超微粉碎对荷叶黄酮类物质醇提工艺的影响

试验以经过超微粉碎后的荷叶为原料,研究了超微粉碎对荷叶中黄酮类物质提取的影响。结果表明:在荷叶超微粉碎粒度D50为72.5μm,提取温度为80℃,提取液乙醇体积分数为70%,料液比(g∶mL)为1∶30的条件下回流提取25min,荷叶黄酮的提取率最高为6.71%,提取效率为98.24%。     

荷叶生物碱的提取工艺优化及其清除羟基自由基能力的测定

研究了荷叶中生物碱的提取优化工艺及其抗氧化效果.采用正交实验设计,考察提取温度、提取时间、料液比和酸水pH对生物碱提取效果的影响.结果表明,最佳提取工艺为酸水pH2.5,提取温度80℃、提取时间2h和料液比1∶40;荷叶碱在5.20～26.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,r=0.994,荷叶中荷叶碱的含量占荷叶生物碱水提物含量的1.752%;浓度为7mg/mL荷叶生物碱水提物溶液对水杨酸体系中羟基自由基(·OH)的清除率为55.2%.     

荷叶生物碱提取响应曲面优化研究

以荷叶为材料,在提取温度、提取时间、乙醇体积分数和液料比4 个单因素试验的基础上,利用响应曲面试验设计法对荷叶生物碱提取条件进行研究,并通过回归方程和响应曲面,得到的最佳提取工艺为：提取温度84℃,提取时间2.01h,乙醇体积分数90.65%,液料比29.74:1(ml/g)。验证实验结果显示,此条件下荷叶生物碱提取率为0.858%。荷叶碱在6.40～32.00μg/ml 范围内具有良好的线性关系,r =0.992,荷叶中荷叶碱占荷叶生物碱提取物的比例为7.952%,荷叶中荷叶碱的含量为0.186%。     

荷叶生物碱的提取工艺优化及其清除羟基自由基能力的测定

研究了荷叶中生物碱的提取优化工艺及其抗氧化效果。采用正交实验设计,考察提取温度、提取时间、料液比和酸水pH对生物碱提取效果的影响。结果表明,最佳提取工艺为酸水pH2.5,提取温度80℃、提取时间2h和料液比1:40;荷叶碱在5.20～26.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,r=0.994,荷叶中荷叶碱的含量占荷叶生物碱水提物含量的1.752%;浓度为7mg/mL荷叶生物碱水提物溶液对水杨酸体系中羟基自由基(.OH)的清除率为55.2%。      

超声辅助提取-高效液相色谱法测定荷叶中的生物碱

采用超声提取法提取荷叶中的O-去甲荷叶碱、N-去甲荷叶碱、荷叶碱和莲碱4种主要的生物碱,建立HPLC分析方法进行评价,为荷叶及相关产品的质量控制提供参考。选用Welch Materials C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%三乙胺)为流动相进行梯度洗脱,实现了O-去甲荷叶碱、N-去甲荷叶碱、荷叶碱和莲碱4种生物碱的同时基线分离。在0.1～50μg/mL范围内,O-去甲荷叶碱(R=0.999 8)、N-去甲荷叶碱(R=0.999 9)、荷叶碱(R=0.999 8)和莲碱(R=0.999 8)具有良好的线性关系,检出限分别为1.87、2.22、2.34和1.88 ng/mL(S/N=3∶1)。     

HPLC测定荷叶中碱盐的含量

以荷叶为原料,建立一种荷叶碱盐含量的测定方法.运用高效液相色谱法测定,色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液(0.05%磷酸-0.2%三乙胺-水)(25:75,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm.结果显示,荷叶碱盐在0.053～0.159 mg/mL(R2=0.999 2)范围内具有良好的线性关系,平均回收率为96.4%,RSD为0.05%.该方法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于荷叶碱盐成分的含量测定.     

高效液相色谱法测定不同产地湘莲中荷叶碱、 莲心碱、芦丁的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定湘莲中荷叶碱、莲心碱、芦丁的方法。方法在酸性条件下超声提取3种待测组分。色谱条件如下:C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1 mol/L乙酸铵(用乙二胺调节pH值至7.5~8.0)(55:45,V:V);流速:1.0 m L/min;检测波长:275 nm;柱温30℃;进样量10μL。结果荷叶碱、莲心碱、芦丁分别在7.636~152.7μg/mL(r~2=0.9999,n=5)、7.543~150.9μg/mL(r~2=0.9995,n=5)、7.543~150.9μg/mL(r~2=0.9998,n=5)范围内线性关系良好,加标回收率为96.9%~100.5%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.1%~1.4%。结论该法同时测定湘莲中荷叶碱、莲心碱、芦丁,简单快速,定量准确,可以为评价不同产地湘莲功效成分提供参考。     

