双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

菜籽粕分步酶解制备水解产物的研究

以脱脂菜籽粕为原料,水解度为考察指标,采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶分步酶解法制备复合氨基酸及小肽等水解产物。通过正交试验确定碱性蛋白酶的最佳酶解工艺参数为：温度50℃、pH10.5、加酶量3250U/g、液料比15:1、时间1.5h;中性蛋白酶的最佳酶解工艺参数为：温度45℃、pH9、加酶量4500U/g、时间2h。制备的复合氨基酸及小肽等水解产物总水解度和氮收率可达25.66% 和86.8%;水解产物在pH3～7 范围内,氮溶解指数高于72.19％。三氯乙酸氮溶解指数达85.67%,且产物中植酸、单宁等主要的抗营养因子的含量明显降低。     

牛骨蛋白分步酶解制取胶原多肽螯合钙的研究

以富含胶原蛋白和有机钙的新鲜牛骨为原料,在采用正交试验确定胃蛋白酶(pepsin)适宜水解条件的基础上,通过添加A1398中性蛋白酶(neutral protease)结合三因素二次旋转试验方法对水解牛骨蛋白制备胶原多肽钙的工艺进行优化。结果表明:先用胃蛋白酶在pH1.5,料液比1∶30,E/S5∶000U/g(蛋白质),温度37℃,酶解3h,再调节pH值至7.5,E/S3000U/g(蛋白质),温度50℃,酶解40min,螯合率最高可达98.36%。     

双酶分步酶解制备杏仁蛋白酶解物的工艺

以杏仁粕为原料,经脱脂和提取蛋白后,选用酶法制备杏仁粕蛋白酶解物。在3种蛋白酶单一酶解工艺条件的研究基础上,研究双酶分步酶解制备杏仁粕蛋白酶解物的最佳工艺条件。结果表明,调节pH 9,温度40℃,按酶添加量4 000 U/g加入碱性蛋白酶酶解90 min,灭活后,调节pH 5.5,温度50℃,按酶添加量4 000 U/g加入木瓜蛋白酶再酶解90 min,在这种条件下蛋白酶的酶解效果最佳,水解度达63.04%。     

不同工艺条件对芝麻蛋白酶解效率的影响

目的研究不同酶解工艺条件对芝麻蛋白酶解效率的影响。方法采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对芝麻蛋白进行单酶、双酶同步、双酶分步酶解,以水解度为指标对酶解效率进行分析。结果酶解效率最高的工艺参数为:碱性蛋白酶的加酶量为2667 U/g,温度65℃,pH为9,酶解时间为2 h;木瓜蛋白酶的加酶量为1333U/g,温度60℃,pH为7,酶解时间为2 h,得到的最大水解度为27.12%。在底物浓度为0.005 g/mL和加酶顺序为先碱性蛋白酶后木瓜蛋白酶的条件下,酶解效率达到最大值。结论双酶分步酶解的效率要高于单酶酶解和双酶同步酶解,酶的加入顺序和酶解参数也显著影响酶解效率。     

双酶分步水解制备菜籽蛋白肽

实验选取Alcalase 2.4 L碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶分步水解菜籽蛋白。结果表明双酶分步水解制备菜籽肽的最佳工艺为Alcalase碱性蛋白酶在pH值9.5,温度55℃,底物质量分数3%,酶活性5 500 u/g条件下酶解5.5 h,水解度为21.14%,再用复合风味酶在pH值6,温度50℃,酶活性900 u/g条件下继续酶解3 h。单因素试验和正交实验研究粗肽液用活性炭脱色的优化条件为:在活性炭质量分数1.5%,pH值4.5,温度55℃条件下脱色50 min,脱色率达32.15%,氨基酸损失率为25.15%。     

分步酶解猪骨粉提取猪骨素的工艺研究

本文以三氯乙酸可溶性氮(SN-TCA)的含量与水解度(DH)为测定指标,研究了中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶复配后与风味蛋白酶分步酶解猪骨粉的工艺,优化了复合酶的最佳配比和酶解工艺参数。研究结果表明,第一步酶解三种酶的最佳配比为中性蛋白酶添加量5000 U/g、胰蛋白酶添加量4420 U/g和木瓜蛋白酶添加量3000 U/g,此时所得SN-TCA的最大含量为52.6%;复合酶最优的酶解工艺参数为酶解温度43.4℃、酶解时间6 h、pH 7.6、加酶量0.31%、料液比1:5.4,此时SN-TCA含量最高为55.42%;第一步酶解液灭酶后进行第二步酶解,保持体系料液比和pH不变,加入风味酶酶解温度为45℃、酶解时间为4 h、加酶量为0.4%,此时酶解效果最好,水解度可达到13.71%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

菜籽清蛋白双酶分步酶解的工艺研究

以菜籽清蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和未瓜蛋白酶对其进行双酶分步水解.在单因素实验的基础上,采用正交实验对水解条件进行优化.结果表明:在最适底物浓度3.5%条件下,先用4000U/g碱性蛋白酶于pH8.0、55%下水解3h后.再用3000U/g木瓜蛋白酶于pH5.5、50%下水解3h,菜籽清蛋白的水解度达到加.17%,氮溶解指数为90.89%.     

