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《制药原料及中间体信息》2008,(4)
被称为21世纪化学工业可持续发展基本工具的新型酶催化剂技术在我国取得突破。在国家自然科学基金委重点项目支持下,清华大学生物化工研究所研制成功中国第一个智能多功能酶——MBP(麦芽糖结合蛋白)融合肝素酶。经过半年的中试,该项目课题组3月20日宣布,他们已稳定制备出达到国际先进水平的平均分子量在2000-3000左右的超低分子量肝素。 相似文献
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肝素酶Ⅲ(heparinase III,HepC)是一种重要的多糖裂解酶,在抗癌药物开发、低分子量肝素生产以及肝素类药物的质量控制等方面具有重要的作用。目前制约其工业应用前景的主要技术瓶颈是生产成本高,异源重组表达效果差,缺乏高效的表达方法。本研究借鉴前期经验,通过HepC基因的密码子优化,并与麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)融合,构建了MBP-coHepC(基因密码子优化后的蛋白为coHepC)的大肠杆菌表达体系,结合培养条件优化大幅度提高了HepC的可溶表达比例,其摇瓶发酵总酶活值达到7603.46 IU·L?1;同时,本研究从转录和翻译水平揭示了HepC表达效果提高的可能原因。这些研究为肝素酶III的应用发展提供了基础。 相似文献
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肝素酶Ⅲ(heparinase Ⅲ,HepC)是一种重要的多糖裂解酶,在抗癌药物开发、低分子量肝素生产以及肝素类药物的质量控制等方面具有重要的作用。目前制约其工业应用前景的主要技术瓶颈是生产成本高,异源重组表达效果差,缺乏高效的表达方法。本研究借鉴前期经验,通过HepC基因的密码子优化,并与麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)融合,构建了MBP-coHepC(基因密码子优化后的蛋白为coHepC)的大肠杆菌表达体系,结合培养条件优化大幅度提高了HepC的可溶表达比例,其摇瓶发酵总酶活值达到7603.46 IU·L-1;同时,本研究从转录和翻译水平揭示了HepC表达效果提高的可能原因。这些研究为肝素酶Ⅲ的应用发展提供了基础。 相似文献
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利用ChBD和SUMO标签构建4种不同的融合蛋白体系,分别为ChBD-Hep I、ChBD-SUMO-Hep I、SUMO-ChBD-Hep I和ChBD-Hep I-SUMO。经过发酵工艺优化实验,确定该4种酶在最优条件下的摇瓶发酵酶活分别为2.44IU/mL、6.92IU/mL、6.01IU/mL和4.51 IU/mL。同时,通过酶学性质研究,确定该4种重组酶的最适反应温度与pH分别为30℃和7.0,表明SUMO和ChBD标签不影响Hep I的催化反应。4种重组酶的热稳定性较天然Hep I明显提高,其中ChBD-SUMO-Hep I在30℃半衰期达50 min,由此,确定其为最优菌株。将ChBD-SUMO-Hep I进行5 L发酵罐扩大培养,酶活达到26 IU/mL,是摇瓶培养的5倍,表明其具有工业化生产的潜质。 相似文献
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目的观察妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中乙酰肝素酶的表达变化及低分子量肝素的干预效应,探讨乙酰肝素酶在妊娠期高血压疾病肾脏损害发生过程中的作用。方法建立正常妊娠大鼠模型,妊娠期高血压疾病模型大鼠和低分子量肝素干预大鼠模型,采用免疫组化SABC法测定3组模型孕21d肾脏组织中乙酰肝素酶的表达。结果与正常妊娠组相比,妊娠期高血压疾病模型组大鼠肾脏组织中乙酰肝素酶的表达显著升高(P<0.01),平均动脉压和尿蛋白排泄明显增加(P<0.01)。与妊娠期高血压疾病模型组相比,低分子量肝素干预组大鼠肾脏组织中乙酰肝素酶的表达显著降低(P<0.01),平均动脉压和尿蛋白排泄明显降低(P<0.01)。结论肾脏组织中乙酰肝素酶的表达与妊娠期高血压疾病肾脏损害的发生发展有关,低分子量肝素对妊娠期高血压疾病肾脏损害具有一定的防治作用。 相似文献
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丙烯酰胺是一种重要的有机化工原料.以它为中间体合成的产品有上百种,其聚合物或共聚物可用作化学灌浆物料、土壤改良剂、絮凝剂、纤维改性剂和涂料等。目前丙烯胺酰的生产工艺有丙烯腈硫酸化学水解法、丙烯腈以还原铜为金属催化剂的化学水合法和丙烯腈以腈水合酶为生物催化剂的微生物法。微生物法比化学法更具有优势.丙烯腈水合反应的条件温和.在常温常压下进行.反应后丙烯腈的转化率高达99.99%,反应液中的丙烯腈的含量可控制在50ppm以下.不需要去除和回收残余丙烯腈。产品的丙烯腈含量指标就完全合格,省去了残留丙烯腈去除和回收工艺流程.减少了设备投资、能耗和环境污染。且生物催化剂具有成本低、催化效率和选择性高的特点,因此微生物法获得的丙烯酰胺产品中杂质含量低.产品活性高.特别适合生产高分子量的聚合物。微生物法丙烯酰胺生产技术以其众多的优点成为了第三代丙烯酰胺生产技术。并在实际生产中得到了广泛应用.目前单线生产能力在2万t/a以上. 相似文献