两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

本实验通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。在耐氧驯化时,通过增加培养基中的氧气分压的方法进行驯化;在耐酸驯化的过程中,通过降低培养基的初始pH值的方法进行。实验结果表明,在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为42000%,而原始菌的增殖比例仅为8333%,且前者的凝乳时间较后者短,为后者的2/3;再经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高,且耐酸性明显优于未经驯化的菌株;最后再经过胆盐驯化的菌株在胆盐浓度为0.5%时培养后也有较高的活菌数,说明其对胆盐的忍耐力明显增强。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。实验结果表明，在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为41000％，而原始菌的增殖比例仅为8233％，且前者的凝乳时间为后者的2／3；经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高，且耐酸性明显优于未经驯化的菌株；胆盐驯化的菌株经胆盐浓度为0．5％的培养后也有较高的活菌数，其对胆盐的忍耐力明显增强。     

长双歧杆菌多因素连续驯化的研究

双歧杆菌因对外界环境的耐受性较差,限制了其规模化生产和实际应用。通过对长双歧杆菌进行连续的耐氧、耐酸以及耐胆盐的驯化,使长双歧杆菌对氧、酸以及胆盐的耐受性有了一定的提高,活菌数和产酸性能都有所提高。耐氧驯化时,通过逐渐增加培养基中的氧分压的方法进行;耐酸驯化时,通过逐渐降低培养基的初始pH的方法进行;耐胆盐驯化时,通过逐渐增加培养基初始胆盐含量的方法进行。实验结果表明,耐氧耐酸驯化后的菌株活菌数能达到9.4×108 cfu/mL,为初始菌的1.92倍;耐胆盐驯化后的菌株在胆盐浓度为0.3%时培养也能保持一定的活菌数,而初始菌株不能存活。     

双歧杆菌的分离鉴定与耐氧驯化

本研究从鸡盲肠内容物中分离出单菌落,经菌落菌体形态观察和生理生化鉴定为双歧杆菌.采用逐级增加氧气含量的方法对筛选出的双歧杆菌进行耐氧驯化,以改善双歧杆菌时氧气的耐受力,经过多次驯化,优选出对氧气有一定耐受力、凝乳能力较好,且在贮藏过程中活菌数能够达到保健功能要求的菌株B05.经二次鉴定该菌株保持了双歧杆菌的形态和生理特征.     

动物双歧杆菌乳亚种BZ11的耐氧驯化及降胆固醇性能的研究

为了提高动物双歧杆菌乳亚种BZ11对有氧环境的耐受性,采用逐渐增加培养基中的氧分压和有氧、厌氧条件下交替培养两种方案对其进行了耐氧驯化。通过对驯化前后菌株的生长特性进行分析得出逐渐增加培养基中的氧分压的驯化方案取得了更好的效果。经最优方案驯化后的菌株在有氧条件下培养20 h后,活菌数可达到6.30×10~8CFU/m L,是初始菌株的2.24倍。驯化后菌株的降胆固醇率为27.31%±0.80%,与初始菌株相比没有显著性差异(P0.05)。通过鉴定得出,动物双歧杆菌乳亚种BZ11在耐氧驯化前后保持了相似的形态及生理生化特征。因此,驯化后的菌株有望作为1株潜在益生菌被开发利用。     

双歧杆菌厌氧培养及耐氧驯化的研究

用４种不同驱氧方式的缸内厌氧法培养双歧杆菌，比较其厌氧培养效果。对厌氧的双歧杆菌进行耐氧驯化，耐氧化明显提高，经生理鉴定证明，驯化后的菌株与未经驯化的菌株相比，生理学特性没有发生变化。     

两歧双歧杆菌在牛初乳中的发酵特性研究

用经过耐氧驯化后的两歧双歧杆菌发酵牛初乳,研究了其发酵特性。结果表明,两歧双歧杆菌在牛初乳中37℃发酵10h,pH值为4.72,活菌数为3.3×109mL-1,初乳IgG活性、质量浓度基本保持不变。     

青春双歧杆菌耐氧驯化及培养条件的响应面法优化

对一株青春双歧杆菌进行耐氧驯化,通过有氧、无氧交替驯化法对出发菌株进行耐氧驯化,得到耐氧能力较强的青春双歧杆菌菌株,在有氧静止培养条件下活菌数可达到4.31×1011cfu/mL。对该耐氧菌株通过响应面法进行培养条件优化,确定培养耐氧青春双歧杆菌的最佳条件:接种量5%,玉米糖化液浓度12.1°Bx,初始pH6.48,培养温度37℃,发酵时间24h。在此条件下菌液最大OD值为1.819,此条件下培养的活菌数为3.05×1012cfu/mL。     

