillusterreus)HNGD-TM15降解AFB_1发酵工艺进行优化。在单因素实验基础上,运用Box-Behnken设计原理,对降解AFB_1影响显著的HNGD-TM15发酵工艺参数碳源(葡萄糖)、p H和温度设计响应面实验,结果表明:模型(P=0.002 8)在1%水平上具有极显著性,失拟项不显著(P=0.063 50.05),其R~2=0.929 9,R~2_(Adj)=0.839 9,说明该模型拟合程度良好,可以模拟92.99%的AFB_1降解率变化,其中p H对AFB_1降解率的影响最大。确定HNGD-TM15发酵主要参数:葡萄糖0.7%,发酵液起始p H为3.0,发酵温度为34℃,接种量为0.006%的菌悬液,装液量为100 m L/250 m L,发酵时间为72 h。优化后AFB_1降解率从接种量为5%的98.30%提高到接种量为0.006%的99.94%。     

常压等离子体降解黄曲霉毒素B1的效果研究

采用常压等离子体对乙腈中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)进行降解。利用单因素实验,考察了放电间距、处理电压、放电时间以及AFB_1初始浓度对AFB_1降解率的影响,在此基础上进行了BoxBehnken的实验设计,选取AFB_1降解率作为响应值,优化了AFB_1的降解条件。结果表明:各因素对AFB_1降解率的影响大小依次为处理电压放电时间AFB_1初始浓度。常压等离子降解AFB_1的最佳工艺条件为处理电压170 V、放电时间236 s、AFB_1初始浓度5 mg/L、放电间距2 cm。AFB_1的降解率高达92.45%,与预测值93.94%相接近,偏差为1.49%。     

响应面优化微波结合酶法制备米糠多肽过程中黄曲霉毒素B1的降解工艺

研究微波结合酶解法组合技术对米糠多肽制备过程中黄曲霉毒素B_1(Aflatoxin B_1,AFB_1)的影响,为染毒米糠的脱毒提供新途径。在单因素试验的基础上,将料液比(X1)、微波时间(X2)、碱性蛋白酶酶解时间(X3)、酶解p H(X4)因素进行组合,应用Design Expert软件和Box-Behnken中心组合试验方法对AFB1降解条件进行了优化,测定米糠多肽AFB1的降解量。初始米糠中AFB1浓度为100.14μg/kg,运用响应面分析确定了其最佳工艺条件:微波功率750 W、微波时间9.56 min;碱性蛋白酶酶解温度50℃、酶解p H 10.74、酶解时间1.57 h、加酶量0.4%;料液比1:9.96,在此条件下,米糠中AFB1的降解率为98.68%,所制备的米糠多肽残留浓度为1.85μg/kg,符合国家标准(≤10μg/kg)。通过响应面优化微波结合酶法制备多肽工艺发挥协同作用,能有效降低米糠多肽AFB1含量满足国家标准限量要求。微波结合酶解处理条件温和,降解效率高、操作方便,可推广应用于受黄曲霉毒素的降解的粮油制备中。     

降黄曲霉毒素B1 菌株发酵条件的研究

对黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌株NMO-3 进行发酵培养基和培养条件优化,以期提高AFB1 降解率。方法：研究不同碳源、氮源、金属离子对AFB1 降解率的影响,最后选出最佳碳源、氮源和金属离子,通过正交回归试验,最后得出三者配方比。培养条件研究主要包括：初始pH 值、接种量、温度、种龄和降解时间等因素。结果：最终确定优化发酵培养基配方：果糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、MgCl2 0.05mmol/L、其他发酵条件：起始pH 值为7.5、装液量25ml/300ml、接种量5%(V/V)、种子液培养时间为12h、控制降解温度为35℃、摇床转速140r/min、降解时间为72h。结论：经培养基成分和发酵参数的优化,AFB1 的降解率达到94.29%。     

粮油中黄曲霉毒素B1的监测

利用简单的仪器设备监测粮油中的黄曲霉毒素B1，此法直接、快速，利于推广普及。     

黄曲霉毒素B1的检测方法

随着农业市场的不断发展, 伴随产生了一系列的食品安全质量问题, 尤其是毒性最强的黄曲霉毒素B1所引起的安全问题。粮食安全问题是一个不容小觑的重大问题, 现在也越来越受到老百姓的重视。本文介绍了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)及其毒性危害; 综述了几种黄曲霉毒素B1的检测方法, 分别包括: 薄层层析法(thin–layer chromatography, TLC)、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)、金标试纸法(gold labeled immunochromatographic assay, GICA)等, 并对这几种方法进行了分析和比较, 以期为黄曲霉毒素B1的监测提供参考。     