双酶协同水解乌贼内脏的工艺条件研究

以乌贼内脏为原料,利用5种蛋白酶对其进行水解,从中选出水解效果较好的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,并确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解乌贼内脏的最佳工艺。结果表明:木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3∶1,总加酶量为6000U/g;水解温度为50℃;固液比为1∶3;水解时间为7h;pH值为6.5,所得乌贼内脏水解液的水解度可达24.83%。所得酶解产物经Aglient 1200高效液相色谱分析,共检出17种氨基酸,氨基酸总量达57.44%,其中必需氨基酸含量占总氨基酸含量的41.90%,氨基酸比例均衡。     

酶法降解蔗渣制备低聚木糖酶解特性的研究

响应面优化酶解条件:加酶量0.82%,粗木聚糖浓度8.4%,温度46℃,水解时间4.5h;低聚木糖得率43.55%;薄层分析初步确定有木二糖、木三塘、木糖;红外光谱分析产物具有低聚木糖结构特征;液相色谱确定产物以木二糖为主,含量达85%。     

酶法提取辣椒素酶解条件的研究

对酶法提取干辣椒素的酶解条件进行了研究。考察了酶解温度、酶解液初始pH值、酶解时间和酶用量对辣椒素产量的影响；确定了酶解的最优条件为：酶解温度为45℃，酶解液初始pH=5．4，酶解时间为3h，酶量为7．5m/g辣椒；对酶法提取干红辣椒中的辣椒素与传统丙酮浸提法进行比较，结果表明在一定条件下，酶法提取工艺比传统丙酮浸提法辣椒素产量提高了30％。     

复配纤维素酶组分对酶性能的影响

采用CMC酶活法对复配纤维素酶中的组分山梨醇、苯甲酸钠、氯化钠等试剂进行测试，分析其对酶性能的影响，发现一些组分能促进纤维素酶的催化反应，为纤维素酶的复配及应用提供指导。     

水酶法提取核桃油工艺研究——酶解和离心参数确定

主要研究了水酶法提取核桃油的酶解和离心工艺。在单因素试验基础上,通过正交试验研究了酶解温度、pH、酶的配比、料液比对清油提取率的影响。此外,还研究了离心机的转速和离心时间对清油提取率的影响。研究结果表明,酶解最适工艺条件为酶解温度60℃,蛋白酶/淀粉酶为1∶1,酶解pH6,料液比1∶5;在最适酶解条件下,离心条件为8 000 r/min离心50 min时,核桃油的清油提取率可达到50%;最佳离心参数为离心时间50 min,离心转速14 000 r/min,在此条件下,清油提取率可达到80%。     

不同酶解条件下酪蛋白酶解产物特性的阶段性研究

以底物浓度（[E]）、酶用量（[E]/[S]）、水解温度（T）、水解时间（t)和pH值5个因素作为因变量，采用五元二次正交旋转组合设计确定酪蛋白的水解条件，分析了不同酶解条件对酪蛋白水解度、蛋白回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量的影响。结果表明，在不同酶解条件下获得的酶解产物的水解度、蛋白质回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量差异较大，且酶解产物的水解度与蛋白质回收率、三氯乙酸氮溶解指数、氨基氮含量间均呈显著相关关系。     

风味蛋白酶水解制备豌豆蛋白抗氧化酶解产物工艺条件优化

采用风味蛋白酶水解豌豆蛋白,对制备豌豆蛋白酶解产物清除DPPH.清除率进行研究;通过单因素实验和响应面回归分析,得到制备酶水解产物最佳酶解工艺条件:酶解温度48.8℃、酶解时间3.1 h、pH 5.5、加酶量4.0%、底物浓度6.0%,在此条件下,风味蛋白酶酶解产物对DPPH.清除率为60.10%。     

Novel enzymatic synthesis of oligosaccharides

Industrial applications of enzyme catalysts are mostly hydrolysis reactions. But increasing attention is given to enzymatic synthesis reactions. The possibility of obtaining efficient synthesis reactions without involving costly cofactors is illustrated by examples taken in the field of oligosaccharide production.

Three main approaches are considered:

• reversion of hydrolysis reactions, by shifting the position of the reaction equilibrium,

• “transhydrolytic”; reactions, using the transferase activity of hydrolytic enzymes,

• transfer reactions, catalyzed by transferase enzymes.

The respective advantages and drawbacks of these three approaches are compared.

The oligosaccharides thus obtained are of interest in different fields of application: food and feed ingredients, pharmaceutical and immunological products, cosmetic additives, for example.     

酶的人工修饰

酶的人工修饰可改变酶的理化性质和生物活性,本文介绍了几种酶人工修饰的方法,分析了方法中存在的问题及其发展方向。     

乳脂酶法水解产物的微胶囊化

用喷雾干燥法对乳脂酶法水解产物进行微胶囊化,考察了乳化温度、加水量等因素对乳化液稳定性、粘度的影响,通过正交实验确定了最适条件为:加水量50%、乳化剂添加量2%、心壁比30%。     

酶解骨蛋白的研究

介绍了骨蛋白及其水解物的营养和生理功能、酶解利用骨蛋白的主要工艺以及蛋白水解物的脱苦方法。