索氏提取荷叶生物碱及纯化工艺探究

对比回流提取和索氏提取对于荷叶生物碱的提取率影响,得出荷叶生物碱的最佳提取条件为索氏提取,溶剂为70%体积分数的乙醇,料液比为1︰20(g/mL),提取时间为3.5 h,提取温度为95℃。将荷叶提取物经过大孔吸附树脂D101,用乙醇梯度洗脱,收集50%~80%洗脱液浓缩,可以分离富集荷叶碱。     

荷叶多酚提取优化及其清除DPPH·自由基的研究

优化荷叶多酚提取工艺提高荷叶资源利用。在单因素实验的基础上,采用响应面分析法对提取时间、液料比、提取温度和pH等提取条件进行了优化。结果表明,45%乙醇溶剂提取荷叶多酚较好;曲面回归方程拟合性好;优化工艺为:乙醇浓度45%,提取时间35·3min,液料比64·6mL/g、提取温度52·3℃、pH4·7,荷叶多酚得率为19·83mg/g·干粉。荷叶多酚提取物清除DPPH·的IC50为125μg/mL。      

超声提取荷叶黄酮的工艺研究

研究了利用超声波技术提取荷叶中黄酮类化合物优化工艺,用分光光度法测定所提取黄酮类化合物的含量。采用正交设计法考察了乙醇浓度、料液比、超声时间及提取级数等对荷叶中黄酮类化合物提取率的影响,确定了最佳提取条件为乙醇浓度50%、料液比1∶20、提取3次、超声提取时间25min,在最佳参数组合下,荷叶黄酮提取率为4.85%。     

荷叶生物活性效应标志成分分析

目的：筛选荷叶生物活性效应标志成分,为荷叶质量及活性评价提供评价指标。方法：采用薄层色谱法分析鉴别、高效液相色谱法测定荷叶的8种黄酮、生物碱成分,进行荷叶抗氧化、抑制脂肪酶的活性效应成分相关性分析;薄层色谱法分离分析荷叶特征色谱斑点,聚类分析法筛选质量标志成分;结果：定量分析标志物荷叶碱为2.48±1.80mg/g,2-羟基-1-甲氧基阿朴啡为0.61±0.33mg/g;荷叶有较强的抗氧化及抑制脂肪酶活性;薄层鉴别标志物为2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、荷叶碱。结论：荷叶中黄酮、生物碱成分含量测定为荷叶多成分的含量测定提供一定技术支持。2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、荷叶碱为薄层鉴别标志物及抗氧化、抑制脂肪酶活性效应的质量评价成分,有助于全面评价荷叶药材质量及生物活性效用。     

荷叶中荷叶碱及原花青素提取工艺优化

目的:优选荷叶中荷叶碱、原花青素提取工艺。方法:采用正交实验设计,以原花青素、荷叶碱的提取率为指标,考察磷酸浓度、提取时间、料液比等因素对提取率的影响,优选最佳工艺参数。结果:以0.3%(V/V)磷酸为提取溶剂,料液比为1∶25(g/L),提取时间1.5h,提取2次,原花青素的提取率为89.2%,荷叶碱的提取率为69.9%。结论:采用酸水法提取荷叶中荷叶碱、原花青素,具有提取效率高、工艺简便、成本低等特点,适合于工业化大生产应用。      

山楂荷叶复合固体饮料的制备工艺优化及功能性成分含量测定

目的:建立一种以山楂荷叶为主要原料的固体饮料的制备工艺,同时拟定总黄酮和荷叶碱为主要质量控制指标,建立其含量测定方法。方法:分别以总黄酮含量和水溶性生物碱的雷氏盐沉淀量及干膏得率为指标,通过正交试验确定荷叶和莱菔子有效成分的最佳提取工艺;分别采用紫光分光光度法和反相高效液相色谱法测定总黄酮及荷叶碱的含量。结果:荷叶的最佳提取工艺为60倍量80%乙醇于80 ℃回流提取2次,每次2.5 h;莱菔子的最佳提取工艺为10倍量水提取3次,每次1.5 h。含量测定的结果为:芦丁在0.0192~0.1152 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率为100.53%,RSD值为1.45%(n=6);荷叶碱在1.5~24.0 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.16%,RSD值为1.17%(n=6)。结论:设计的制备工艺合理、可行,含量测定方法简便、准确、重复性好,可为山楂荷叶复合固体饮料的生产和质量控制提供科学依据。     

Supercritical fluid extraction and identification of isoquinoline alkaloids from leaves of Nelumbo nucifera Gaertn

Isoquinoline alkaloids from leaves of Nelumbo nucifera (N. nucifera) were extracted using supercritical CO₂. The effects of the parameters such as the dynamic extraction time, temperature, pressure, various modifiers, and flow rate of the modifier on the yield of nuciferine and the ratio of total isoquinoline alkaloids to the total extract were investigated. Nuciferine content of the extract was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC). The results indicated that the yield of nuciferine increased with increases in the dynamic extraction time, pressure, temperature, and flow rate of the modifier. The highest nuciferine yield of 325.54 μg/g was obtained when the extraction was carried out for 2 h at 70 °C under 30 MPa, with 10% (v/v) diethylamine and 1% (v/v) water in methanol as the modifier which kept a flow rate of 1.2 mL/min. The ratio of total isoquinoline alkaloids to the extract was 49.85% at the highest nuciferine yield. Five kinds of isoquinoline alkaloids extracted from N. nucifera leaves were identified by high-performance liquid chromatography combined with ion trap/time-of-flight mass spectrometry (LC/MS-ITTOF). They were Dehydronuciferine, N-nornuciferine, O-nornuciferine, Nuciferine, and Roemerine in the order of retention time.     

