长双歧杆菌增菌培养基的优化

针 对 长 双 歧 杆 菌 的 营 养 需 要 ,分 别 采 用 单 因 素 试 验 和 正 交 试 验 , 优 化 培 养 基 成 分 及 用 量 , 得 出 最 佳 增 菌 培 养 基 (LPT )配 比 :大 豆 蛋 白 胨 1.67%,酪 蛋 白 胨 0.83%,乳 糖 1.0%,酵 母 浸出 粉 0.5%,低聚 糖 0.5%,肝浸 液 15%。最 后 测 定 长 双 歧 杆 菌 在 增 菌 培 养 基 中 的 生 长 曲 线 , 并 同 时 测 定 pH 和 吸光 值 的变 化,确定 增菌 培 养终 止时 间为 12h,此 时 菌 数 可 达 1.3×10cfu /m L。 9      

青春双歧杆菌增菌培养基的优化

针对青春双歧杆菌的营养需要 ,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量。得出最佳基础培养基配比是 :大豆蛋白胨 1 2 % ,胰蛋白胨 0 6 % ,酪蛋白水解物 0 6 % ,牛肉浸膏 0 6 % ,葡萄糖 1 % ,低聚糖 0 5 % ,乳糖 0 5 % ,酵母浸出粉 0 7%。最佳增殖因子添加量是 :胡萝卜汁 1 5 % ,番茄汁 5 % ,肝浸液 1 5 % ,胱氨酸 0 0 5 %。最后使用优化出的增菌培养基配比测定生长曲线 ,同时测定 pH和滴定酸度的变化 ,确定增菌培养终止时间为 1 2h ,通过平板菌落计数 ,此时菌数可达 2 9× 1 0 9cfu/mL。     

长双歧杆菌增菌培养基的优化

针 对 长 双 歧 杆 菌 的 营 养 需 要 ,分 别 采 用 单 因 素 试 验 和 正 交 试 验 , 优 化 培 养 基 成 分 及 用 量 , 得 出 最 佳 增 菌 培 养 基 (LPT )配 比 :大 豆 蛋 白 胨 1.67%,酪 蛋 白 胨 0.83%,乳 糖 1.0%,酵 母 浸出 粉 0.5%,低聚 糖 0.5%,肝浸 液 15%。最 后 测 定 长 双 歧 杆 菌 在 增 菌 培 养 基 中 的 生 长 曲 线 , 并 同 时 测 定 pH 和 吸光 值 的变 化,确定 增菌 培 养终 止时 间为 12h,此 时 菌 数 可 达 1.3×10cfu /m L。 9     

优化两歧双歧杆菌培养基的增菌研究

针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交实验设计优化增殖培养基。结果表明,酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素。最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%(均为质量分数)。用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH值的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010mL-1。     

婴儿双歧杆菌发酵培养基组成的优化

针对婴儿双歧杆菌的营养需要,分别采用单因素试验和正交试验,优化培养基成分及用量。得出最佳发酵培养基(CPT)配比:大豆蛋白胨1.67%,酪蛋白胨0.83%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%,低聚糖0.7%,胡萝卜汁15%。最后测定婴儿双歧杆菌在发酵培养基中的生长曲线,并同时测定pH和吸光值的变化,确定发酵终止时间为12h,此时菌数可达2.18×109cfu/ml。     

双歧杆菌麦芽复合汁增菌培养基优选的研究

选择麦芽汁为主要原料，以两歧双歧杆菌Bbm和长双歧杆菌Blm为实验菌株，研究了麦芽汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响，进一步利用正交试验优化筛选出Bbm菌麦芽复合汁增菌培养基；利用优选的麦芽复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明：大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖（p〈0．01），而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长，又有缓冲培养基pH值的作用；利用L9（3^4）筛选出Bbm的麦芽复合汁增菌培养基的最佳配比为：在10°麦芽汁中添加0．3％大豆蛋白胨，0．6％牛肉浸膏，0．5％酵母膏，0．4％玉米浆，0．2％磷酸氢二钾，在麦芽复合汁增菌培养基中，经37℃培养12h，Bbm活菌数3．84×109CFU/ml，Blm活菌数达到3．90×109CFU／ml，较对照麦芽汁培养基的活菌数分别提高了8．17倍和8．14倍，较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低1000元/吨。     

双歧杆菌菊芋复合汁增菌培养基的优化筛选

以菊芋为主要原料,以两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidus,Bbm)和长双歧杆菌(Bifidobacteriu.longum,Blm)为试验菌株,研究了菊芋汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm细胞生长量的影响.利用正交试验优化筛选出Bbm菊芋复合汁增菌培养基;利用优选的菊芋复合汁增菌培养基对Blm进行验证性增菌试验.结果表明大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进Bbm的细胞增殖(P＜0.01),而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长,又有缓冲培养基pH值的作用;利用L934筛选出Bbm菊芋复合汁增菌培养基的最佳配比是在10 Brix菊芋汁中添加0.6%大豆蛋白胨、0.9%牛肉浸膏、0.3%酵母膏、0.4%玉米浆、0.2%磷酸氢二钾.在菊芋复合汁增菌培养基中,经37℃培养12 h,Bbm活菌数6.80×109 cfu/mL,Blm活菌数6.65×109 cfu/mL,较时照菊芋汁培养基的活菌数分别提高了13.5倍和7.63倍;较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低了2770元/t.     

