冷冻肿瘤的特异性免疫效应初步观察

本文用实验性肿瘤免疫模型以探讨冷冻因素对肿瘤治疗的作用。应用纯系C_(57)Bl/6小鼠和艾氏腹水癌株及S_(180)A瘤株。随机分五组。初步实验证明:1.体外冷冻瘤细胞经二次免疫以同种活瘤细胞攻击其保护率为92.3％,用异种活细胞攻击其保护率为0％,而自然死亡瘤苗免疫则无特异性保护作用。说明冷冻因素可能是暴露和保存肿瘤特异性抗原的有效方法。2.免疫组小鼠的脾匀浆组织学观察:表现为脾脏T细胞依赖区增生及非特异性酯酶阳性细胞上升。又从组织学及超微结构证明:可见吞噬细胞活性加强和瘤细胞变性坏死等均提示细胞免疫反应性增强。     

正常家兔冷冻前后免疫功能探讨

本文报道78只3800克左右之正常家兔,按配伍组设计法,分为冻前,冻后7天,30天三组,分别抽血检测免疫功能,包括蛋白电泳,细胞免疫,体液免疫,补体系统。经方差分析及秩和检验,其中白蛋白,ERFT,ANAE,IgG,IgM,IgA,G_3,Gu50,P皆<0.01,差异有显著性,结果提示,冷冻对正常家兔产生了免疫反应。虽然,冻后个别指标有短暂抑制,但可恢夏。冷冻正常家兔后,产生的免疫反应仍属有利的。     

液氮冷冻10例皮肤癌前后免疫功能及疗效观察

本文报告10例皮肤癌冷冻前后免疫功能及疗效。冻前G_3、IgG、IgM、ANAE、ERFT低值,冻后7天、30天上升,经方差分析及秩和检验统计学方法进行比较P<0.05及P<0.01,差异有显著性。提示冷冻对皮肤癌免疫功能施加了有利的影响。 冷冻治疗已广泛应用于良性及恶性疾病,本文报告从1992年至1994年治愈10例皮肤癌,其中3例鳞状细胞癌,7例基底细胞癌。随访2至8年,2例鳞状细胞癌痊愈后4年,分别死于其它疾病、糖尿病及肝硬化,死前无复发;另1例痊愈后3年复发,复发率10％,幸存率70％。因此,冷冻治疗皮肤癌有良好疗效。     

液氮深冷保存组织培养细胞

组织培养细胞可长期冻存于液氮中,而不改变其性状。本文报导了组织培养细胞进行液氮冻存时,不同保护剂和冷冻程序对细胞的保护作用。结果表明,在冷冻过程中用二甲基亚砜作保护剂对细胞的保护作用比甘油更好,冻存后细胞存活率可达90％以上:实验比较了二种不同冷冻程序时细胞存活率,认为4℃-液氮气态-液氮的冷冻程序对细胞损伤较小。根据实验结果,我们冻存了二株人二倍体细胞和几系传代细胞,这些冻存的细胞,复甦时细胞存活率在61.9～93.2％,复甦的细胞96.8％可复活生长成单层培养。     

液氮冷冻所致日本白兔皮肤组织病理学及酶组织化学改变

冷冻治疗引起细胞损伤和死亡之机理及主要因素尚未明了,仅有很少文献报道,以形态和功能相结合的酶组织化学方法研究冷冻疗效。本文报告液氮冷冻日本白兔皮肤,于不同时间取材,动态观察冻后组织病理及十三种酶组织化学改变。结果表明:30分钟后,出现典型凝固性坏死,冻后2小时,出现典型酶自溶特征、细胞于冷冻期已死亡。临床上将冷冻分为快速和慢速两型,根据临床标准,本实验属快速冷冻范畴,但从形态及酶活力改变而言,细胞脱水和固缩现象,属于慢速冷冻,因此,临床对此两型分类,值得进一步探讨。脱水是细胞损伤和伤亡之最突出因素,因此,临床宜采用使细胞长期处于超冷状态和反复冻融法。引起细胞严重脱水,致死性损伤,以获最佳疗效。     

冷冻治疗血管瘤220例分析

目前冷冻治疗血管瘤已成为重要的手段。我院从1983年3月至1986年10月用液氮冷冻治疗220例,总结如下: 一、临床资料男,99例;女,121例。最小30天,最大63岁。以30天至12个月最多135例,占61.36％。单发瘤体201例,占91.36％。多发瘤体19例,占8.62％。瘤体总数272个。瘤体最小为     

