藜芦乙醇提取物对植物病原真菌的抑菌活性研究

通过测定藜芦的乙醇提取物以及各萃取部分对植物病原真菌的抑菌活性,寻找藜芦中的农用活性物质,为其综合开发利用提供科学依据。采用菌丝生长速率法测定了藜芦球茎和根乙醇提取物对6种植物病原菌的抑制作用。试验结果表明,当供试浓度为5.0 mg/mL时,对苹果腐烂病菌(Valsa mali)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)和苹果轮纹病菌(Physalospora piricola nose)的抑菌率比较高,分别为96.4%、78.1%和74.3%。藜芦乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物的抑菌活性较高,乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂病菌和苹果轮纹病菌的EC50分别为0.161 mg/mL和0.551 mg/mL;正丁醇萃取物对苹果腐烂病菌和苹果轮纹病菌的EC50分别为0.190 mg/mL和0.451 mg/mL。乙酸乙酯萃取物是进一步研究的重点。     

长枝木霉T6发酵液稳定性及粗提物抑菌活性

[目的]明确长枝木霉T6菌株发酵液在不同环境下的稳定性及其粗提物的抑菌活性。[方法]以苹果树腐烂病菌为指示菌,采用生长速率法测定发酵液在不同条件下的稳定性,并以11种植物病原菌物为供试菌,研究发酵液粗提物的抑菌活性。[结果]稳定性试验表明:发酵液耐121℃高温,耐强酸强碱,自然光及紫外光处理对其抑菌活性无影响;在4℃及常温下可储存至少60 d以上保持活性不变。抑菌试验表明:发酵液粗提物对苹果树腐烂病菌、苹果树斑点落叶病菌、油菜根腐病菌和立枯丝核菌菌丝生长具有较强的抑制作用,其抑制率分别为100%、93.32%、92.35%和91.49%。[结论]长枝木霉T6菌株代谢产物具有较强的稳定性和广谱的抑菌活性。     

牡丹皮乙醇提取物对黄瓜枯萎病菌的活性抑制及作用机制

为探究牡丹皮对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)的抑菌活性,通过用不同浓度的牡丹皮乙醇提取物处理黄瓜枯萎病菌,测定其对枯萎病菌的菌丝生长抑制率、胞外电导率、A_{260 nm}与A_{280 nm}的变化,使用光学显微镜观察处理后的菌丝形态变化。结果表明：牡丹皮乙醇提取物处理后的黄瓜枯萎病菌胞外电导率、A_{260 nm}和A_{280 nm}显著上升,菌丝出现膨胀畸变等现象;其中质量浓度为25.0 mg/mL的牡丹皮乙醇提取物可显著降低黄瓜枯萎病菌的生长速度,处理48 h后抑菌率可达到92.08%;进一步研究认为,牡丹皮通过破坏黄瓜枯萎病菌的细胞膜结构,使胞内物质渗出,造成菌丝形态结构畸变,进而抑制了菌体细胞的生长与繁殖。     

生防芽孢杆菌的分离筛选与初步鉴定

从不同环境中采集7份土壤样品用于芽孢杆菌的分离纯化,通过多次平板划线分离纯化得到30个菌落形态不同的菌株。以黄瓜枯萎病菌为指示菌对得到的菌株进行抑菌活性筛选,其中的4个菌株具有明显的抑菌作用。采用对峙生长法,测定4株芽孢杆菌对其它植物病原真菌的活性,结果显示4个芽孢杆菌均具有广谱抑菌性。进一步试验表明,4株芽孢杆菌的发酵液也具有明显的抑菌作用,说明对病原真菌有抑制作用的物质水溶性较大,大部分释放到发酵液中,并且发酵液可使黄瓜枯萎等植物病原真菌菌丝膨大、褐变、末端钝圆,促进镰刀菌产生小孢子。通过菌落形态特征、系列生化测定对其进行初步鉴定,结果表明其中一株为枯草芽孢杆菌。     

一株拮抗辣椒疫霉的放线菌及其防治效果

[目的]为获得对辣椒疫霉(Phytophthora capsici)具有生防效果的放线菌。[方法]采用平皿对峙法从辣椒根际56份土样中,分离筛选出1株对辣椒疫霉具有明显拮抗作用的放线菌LY26,测定了其对14种植物病原菌的抑菌效果。[结果]菌株LY26对供试病原菌中的卵菌均具有较好的抑制作用,对辣椒疫霉的抑菌效果最佳,抑制率高达97.56%。离体接种试验和盆栽试验结果表明施用LY26发酵液对辣椒疫病具有良好的防效。形态学和16S rDNA序列表明菌株LY26为链霉菌(Streptomyces sp.)。[结论]链霉菌LY26对辣椒疫霉具有生防潜力,有进一步研究鉴定其抗菌活性物质的价值。     

