脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速分离纯化及其抗体制备

采用高速逆流色谱法结合高效液相色谱法从禾谷镰刀菌固体发酵产物中分离纯化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)。先用高速逆流色谱在以乙酸乙酯-水(1∶1,体积比)为两相溶剂系统、温度为25℃、主机转速为890r·min-1、流速为1.0mL·min-1、检测波长为254nm的条件下进行分离,再用高效液相色谱进一步分离纯化,最终从300g大米发酵培养物中得到了8mg DON,纯度为97.7%。将纯化的DON用于DON人工抗原制备,基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱分析表明,人工抗原制备成功;免疫动物后,研制出了高效价的多克隆抗体。本研究建立的色谱方法操作简单,分离效果较好,纯化的DON可以用于抗体的制备。     

适乐时悬浮种衣剂防治冬小麦雪腐雪霉病

冬小麦雪腐雪霉病是伊犁地区冬小麦苗期主要病害 ,发病轻则分蘖死亡 ,严重减产 ,重则造成全田毁灭 ,以致翻耕改种。多年来一直没有理想的药剂能够解决这一难题。 2 0 0 0年冬播前 ,受瑞士先正达公司所托 ,使用适乐时悬浮种衣剂以验证其防治雪腐雪霉病和促进幼苗生长、增加产量等作用 ,为大面积生产应用提供理论依据。1　试验材料及方法1.1　供试品种伊农 16号1.2　供试药剂2 .5 %适乐时悬浮种衣剂 (有效成分 :氟咯菌腈 ,由瑞士先正达公司提供 )3%敌萎丹悬浮种衣剂 (有效成分 :恶醚唑ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ ,由瑞士先正达公司提供 )5 …     

雪腐镰刀菌产橙皮苷酶的特性研究和条件优化

为提高雪腐镰刀菌6238产橙皮苷酶的效率,缩短生长周期,分析了其生长与产酶的生理特性,确定橙皮苷酶是次级代谢产物,生产周期是72 h;研究了诱导剂橙皮苷对雪腐镰刀菌6238产酶的影响,结果表明,在发酵初始阶段加入橙皮苷可保持较高酶活;随后,对雪腐镰刀菌6238产橙皮苷酶进行条件优化,得到最优培养条件:葡萄糖40 g?L?1、酵母提取物5 g?L?1、接种量4%、磷酸氢二钾2 g?L?1,培养温度30℃,起始p H 6.5。在上述培养条件下,单位发酵液平均酶活力达到了1305 U?m L?1,是优化前的2.2倍。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫分析核心试剂特异性单克隆抗体的研制与特性研究

采用1,1’-羰基二咪唑(CDI)活化法成功将脱氧雪腐镰刀菌烯醇分子上C-3和C-15位羟基与载体蛋白赖氨酸的氨基共价偶联得到免疫原DON-BSA和包被原DON-OVA,并用三硝基苯磺酸法对合成结果进行鉴定。以人工抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/O鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和多次亚克隆,得到了1株能稳定分泌脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体的单克隆细胞株1D5,并制备单克隆抗体腹水。经检测该抗体亚型为IgG1,亲和力常数Ka为8.33×107L/mol,交叉反应的试验结果显示该抗体与其他真菌毒素无交叉反应率,稳定性良好,为粮油食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫快速检测技术建立及产品研发提供了关键试剂材料。     

白腐菌生物流化床处理PCP废水研究

采用白腐菌生物流化床对PCP模拟废水和含PCP造纸废水进行了连续试验.结果表明当模拟废水中PCP浓度为5mg/L时(即PCP负荷15 g·m-3·d-1),PCP去除效率大于97%,但随着PCP浓度不断增大,处理效率呈下降趋势,PCP浓度大于20 mg/L时,对白腐菌产生抑制.C与N摩尔比对PCP的降解有重要影响,在高碳低氮条件下,控制合适的C与N摩尔比(＞11)可以将PCP有效降解.白腐菌生物流化床处理含PCP的造纸废水时,在CODCr负荷为5.7 kg·m-3·d-1,PCP负荷28.6 g·m-3·d-1的条件下,PCP去除率55%,COD去除率74%,易降解基质有利于提高PCP的去除率.白腐菌处理出水再经活性污泥法处理,则出水PCP浓度为0.1 mg/L,COD平均为140mg/L.     