低温法检测菜籽油黄曲霉毒素B1的研究

按照GB 5009. 22-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》第二法检测菜籽油中黄曲霉毒素B1时存在杂峰较多、无法准确定性及定量等问题,本法在GB 5009. 22-2016第二法的基础上优化了萃取溶剂,并通过降低萃取溶剂温度来降低菜籽油中杂质溶解度的方法,达到了理想的净化效果。在样品中加入已放入4℃冰箱冷藏30 min的甲醇-乙腈(体积比70∶30),振荡后取上清液氮吹至近干并衍生,衍生液氮吹至近干后利用初始流动相溶解并注入高效液相色谱仪检测。采用Waters XBridge BEH C18色谱柱(4. 6 mm×100 mm,2. 5μm),以蒸馏水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在流速0. 8 m L/min、柱温40℃、进样量10μL条件下,进行定性和定量分析。结果表明:方法线性范围为0. 1~4. 0 ng/m L,定量限为0. 1μg/kg,回收率为78. 0%~90. 4%,相对标准偏差为1. 61%~4. 15%。与国标方法相比,本方法可有效去除菜籽油中杂质,能准确地进行定性和定量,回收率和准确度均较好,可应用于菜籽油中黄曲霉毒素B1的日常检测。     

Decontamination of aflatoxin B1‐contaminated corn by ammonium persulphate during fermentation

The decontamination of aflatoxin B₁(AFB₁)‐contaminated corn, which is required if the corn is to be suitable for alternative use, by an ammoniation–fermentation integrated process was studied. This process could be used for the production of fuel ethanol from aflatoxin‐containing corn. Different concentrations (0.25, 0.50, 1.00, 1.5 and 2.0% w/w) of ammonium persulphate were tested in the detoxification of AFB₁‐contaminated corn during fermentation. In order to increase the decontamination of corn, 0.5 and 1.0% (w/w) azodicarbonamide, benzoyl peroxide and hydrogen peroxide were tested. Peroxides were added at three different stages of the fermentation process: liquefaction, saccharification and fermentation. Levels of AFB₁ and ethanol were determined after each fermentation process. Treated corn was tested for mutagenic potential using the Ames test with TA100 tester strain and pure AFB₁ as positive control. Addition of 2.0% (w/w) ammonium persulphate caused the highest level of decontamination without affecting ethanol production. Addition of peroxides did not significantly (P < 0.05) increase ethanol production or significantly (P < 0.05) improve the decontamination process. The best processes for decontamination of corn and for ethanol production included the addition of 2.0% (w/w) ammonium persulphate for both and of 1.0 and 0.5% (w/w) benzoyl peroxide respectively. All treated corn samples showed no mutagenic potential. Possible industrial use of these processes is discussed. © 2002 Society of Chemical Industry     

巨大芽孢杆菌固态发酵法去除黄曲霉毒素B1工艺对花生粕品质的影响

以花生粕为原料,选取花生粕中蛋白质、氨基酸、总黄酮、总糖、灰分几个关键营养指标为检测对象,研究巨大芽孢杆菌发酵花生粕去除黄曲霉毒素B1(AFB1)的最优条件(料水比1∶1.1,种子液培养时间12 h,接种量10％,发酵温度35.90℃,发酵时间64.32 h)下,发酵花生粕营养成分含量的变化.结果表明:发酵前后除总糖被菌体细胞利用有所减少外,其他几个成分含量都有所提升或者基本不变,特别是总蛋白质和总氨基酸,分别提高了25.16％和5.08％;巨大芽孢杆菌固态发酵去除花生粕中AFB1工艺基本不会造成花生粕营养价值的降低,而且对花生粕品质无影响.     

黄曲霉毒素B1降解菌的筛选鉴定及发酵条件优化

该研究采用香豆素筛选模型,从酒醅、大曲、榨菜、酸豆角等样品中分离筛选降解黄曲霉素B1（AFB1）菌株,通过形态学观察及分子生物学技术对筛选菌株进行鉴定,并以黄曲霉毒素B1降解率为评价指标,采用单因素及正交试验对筛选菌株的发酵条件进行优化。结果表明,共初筛出23株可利用香豆素菌株;采用高效液相色谱（HPLC）法复筛出1株AFB1高效降解菌,其降解率最高,为86.22%,菌株编号为HB022。菌株HB022被鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,其最优发酵条件为发酵温度37 ℃、初始pH 7.2、接种量5%、发酵时间72 h。在此优化条件下,AFB1的降解率为91.13%。     

高效液相色谱法测定粮谷中黄曲霉毒素B1的研究

建立了用三氯甲烷提取、硅胶小柱净化、三氟乙酸衍生,再以荧光检测器来测定粮谷中黄曲霉毒素B1的高效液相色谱方法.试验证明,该方法安全限量标准最低可达0.4 μg/kg,线性在2～50 μg/kg良好,平均回收率较高,具有准确度高、精密度好、安全限量低的特点.