一株链霉菌发酵液的抗菌谱及稳定性

从土壤中分离得到一株放线菌菌株,杯碟法测定该菌株发酵液对14种植物病原真菌和两种植物病原细菌均有不同程度的抑菌活性,其中对烟草黑胫病菌和黄瓜菌核病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达56．36mm和56．26mm。枯斑抑制法测定发酵液对TMV的抑制作用表明,发酵液对TMV有很好的钝化作用,发酵液与病毒汁液混合10min后接种,枯斑抑制率为93．88％,接种前24h处理和接种后24h处理的枯斑抑制率分别为87．93％和42．21％。通过对发酵液稳定性的初步研究,表明发酵液中的抗菌物质对温度、光照以及pH值变化都比较稳定。     

石榴皮抑菌活性物质的初步研究

研究了石榴皮初提物对黄瓜枯萎病菌的室内生物活性.结果表明:在甲醇、氯仿及正己烷提取物中,甲醇提取物的抑菌活性最为显著.采用生长速率法和孢子萌发法测定了石榴皮溶剂萃取物对黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、玉米小斑病菌和棉花立枯病菌等4种病原菌的生物活性.在甲醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取物中,以正丁醇萃取物的抑菌活性最强,在质量浓度为200 g/L时.对4种供试真菌的抑制率均大于70%,而对玉米小斑菌的抑制作用达90.67%,其EC50值为26.2 g/L.     

细菌Sh34的鉴定及其对几种植物病原真菌的拮抗作用测定

从黄瓜田土壤中分离得到拮抗细菌Sh34,根据其形态特征和生理生化特性及其细菌的16SrDNA序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。经平皿测试表明,菌株Sh34及其无菌滤液对黄瓜蔓枯病菌(Ascochyta cucumis)、黄瓜枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、黄瓜菌核((Sclerotinia scleotiorum)、瓜果腐霉菌(Pythium aphanidermatum)、立枯丝核菌(Rhixoctonia solani)等多种植物病原真菌均有良好稳定的抑制作用。其无菌滤液能使黄瓜枯萎菌菌丝老化,原生质浓缩。     

放线菌TL05-22菌株发酵液的抑菌谱及稳定性

[目的]研究放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱及稳定性。以16种植物病原真菌和6种细菌为供试菌,采用菌丝生长速率法、杯碟法测定拮抗放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱;以苜蓿尖镰孢根腐病菌为指示菌,杯碟法测定发酵液的传代稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。[结果]放线菌TL05-22发酵液对16种植物病原真菌和6种细菌均具有不同程度的抑菌活性,其中供试真菌以对苜蓿尖镰孢根腐病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达33.68 mm;供试细菌中以对大白菜软腐病菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达29.12 mm。将发酵液于60~100℃处理30、60 min,抑菌活性没有明显变化;发酵液在pH值6~14时抑菌活性未发生明显变化,但在pH<6条件下抑菌活性明显下降;连续培养10代,发酵液抑菌活性无明显变化。[结论]放线菌TL05-22的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的稳定性,具有一定开发价值。     

一株车前子内生细菌的抑菌和促生活性初步研究

为了筛选到具有农用生物活性新的微生物资源,本研究以一株车前子内生细菌R6为试验材料,对其抑菌活性和促生作用进行了研究。抑菌测定结果表明,R6菌株对棉花枯萎病菌、甜瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌、苹果腐烂病菌、番茄早疫病菌均有较强的抑菌活性,并能产生挥发性的抑菌活性物质。促生作用结果表明,R6菌株发酵液对黄瓜种子萌发、生长期的鲜重、根冠比、叶绿素含量等指标均有一定促进作用。     

卡松对几种重要植物病原菌的抑制活性

在实验室条件下，分别测定了1．5％卡松对棉花枯萎病菌、棉花红腐病菌、棉花红粉病菌、棉花黄萎病菌和棉花疫病菌等5种重要植物病原真菌及水稻白叶枯病菌、大白菜软腐病菌等两种重要植物病原细菌的抑制活性。结果表明，1．5％卡松对棉花枯萎病菌的MIC和EC50分别为40mg/L和9．2034mg／L，对棉花红腐病菌的MIC和EC50分别为40mg／L和0．7845mg／L，对棉花红粉病菌的MIC和EC50分别为20mg／L和0．6951mg／L，对棉花黄萎病菌的MIC和EC50分别为20mg／L和2．8383mg／L，对棉花疫病菌的MIC和EC50分别为2mg／L和0．3459mg／L；对水稻白叶枯病菌和大白菜软腐病菌的MIC分别为1mg／L和10mg／L；说明该药剂对供试7种植物病原菌均具有良好的抑制活性，尤以对棉花疫病菌和水稻白叶枯病菌的抑制活性较强。     