杜仲叶中松脂醇二葡萄糖苷的提取分离及含量测定

采用溶剂法提取新鲜杜仲叶中的松脂醇二葡萄糖苷(PDG),以体积分数85%乙醇溶液为溶剂,杜仲叶与溶剂的比例为1:4(g/mL),60℃超声提取30min,真空抽滤得到滤液。用制备薄层分离纯化滤液,得到PDG提取产物,产率为2.00%。测定PDG标准物的紫外吸收光谱图,结果PDG在228nm处有最大吸收峰;用高效液相色谱法测定提取物样品中PDG的含量,检测波长228nm。PDG进样量在0.00238～0.0950mg/mL范围内呈良好的线性关系(y＝84.8x＋0.838,r＝0.9993),平均回收率为102%。经测定,新鲜杜仲叶中PDG含量约为0.0960%,提取产物中PDG含量为4.54%。该方法操作简单,溶剂用量少,可有效提取并分离杜仲叶中的PDG。     

Application of high-speed counter-current chromatography for the isolation of 5 alkaloids from lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves

A high-speed counter-current chromatography (HSCCC) method was developed for isolation of 5 alkaloids from lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves. The 2-phase solvent system of HSCCC composed of light petroleum-ethyl acetate-methanol-water was set up in 2- step separation process in the proportion of 3:5:3:5 for isolation of N-nornuciferine and armepavine, and in the proportion of 1:5:1:5 for that of anonaine, pronuciferine, and nuciferine. The purity of anonaine (14.6mg), pronuciferine (29.7 mg), N-nornuciferine (31.4 mg), nuciferine (22.1 mg), and armepavine (23.3 mg) isolated from 150 mg crude extract of lotus leaves were examined as 95.6, 88.2, 92.5, 94.3, and 92.1%, respectively.     

毛细管电泳-电化学发光法测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量

建立毛细管电泳-电化学发光法同时测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量的方法。对三联吡啶钉(Ru(bpy)_3~(2+))溶液浓度、检测电位、磷酸盐缓冲液浓度和pH值、进样时间和分离电压等实验条件进行考察和优化。结果表明,在检测电位为1.20 V,运行缓冲液为10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 5.74),5 mmol/L Ru(bpy)_3~(2+)溶液,检测池内磷酸盐缓冲液浓度为60 mmol/L(pH 8.30),进样电压为8 kV,进样时间为10 s,分离电压为13 kV,荷叶碱检出限为7.7×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3),莲心碱检出限为7.8×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3)。对浓度为6.8×10~(-5)mol/L荷叶碱和3.1×10~(-5)mol/L莲心碱的标准品溶液进行5次平行测定表明:荷叶碱峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为3.76%,迁移时间RSD为0.83%;莲心碱峰面积RSD为4.28%,迁移时间RSD为1.37%。该方法可用于测定荷叶中的荷叶碱与莲子心中莲心碱含量。     

荷叶盐渍和糖渍过程中苦涩味物质含量变化研究

对盐渍和糖渍处理过程中荷叶内的苦味和涩味代表物质-单宁和槲皮素含量进行动态监测,并结合感官实验对盐渍和糖渍处理过程中荷叶的苦味和涩味进行评定,结果显示:在盐渍和糖渍过程中,单宁和槲皮素的含量均有所下降。单宁含量分别下降了72.56%和71.15%;槲皮素的含量分别降低了29.79%和34.08%。荷叶碱含量上升,在盐渍和糖渍过程中分别增加了47.50%和76.14%。感官评价结果为,在盐渍15d,糖渍9d荷叶无明显苦涩味。荷叶盐渍15d和糖渍9d达到良好可食性。      

荷叶功能成分的提取及其对自由基清除作用的研究

研究了荷叶中的功能成分黄酮类化合物和生物碱的水提取工艺条件。结果表明 :以水为溶剂来提取荷叶中的黄酮类化合物及生物碱时 ,较佳的工艺条件为 ,m (水 )∶m(荷叶 ) =30∶1,于 80～ 90℃提取 1.5h ,提取液呈酸性。同时采用电子自旋共振捕集技术 (ESR) ,研究了以荷叶在水溶剂中的提取物 (LLE)对羟基自由基 (·OH)和超氧阴离子自由基 (O-2 ·)的清除效果。结果表明 :LLE对·OH和O- 2 ·有很强的清除能力 ,2 6.94 μg/mL的LLE对次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生O-2 ·的清除率达 65 .60 % ,LLE浓度大于 8.98mg/mL时 ,可以全部清除由Fenton反应体系产生的·OH。