降胆固醇双歧杆菌的研究进展

双歧杆菌是人体中最有益的益生菌,尤其是降胆固醇双歧杆菌对降低心脑血管疾病具有重要意义。所以综述了降胆固醇双歧杆菌的研究进展。重点探讨了如何有效筛选到降胆固醇双歧杆菌,如何获得耐氧的双歧杆菌,如何对双歧杆菌进行高密度发酵,以及双歧杆菌如何降胆固醇,以期能给从事这方面研究的学者有所启示。可以通过选择合适样品后利用选择性培养基进行培养并结合双歧杆菌形态学特征和降胆固醇试验筛选到降胆固醇双歧杆菌。对于筛选到的降胆固醇双歧杆菌可通过耐氧驯化、微胶囊化技术和双层包埋技术而获得耐氧双歧杆菌。而且,可通过培养基优化和发酵方式控制来获得高浓度的降胆固醇双歧杆菌。关于双歧杆菌的降胆固醇机制主要有共沉淀作用、吸附与结合作用和同化作用等。     

双歧杆菌发酵中国黑米口服液的研制

以中国黑米为主要原料，制作发酵培养基，采用耐氧两歧双歧杆菌进行发酵扩大培养，以双歧杆菌发酵中国黑米口服液。应用该口服液对腹泻、消化不良病人进行治疗观察，疗效明显     

青春双歧杆菌的耐氧驯化及不同低聚糖对其增殖效果的影响

为改善青春双歧杆菌在发酵产品中活菌数低、菌种功效弱的情况,对厌氧青春双歧杆菌进行耐氧驯化,采用无氧有氧交替驯化法,在驯化过程中逐渐增加青春双歧杆菌培养液的氧分压,测定青春双歧杆菌驯化前后生理特性,并对比大豆低聚糖、低聚木糖、低聚麦芽糖对青春双歧杆菌增殖的影响。结果表明,青春双歧杆菌在耐氧驯化后对氧气的敏感程度下降,有氧条件下生长能力达标,产酸能力得到提升,菌体驯化前后形态基本一致,耐氧青春双歧杆菌代谢产生的乙酸与乳酸比值较厌氧青春双歧杆菌更适宜发酵,在3种低聚糖中,低聚木糖对青春双歧杆菌增殖作用明显,可作为青春双歧杆菌良好的双歧因子。耐氧驯化后的青春双歧杆菌有着优良的生理特性,能够作为潜在的益生菌菌种深入研究其功能并可应用于发酵食品中。     

母乳源长双歧杆菌的筛选鉴定及耐氧驯化

目的：从母乳中筛选双歧杆菌，并提高双歧杆菌在有氧条件下的耐受性。方法：采用稀释涂布法结合16S rDNA鉴定法从母乳中筛选出双歧杆菌，并采用逐渐增加氧分压和有氧厌氧交替的方法进行驯化。结果：筛选得一株MEFZ-2201菌株，通过16S rDNA测序比对，其与长双歧杆菌模式菌（NCBI登录号：ON631733.1）的同源性达到了100%，鉴定为长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）。将长双歧杆菌MEFZ-2201进行驯化后，其有氧培养最高的活菌数为8.9×10⁹ CFU/mL，比未经驯化的菌株活菌数提高了一个数量级；此外，驯化前后菌株的生理生化及形态特征并未发生变异；在短链脂肪酸的产生量上，驯化后菌株在厌氧条件下产酸量也显著高于驯化前的菌株。结论：驯化后的长双歧杆菌MEFZ-2201在有氧条件下的活菌数明显提高，有望成为潜在的益生菌菌株进一步开发利用。     

益生菌发酵蓝莓花色苷的代谢规律

选用嗜热链球菌、两岐双歧杆菌、植物乳杆菌进行纯种发酵含有蓝莓花色苷提取液的培养液,考察了益生菌发酵过程中活菌数、体外抗氧化性、有机酸、单体花色苷和酚酸等组分的变化情况。结果表明,发酵48 h后,三种益生菌的活菌数均增至8.0 lg CFU/mL左右,两岐双歧杆菌的活菌数最高(P<0.05),发酵后不同菌株发酵样的ABTS+·清除能力显著提升(P<0.05),其中两岐双歧杆菌发酵样品抗氧化能力最强(P<0.05);但植物乳杆菌发酵样品中乳酸含量最高(P<0.05);发酵过程中单体花色苷含量呈下降趋势,两岐双歧杆菌发酵样品花色苷组分与其它两株菌发酵的样品差异较大;绿原酸、对香豆酸和咖啡酸的含量总体呈现下降趋势,而没食子酸、丁香酸和阿魏酸含量呈上升趋势,主成分分析图中三株益生菌发酵样的分布差异较大。以上结果为进一步解释益生菌发酵代谢花色苷的机理提供了参考。     