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。      

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。     

冷冻干燥对婴儿双歧杆菌损伤作用的研究

冷冻干燥是乳酸菌和益生菌干燥的主要方式,冷冻和干燥两个过程都会影响菌体细胞的存活性,本研究主要目的是探讨冷冻和干燥过程对婴儿双歧杆菌的损伤作用。采用透射电镜观察菌体在冷冻干燥过程中的微结构,通过溢出胞外的β-半乳糖苷酶活性评价冷冻和干燥后细胞膜通透性的变化,通过测定冷冻和干燥后胞内Na+和K+浓度的变化研究离子效应的影响。研究结果表明：婴儿双歧杆菌在冷冻干燥过程中的形态、细胞膜通透性和胞内离子浓度变化程度随冻结时间的延长而加剧,冷冻干燥过程使菌体出现细胞质浓缩、质壁分离、菌体皱缩以及破损现象,使细胞膜通透性增大,使胞内Na+、K+ 浓度显著下降,并伴随比例失调。     

婴儿双歧杆菌的耐氧驯化及应用特性研究

研究婴儿双歧杆菌的生长促进剂,并对活化菌种进行耐氧驯化培养,探讨婴儿双歧杆菌在搅拌花生酸奶加工中的应用。结果表明:酵母浸出液对婴儿双歧杆菌活化影响最大,酪蛋白胨次之,磷酸氢二钾最小,三者最佳水平组合:酵母浸出液0.4%,酪蛋白胨0.2%,磷酸氢二钾0.1%。菌种被连续活化三代后凝乳时间稳定至3.5h。通过对4种因素婴儿双歧杆菌生长的影响研究发现:鲜牛奶与花生乳配比的影响最大,其次是蔗糖,再次是接种量,最后是葡萄糖。当鲜牛奶与花生乳配比1∶1,蔗糖6%,葡萄糖2%,接种量5%,婴儿双歧杆菌达到最佳生长状态,活菌数达到2.5×109 CFU/mL。     

婴儿双歧杆菌对致病菌生长抑制作用的研究

通过婴儿双歧杆菌发酵液对几种致病菌生长抑制作用的研究，得出婴儿双歧杆菌对金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌，甲型付伤寒杆菌，乙型付伤寒杆菌，埃希氏大肠杆菌、白色念珠菌，变形杆菌、福氏痢疾菌的生长繁殖有明显的抑制作用，其抑制机理是有机酸和抗菌类物质。婴儿双歧杆菌对白色念珠生长抑制的最低浓度为１０＾５ｃｆｕ／ｍｌ。     

双歧杆菌对Treg/Th17细胞平衡及中国对虾蛋白致敏性的影响

目的通过体内实验研究婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis 13.085)和雷帕霉素对中国对虾原肌球蛋白致敏BALB/c小鼠过敏反应的治疗作用,从Treg/Th17细胞平衡及相关细胞因子角度探讨其缓解过敏的免疫调节作用机制。方法将中国对虾原肌球蛋白和弗氏佐剂混合液腹腔注射诱发BALB/c小鼠致敏,建立动物过敏模型。将实验小鼠随机分为正常对照组、致敏对照组、双歧杆菌治疗组、雷帕霉素治疗组。观察分析小鼠过敏症状,采用ELISA测定小鼠血清中特异性IgE、IgG2a的含量,采用流式细胞术测定脾脏T淋巴细胞亚群(Treg、Th17)数量,采用荧光定量PCR测定脾脏中Treg型和Th17型细胞因子和转录因子的表达量。结果第56天实验周期结束后结果发现,相比于致敏对照组,双歧杆菌和雷帕霉素治疗组小鼠过敏症状有明显的缓解,血清中特异性IgE显著降低(P0.05),脾脏Treg/Th17比值显著升高(P0.05),Th17型细胞因子IL-17A m RNA表达水平显著降低,Treg型细胞因子Foxp3 m RNA表达水平显著升高。此外,不同剂量的雷帕霉素治疗组缓解过敏反应存在剂量差异性。结论双歧杆菌13.085和雷帕霉素能有效缓解小鼠过敏症状,其作用可能通过平衡Treg/Th17细胞亚群数量,促进Treg型细胞因子表达而抑制Th17型细胞因子分泌有关。     

双歧杆菌保藏性能研究

本文研究4种保护剂对双歧杆菌液态制剂的冷藏和冷冻过程中存活率的影响。结果表明，甘油对双枝杆菌的保护效果最好，其中浓度为80%的甘油能使双歧杆菌液态制剂在4℃冷藏时保持活力25d，在-20℃冷冻时，保存60d仅下降3个数量级。     

谷氨酸棒杆菌生产L赖氨酸的培养优化和产酸特性研究

在5L发酵罐中利用优化培养基进行了谷氨酸棒杆菌连续培养生产L-赖氨酸的研究。相同发酵条件下,优化培养基和原始培养基中的菌种生物量分别达到8.0g/L和9.3g/L,最快生长速率分别为0.53g/L/h和0.72g/L/h。发酵48h后,优化培养基中的L-赖氨酸浓度、产酸总量和糖酸转化率分别为20.8g/100mL、588.2g和0.713g酸/g糖,和原始培养基相比分别提高了6.1%、2.3%和12.2%。优化培养基显著降低了L-赖氨酸生产的原料消耗,提高了生产效率。      

耐氧两歧双歧杆菌高密度培养的研究

讨论了耐氧两歧双歧杆菌在小瓶培养、发酵罐间歇培养、及流加培养的生长及代谢特性,探讨了其高密度培养的途径。在发酵罐流加培养试验中,通过流加碱和流加基质培养,使双歧杆菌生长的OD600值达到1.67,菌体浓度约为6.3×1010个/mL,乳酸浓度达到620mg/100mL,并使双歧杆菌生长的周期明显延长。