高效液相色谱法用于小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测与去除的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是小麦中常见的一种真菌毒素,影响食品安全。本文选用8种市售小麦进行Na_2CO_3溶液浸泡去除DON,采用高效液相色谱对小麦粉中DON含量进行检测对比分析。结果表明在100～5000 ng/mL浓度范围内,DON浓度和其对应峰面积呈良好线性关系,线性回归方程为y=77.682x-1505.7,R~2=0.9999;8种小麦粉中有6种DON含量高于1000μg/kg,经Na_2CO_3溶液浸泡去除后,均降低至国家标准以下,原小麦粉中DON含量越低其去除效果越好,最高去除率可达76.2%,平均去除率为71.5%。     

培养条件对白腐菌合成脂肪酶的影响

以橄榄油为碳源用白腐菌QB1(SarcodonasparatusQB1)合成脂肪酶,当碳源浓度为5mg/mL时,在培养基初始pH值为5.5,28℃条件下培养10d,脂肪酶活力为0.65U/mL,菌体干密度为3.05mg/mL,脂肪酶活力在培养基初始pH值为5.0～5.5时最高。当酶反应环境pH值分别为4.0～4.5和6.0～6.5时,脂肪酶相对酶活力分别下降为38%～60%和57%～63%。     

雪腐核盘菌的ITS序列分析

首次对来自日本和我国神农架且不同寄主的3株雪腐核盘菌（Sclerotinia nivalis Saito）的核糖体基因转录间隔区（ITS）DNA序列进行了测定,并与GenBank中的同源序列进行比较,没有发现序列完全相同的真菌种类,已将雪腐核盘菌中国分离物Let-19的ITS序列在GenBank进行了注册,登陆号为DQ234388。通过软件DNAStar比对分析,发现菌株Let-19与日本的2个雪腐核盘菌菌株AGT和C-1-2的ITS序列没有差异性。说明不同地域、不同寄主来源的雪腐核盘菌的ITS序列非常保守。     

鼠李糖脂强化白腐菌处理制浆黑液效果研究

研究了吐温、鼠李糖脂、硫酸铜和乙醇等不同添加物对白腐菌处理黑液效果的强化作用,发现鼠李糖脂能够较好地强化修复效果,当其质量浓度在50~60 mg/L时处理效果最佳。将产生鼠李糖脂的铜绿假单胞菌与白腐菌共同接种黑液后培养,可将COD降低44%。本研究为黑液的微生物处理提供了新的思路。     

白腐菌降解焦化废水的研究

介绍了白腐菌在焦化废水中的驯化生长和产酶条件优化,考察了白腐菌及其酶类对焦化废水的降解能力,结果表明:白腐菌在培养条件下能够产生白腐菌漆酶,是降解焦化废水中的多环芳香化合物的主要活性成分。经过白腐菌和活性污泥混合,得到较好的处理效果:实验时间内COD去除率达到89%,NH3-N达到88%,较单纯活性污泥效率高。     

固定化白腐菌对酸性黑ATT脱色的研究

将白腐菌吸附固定在改性的植物材料葵花盘、葵花秸秆上,对酸性黑ATT进行脱色,对比筛选较优载体。分别考察载体、温度、摇床转速、初始pH、浓度等因素对酸性黑ATT脱色率的影响。结果表明:葵花秸秆固定化白腐菌对酸性黑ATT有较好的脱色效果。在pH为5.0、22℃、150 r/min、100 mg/L的最适条件下,25 h脱色率可达94.41%,连续脱色5次后脱色率仍能保持在89%以上。     

真菌性角膜炎常见致病菌株——镰刀菌的AFLP指纹图谱分析

目的采用AFLP对镰刀菌进行基因分型。方法对镰刀菌分离、纯化、重新鉴定后,用CTAB法提取其DNA。经EcoRI和MseI双酶切,对酶切片段进行预扩增和选择性扩增。扩增后的产物经6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染成像。结果用20株镰刀菌作材料,筛选出3对多态性较高、带型质量较好的AFLP引物,分别是E-TCM-CAA,E-TAM-CTT,E-TAM-CAC。各菌株间的相似率为74%～90%,在SM=0.74(74%)的相似性水平上,镰刀菌明显地分为2种。14株茄病镰刀菌种内可分为9型,6株串珠镰刀菌种内可分为4型。结论AFLP可用于真菌性角膜炎常见致病菌株即镰刀菌的基因分型。     