申克氏孢子丝菌的形态学及低温生物学研究

观察了在沈阳地区分离培养的申克氏孢子丝菌的超微结构和繁殖方式,并对实验菌株进行了低温生物学研究。结果发现该菌株与既往文献中报道的美国、日本及北京的同种真菌具有不同的结构和繁殖方式,即该菌株具有膨大的、呈营养型发育的假单轴状分生孢子柄,能够连续产生分生孢子,故可鉴定为申克氏孢子丝菌,而易与无此种分生孢子柄的侧孢霉属相鉴别;实验菌株具有两种繁殖方式,即全壁芽殖型发育和全壁菌体型发育;冻融对实验菌株具有损伤作用,两次冻融时细胞损伤加重,冻融后再培养生长的该菌株的芽殖现象,随冻融条件的加深而减少,细胞活性降低,从而为冷冻疗法治疗孢子丝菌病提供了初步的理论依据,并可推测反复冻融法较一次冻融法疗效更佳。     

液氮冷冻治疗睑板腺癌10例

本文报告10例经病理活检证实的睑板腺癌、经手术切除后,再对未切除干净的残留瘤组织,使用液氮冷冻治疗。经1至5年的随访观察,其中七例愈合良好,无复发,3例复发病人经第二阶段冷冻治疗、病情稳定。     

冷冻与厌氧棒状杆菌菌苗对Lewis肺癌免疫治疗的初步观察

本文叙述冷冻外科和厌氧棒状杆菌菌苗治疗 Lewis 肺癌的动物实验。Lewis 肺癌接种于纯系 C57BL/6小鼠。一周后将小鼠分成4组:对照组;单纯菌苗组;单独冷冻组和综合治疗组。初步结果如下:1.生存率:对照组0%;菌苗组77%(P>0.05);冷冻组94%(P<0.01);综合组100%(P<0.01)。显然综合组疗效最佳。2.抑瘤率:对照组0%;菌苗组40%;冷冻组100%;综合组100%。说明冷冻组和综合治疗组疗效最佳。3.病理变化:综合组在原接种处未见肿瘤而肺部病灶可见免疫反应。以上提示,冷冻与菌苗治疗 Lewis 肺癌的动物实验,不但能抑制原发肿瘤还能防止肺部转移。至于是免疫因素还是物理因素,有待于深入探讨。     

小鼠桑椹期胚胎库的建立

在研究过程中,采用慢速和快速两种降温程序冻存小鼠桑椹期胚胎,两种方法都获得成功。从1987年8月至1991年底,共收集小鼠桑椹胚胎15900余枚,11个品种品系在液氮中进行冷冻保存。保存时间7个月至5年。取少量胚胎解冻后,24小时培养存活率是50——82.11％。冷冻胎解冻后移植产仔率达6.67——36.36％。对部分冷冻胎进行电镜观察和图象仪定量分析,证明其形态结构、图象定量分析与鲜胎无差别。对冷冻胎解冻后移植生出的小鼠进行遗传检测,证明其生化位点没有变化。对冷冻胎繁殖的后代进行有关生物试验,证明与原品系正常繁殖的小鼠实验结果一致。     

冷冻动物实验与516例冷冻治疗的体会

从1973年2月,我们用BY-Ⅱ型冷冻治疗机进行了如下动物的各种冷冻实验: 1.在狗、兔的唇、舌及皮肤应用各种不同的冷冻方法和冷冻时间作了局部组织测温记录; 2.分别对复温后10分钟、3天、14天的冷冻组织取其标本进行组织学研究。从1974年2月至1980年5月,我们开展了液氮冷冻治疗口腔和颌面部良性和早期恶性病损共516例,获得较满意的疗效。     

液氮低温冷冻治疗子宫颈息肉止血效应及疗效探讨

叙述了应用切冻法(即手术切除后再用自行设计的长蕊探头进行液氮低温冷冻)治疗子宫颈甚肉145例。通过测试观察，证明止血效果好，术后毋需压追止血，治愈了以往认为难以经阴道彻底治愈的蒂粗短附着于宫颈管中上段多次复发的息肉，对42例术后三个月至一年半观察证明，一次治愈率为93％，二次治愈率为100％，且患者无痛苦，无宫颈瘢痕狭窄，不影响分娩，对需要生育的患者应列为首选疗法。     

高强混凝土材料细观冻融损伤与抗压强度的关系

为研究高强混凝土冻融损伤机理及其与抗压强度之间的关系,采用RapidAir结合金相显微镜的方法,实现对混凝土细观冻融损伤的连续观察,探究了细观结构对冻融的敏感程度以及细观破坏对宏观破坏的影响规律。结果表明:对高强混凝土而言,较低的含气量和较大的气泡间隔系数并不意味着较差的抗冻性;孔隙群的冻融响应敏感,且微裂缝出现较早,该区域的缺陷增长能与冻融前期混凝土抗压强度线性下降很好地对应,但此时混凝土的抗压强度下降并不明显;相对孤立的孔和砂浆与粗骨料的界面过渡区较不敏感,这些区域出现损伤后,混凝土的抗压强度逐渐非线性下降,预示着混凝土即将冻碎。     