9种植物提取物对植物病原真菌的生物活性筛选

以苹果腐烂病菌、小麦赤霉病菌、苹果轮纹病菌、棉花枯萎病菌、柑橘炭疽病菌和黄瓜枯萎病菌为供试菌种。采用菌丝生长速率法测定了9种植物乙醇提取物对6种植物病原真菌的抑制作用,结果表明,浓度为5mg/mL时,荆条花乙醇提取物对6种植物病原真菌均有一定程度的抑制作用,其中对苹果腐烂病菌、棉花枯萎病菌、苹果轮纹病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别为91.07%、72.97%、64.54%和63.20%。采用抑制孢子萌发法测定了9种植物乙醇提取物对2种植物病原真菌的抑制作用,结果表明,浓度为20mg/mL时,雪松叶和仙鹤草叶乙醇提取物对黄瓜枯萎病菌和柑橘炭疽病菌的孢子抑制率为100%。     

创新杀菌剂对土传病原真菌的离体活性测定

[目的]为了研究杀菌剂对尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、瓜果腐霉菌的生物活性,采用菌丝生长速率法对多种杀菌剂及其混剂组合进行了离体抑菌活性测定.[结果]啶菌(恶)唑和苯醚甲环唑对黄瓜枯萎病菌的EC50值分别为0.3233、0.6604 mg/L;三环菌胺和甲霜灵对黄瓜猝倒病菌的EC50值分别为1.0282、2.5163mg/L.啶菌(恶)唑与苯醚甲环唑、三环菌胺与甲霜灵两两配比组成混剂,不同混剂组合在部分配比中共毒系数大于120,表现出增效作用.[结论]毒力测定结果表明:啶菌(恶)唑、苯醚甲环唑、三环菌胺和甲霜灵分别对3种病菌表现出了很强的抑制作用;啶菌(恶)唑·苯醚甲环唑(1∶5)、三环菌胺·甲霜灵(1∶3和1∶5)分别对病菌表现出了明显的增效作用.     

β-细辛醚和丁香酚酯对芒果炭疽病菌和香蕉枯萎病菌的抑制作用

文章研究了β-细辛醚和丁香酚酯对芒果炭疽菌抗药性菌株Colletotrichum gloeosporioides（zJR）、敏感菌株C．gloeosporioides（ZJS）和香蕉枯萎病菌（Fusariuvaowysporumf．sp．cubertse）的撺制作用。发现β-细辛醚和丁香酚对三种病菌有良好的抑制效果,§一细辛醚和丁香酚酯在1．00mg／mL浓度下对芒果炭痘病（抗药性和敏感）菌抑菌率均为100％;在0．50mg／mL浓度下β-细辛醚对芒果炭疽病抗药性菌株、敏感菌株抑菌和香蕉枯萎病菌的抑制率分别为91．2％、86.7％和57．97％。丁香酚酯在0．50mg／mL对芒果炭疽病抗药性菌株、敏感菌株抑菌和香蕉枯萎病菌的抑制率分别为36．20％、44．70％和61.93％。     

阴香叶提取物的抑菌活性初步研究

用不同溶剂对阴香[Cinnamomum burmanii (Nees) Bl] 叶进行提取,以生长速率法测定了提取物对植物病原真菌的抑菌作用。结果表明:阴香叶的氯仿提取物的抑菌活性最好;氯仿提取物对西瓜枯萎菌、芒果炭疽菌、香蕉枯萎菌和香蕉炭疽菌的EC50分别是0.3193mg/ml、0.1552mg/ml、0.0226mg/ml、0.019 2 mg/ml,其中提取物对香蕉炭疽菌的毒力最高,值得进一步研究。     

植物病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定

从杭州地区采集的11份土样中共分离到99株放线菌.筛选出9株对产核黄素的无名假丝酵母Candida famata有拮抗作用.采用平板对峙法复筛到1株对供试的多种植物病原菌抑制效果较强的菌株W04,该菌株对西瓜枯萎病原菌的抑菌率达到79.1%;生长速率法测得其发酵滤液对西瓜枯萎病原菌的抑制率为82.6%.根据形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为淡紫灰链霉菌Streptomyces lavendulae Waksman ＆ Curtis.     

海芒果叶提取物的抑菌活性初探

采用冷浸法和超声波提取法对海芒果叶进行提取。以生长速率法测定了各萃取物对9种病原真菌的抑菌作用。结果表明,海芒果叶的正丁醇萃取相的抑菌活性最好;正丁醇萃取相对番木瓜炭疽菌、柑橘炭疽菌、香蕉枯萎菌的EC50分别是1.3964mg/mL、1.7246mg/mL、1.3256mg/mL,其中提取物对香蕉枯萎菌的毒力最高,值得进一步研究。