小麦粉中呕吐毒素测定方法优化研究

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱法(HPLC)检测小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的分析方法。本文优化了样品的前处理,定性并消除了测定过程干扰组分,建立了准确性高、再现性好的小麦粉中呕吐毒素含量的测定方法,色谱峰面积与呕吐毒素质量浓度呈线性关系,方法检出限为50μg/kg,试样的平均回收率为85.0%~90.0%,测定值的相对标准偏差均小于5.0%,满足了国标中对脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测要求。     

粉末固定化白腐菌处理焦化废水的研究

以木屑为载体固定化白腐菌对焦化废水进行处理,其对COD的去除率明显高于白腐菌菌丝和木屑的混合物.研究表明,白腐菌对焦化废水有较好的处理效果,3 d COD的去除率可达84.89%.固定化的白腐菌降解焦化废水的适宜pH为5.5-7.0,最佳pH为6.5;适宜温度为25~35℃,最佳温度为30℃.     

产长春新碱尖孢镰刀菌发酵条件优化研究

采用单因素实验和响应面实验对实验室筛选且通过复合诱变的尖孢镰刀菌FN-06-01在10 L发酵罐中发酵产长春新碱(VCR)的工艺进行优化。确定最优发酵条件为:发酵温度28.0℃、初始pH值6.0、通气量5.0 L·min~(-1)、接种量7.5%,在此条件下,VCR产量达到24.61 mg·L~(-1),较优化前提高了51.54%。该研究所构模型可显著提高尖孢镰刀菌FN-06-01发酵产VCR量,为VCR规模化生产提供了理论和实践基础。     

超高效液相色谱-串联质谱检测桃中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺残留和消解

本文建立了桃中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLCMS/MS)检测方法,进行田间试验,明确了吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在桃上的消解动态。结果表明,在添加水平0.01~2 mg/kg范围内,吡唑醚菌酯在桃中的平均回收率为89.8%~96.9%,相对标准偏差为0.8%~5.4%;啶酰菌胺的平均回收率为81.1%~100.5%,相对标准偏差为3.3%~12.1%;定量限均为0.01 mg/kg。吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在桃中的消解动态均符合一级动力学方程,消解半衰期分别为7.2~15.8 d和7.0~11.8 d。     

南方根结线虫生防镰刀菌菌株筛选

采用镰刀菌处理南方根结线虫2龄幼虫(J2)和卵以评价生防菌对南方根结线虫的杀线活性.从东北和华北等地区采集土样分离获得452株镰刀菌,采用南方根结线虫生防因子筛选体系进行活性菌株的筛选,获得14株对该线虫有高杀线活性的镰刀菌.菌株snef242和snef332的菌悬液对南方根结线虫J2有较强的杀死作用,校正死亡率达91.99%、91.35%;菌株Snef332、snef242和snef143的发酵液对卵囊孵化相对抑制率分别达86.61%、86.19%、85.36%;菌株snef109、snef332、Snef408和snef143的发酵液对南方根结线虫J2活性均有不同程度的抑制作用,其中菌株Snef109对线虫的抑制率最高,可达94.7%.经继代培养结果表明:菌株Snef332杀线能力遗传稳定性较很高,在南方根结线虫生防领域具有较大潜力,适宜作为南方根结线虫的生防因子加以开发利用.     

白腐菌处理废水的影响因素及发展趋势

白腐菌是一种能引起木材腐朽的担子真菌 ,自然界中木材的分解主要靠白腐菌的作用。该菌突出的优点在于 :不受污染物溶解性和毒性的限制 ;抗冲击负荷能力强 ;营养要求不高 ;催化氧化反应时能氧化分解多种有机物。正因为如此 ,白腐菌作为一种新型的处理技术已受到更多研究者的重视和研究。为更好地推动该技术的深入开展 ,本文讨论了白腐菌处理废水的影响因素及发展趋势。1　白腐菌降解机理白腐菌的降解机理还没统一的认识 ,研究的人也较多 ,归纳起来一般认为有两个过程 ,一个是胞内过程 ,主要产生降解有机物质所需的酶 ,如木质素过氧化酶、锰…     

白腐菌对纸张上色废水脱色降解的影响因素研究

考察白腐菌摇床培养对纸张上色废水脱色降解的影响因素。实验结果表明,白腐菌对纸张上色废水有较强的脱色能力,其最佳脱色条件为培养液营养比20%、pH值5、温度25℃-30℃、初始生物量2 g、摇床转速为120 r/min。在脱色处理24 h时,纸张上色废水的脱色率可达到85.46%。