两歧双歧杆菌BB-G90生产工艺的优化

对两歧双歧杆菌的4种发酵培养基进行了筛选,确定了适合两歧双歧杆菌BB-G90生长的发酵培养基;研究了5种冻干保护剂对两歧双歧杆菌BB-G90活菌的影响。利用筛选的发酵培养基培养BB-G90,在调控pH=5.0±0.5条件下进行300 L罐中试发酵试验,确定了发酵参数及冻干保护剂配方。试验结果表明:两歧双歧杆菌BB-G90在优化的发酵培养基、适宜的冻干保护剂及调控pH=5.0±0.5条件下发酵终止时间为22 h,此时,发酵液OD600值为5.62,发酵液活菌数为1.80×109CFU/mL,发酵液经离心、乳化及冻干后,菌粉活菌数为4.10×1011 CFU/g。     

Characterisation of a Bifidobacterium strain with acquired resistance to cholate--a preliminary study

The susceptibility levels against bile salts (ox gall) and sodium cholate of 19 Bifidobacterium strains from different origins ranged between 0.125% and 2.0% and 0.05% and 0.4%, respectively. Seven of these strains were subsequently selected for the isolation of sodium cholate resistant derivatives by exposure to gradually increasing concentrations of this compound. Derivatives resistant to at least 1.2% of cholate were obtained from Bifidobacterium bifidum CECT 4549 and B. bifidum M6. Further analysis of the CECT 4549 derivative indicated that the phenotype induced was stable; the enzymatic activities analysed remained unchanged and no major rearrangements of chromosomal DNA were produced. However, the cells of the resistant derivative were smaller and more regular in average size than those of the original strain. In addition, the derivative had lost the ability to use lactose, fructose and galactose, and showed reduced expression levels of two membrane proteins of 78 and 114 kDa. Finally, the resistant strain displayed higher survival and lower growth inhibition in the presence of cholate than the original strain.     

两歧双歧杆菌发酵橙汁酸豆奶的研究

本文尝试研究豆奶中两歧双歧杆菌的生长情况,以得到风味良好的发酵产品.以大豆与水1∶8的比例制取豆奶,添加一定量的橙汁,并加入两歧双歧杆菌进行发酵.考察了培养温度、橙汁添加量、接种量等因素对产品pH值和活菌教的影响,并在此基础上进行正交试验优化.正交试验结果表明,培养温度为39℃、接种量为5％、橙汁添加量为10％,18 ...     

Competitive exclusion of enteropathogens from human intestinal mucus by Bifidobacterium strains with acquired resistance to bile--a preliminary study

The ability to inhibit the adhesion and to displace selected pathogens from human intestinal mucus of two Bifidobacterium strains with acquired resistance to bile, were assessed and compared with those of their bile sensitive original strains. A preliminary characterization of the macromolecules involved in the adhesion was also carried out. The inhibition of adhesion and the displacement of enteropathogens previously adhered were found to be specific, depending on the strains used. The cholate-resistant strain Bifidobacterium bifidum M6dCo, that adhered more to mucus than its original, was able to inhibit the adhesion and to displace pathogens from mucus significantly more than its original cholate-sensitive strain B. bifidum M6. Contrary to this, two strains showing similar adhesion levels, B. bifidum A1 and its bile resistant derivative B. bifidum A1dOx, did not display any differences. Different molecules appear to be involved in the adhesion of the strains B. bifidum M6 and B. bifidum M6dCo. These differences in the cellular surface may explain the differences in competitive exclusion observed between both strains.     

双歧杆菌免疫学检测方法的研究

建立双歧杆菌快速检测方法间接ＥＬＩＳＡ法．应用双歧杆菌细胞壁作为抗原所获得的抗血清,能够检测出双歧杆菌的最低浓度范围在１０５ｍＬ左右．在检测过程中无需纯化抗原．所建立的方法具有较强的特异性,能够有效地将两歧双歧杆菌与其它种属的微生物区别开来