液氮冷冻治疗后免疫状态的探讨

本文观察液氮冷冻治疗慢性宫颈炎48例冷冻前后IgA,IgG,IgM.及补体数值的变化.其中21例测定淋巴细胞转化率及活性玫瑰花结,总数玫瑰花结的冷冻前后变化数值。冷冻治疗后仅低值组的IgG数值从冷冻后2天起开始增加,至30天达高峰(p<0.01)。其余各组数值冷冻前后比较均无显著差异。说明冷冻治疗良性疾患,能使其低值之免疫恢复正常,而不刺激正常之免疫功能超过正常。     

冷冻治疗后之免疫反应观察

目前,国内外学者对肿瘤冷冻免疫进行了临床观察与动物试验,据报导认为冷冻不仅有局部治疗作用,且具有增强全身免疫功能的作用。1959年 Bory 氏报告冷冻对肿瘤不仅有麻醉、凝固及破坏组织作用,在复温后残余的肿瘤组织可产生免疫物质而抑制肿瘤生长。Bory 氏指出;冷冻治疗免疫机制:     

冷冻治疗口腔颌面部恶性肿瘤和癌前病变的近期观察

本文介绍了我们从1979年3月以来,经冷冻治疗的38例恶性肿瘤和癌前病变的近期疗效,随访3个月至2年,恶性肿瘤原发灶控制率94.4％,近愈率83.3％,癌前病变近愈率85％。说明冷冻治疗对早期恶性肿瘤和一些癌前病变有肯定疗效,它为该类肿瘤又提供了一个新的治愈途径。但是,只有严格掌握冷冻治疗适应症和治疗条件,并且积极地采取综合治疗和术后严密观察,才能提高恶性肿瘤和癌前病变的冷冻治愈率和生存率。     

~3H—TdR和~3H—亮氨酸测定和观察腹水癌细胞冷冻后的功能变化

我们对小鼠艾氏腹水癌细胞经过不同低温冷冻后的~3H—TdR 和~3H—亮氨酸的参入量进行了研究。并且初步探讨了冷冻杀伤对DNA 和蛋白质代谢功能的影响。将艾氏腹水癌细胞冷冻到-20℃以下,维持3分钟,反复冻融3次,结果表明放射性计数极低,说明癌细胞的活力已经下降。但是0℃和-10℃组的~3H—TdR参入量和未经冷冻的对照组没有明显差别。-10℃组的~3H—亮氨酸的参入量已有明显降低,可说明低温对蛋白质代谢的影响比DNA 的影响更为敏感。本文对冷冻剂量不足有无明显加速肿瘤生长的可能性,作了简短的讨论。     

国外冷冻治疗免疫与临床的探讨

近十余年来,国内外学者对冷冻免疫与临床观察作了大量工作,其中国外方面有:1983年8月16届国际制冷大会,有11篇论文专题讨论冷冻免疫。Cahan 氏将植入癌性肉瘤的鼠,冷冻坏死后再植入该肿瘤,结果不生长肿瘤,解剖时发现植入部位有良性囊肿。Moore 在冷冻前、中、后采取血请标     

硅烷防水剂改性CNT/水泥基复合材料的抗冻分析

通过采用3因素3水平的正交试验方法分别考察水灰比(W/C=0.3、0.32、0.35)、碳纳米管(CNT)掺量(wCNT=0.1%、0.2%、0.3%)、KH550掺量(wKH55=0.1%、0.3%、0.5%)对硅烷防水剂改性CNT/水泥基复合材料(rCNTRC)试件抗冻融破坏的影响。通过快冻法分析质量损失率(MLR)、相对动弹模量损失(RDM)指标测试rCNTRC的抗冻融循环能力。结果表明:W/C=0.32,wCNT=0.3%,wKH55=0.1%的抗冻性能最好,经150次冻融循环后,F10组的rCNTRC试件的MLR和RDM分别降低1.05%和18%左右。为发展抗冻性能优良的水泥基本征传感器提供了可能。     

生物样本速冻装置冷台模拟研究

在低温生物学及转化医学等研究中需要冷冻复苏后的样本具有较高的成活率,冻存装置是保证其质量的重要一环。本文设计了以80 W斯特林制冷机为冷源的新型样本速冻平台,并基于COMSOL Multiphysics有限元模拟软件对冷台结构进行了模拟分析,结果表明：管间距对样本降温速率无显著影响;冷台高度对样本冷冻过程中的降温速率及温度均匀性影响较大,其中模拟四组样本效果最好的是H=25mm,比样本高度略低;此外,冷台半径越小,样本降温速率越快,半径越大管内温差相对越小,但不同半径之间差距较小。 后续根据模拟结果提出了冷台设计的优化改进方案。本文为以后更大功率及不同体积样本的冷台设计提供了参考。