甘油对冷冻干燥保存红细胞抗氧化酶活性的影响

为研究甘油对冷冻干燥保存红细胞的作用机制,测定不同时期冷冻干燥保存-复水的红细胞回收率及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的酶活性.结果显示,保存在25℃下,前90天内的SOD、GSH-Px与CAT的酶活性变化不大,酶活率保持在90%以上;随保存时间延长,180天后细胞回收率由初始的83.5%降低至48.5%,SOD、GSH-Px、及CAT的酶活率分别降低了25.6%、21.5%和18.4%.本实验发现保存过程是引起冻干红细胞SOD、GSH-Px、及CAT酶活性下降的主要原因.     

甘油预处理对红细胞冷冻干燥保存作用的实验研究

探索使用甘油作保护剂提高人体红细胞冷冻干燥保存效果的可能性。甘油预处理红细胞的目的是增加细胞质浓度,减小细胞的冷冻损伤。实验分为3组:新鲜对照组、20%甘油组与40%甘油组,冻干保存前后分别检查红细胞相关指标。结果表明,20%与对照组无显著差别;40%甘油组的冻干细胞回收率与血红蛋白回收率分别维持在冷冻干燥前的55.37±4.26%和53.49±3.85%,非常显著高于对照组(P<0.01);渗透脆性与超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),但与新鲜红细胞无显著差异。研究结果为使用甘油作红细胞的冻干保护剂提供了理论基础。     

胞内海藻糖对红细胞冷冻干燥保存效果的影响

冷冻干燥是长期保存人体红细胞最理想的方法之一。利用孵育的方法将非渗透性保护剂海藻糖载人人体红细胞中,以含海藻糖的保护剂对红细胞进行冻干保存实验,研究胞内海藻糖浓度对红细胞冻干保存的影响。在37℃下,以不同浓度海藻糖溶液（400mM,600mM,800mM,1000mM）对红细胞孵育7h。结果表明,随胞外海藻糖浓度的增加,胞内海藻糖的浓度相应升高,试验中海藻糖浓度最高达到35mmol／L。对新鲜与孵育后红细胞在相同条件下进行冻干实验,结果表明,孵育后的红细胞冻干回收率随胞内海藻糖浓度增加而增加,表明胞内海藻糖在冻干过程中对红细胞有保护作用。     

冷冻干燥保存人脐血实验研究

尝试用冷冻干燥法来长期保存脐血和有核细胞,并对冻干效果进行比较分析.选用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖和甘露醇等作为冻干保护剂,先将样品冻结到-38℃,随后在-30℃搁板温度下进行升华干燥,最后在15℃搁板温度下进行解吸干燥.冻干后的样品用磷酸盐缓冲液复水,然后用血细胞计数板、流式细胞仪和扫描电镜进行检测.实验结果表明:在400 g/L PVP 200 g/L蔗糖 100 g/L甘露醇作为保护剂时细胞数目恢复率最高,为(75.0±4.1)%(P＜0.01),PI染色鉴定测得单个核细胞拒染率在400 g/L PVP 200 g/L蔗糖 10%胎牛血清作为保护剂时最高,为(98.57±0.68)%(P＜0.01),CD34 细胞回收率最高为35.59%.最终确定有核细胞的冻干效果比全血的要好,初步判定冷冻干燥法保存脐血是可行的.     

人脐带血全血冷冻干燥保存的初步研究

脐带血是一重要的造血干／祖细胞（HSPC）来源，有着极为广泛的应用前景。目前脐带血低温保存的方法因为成本高昂而得不到有效推广，但将冷冻干燥方法运用到脐带血的保存上则可能解决这一瓶颈问题。将样品预冻到-35℃后，一次干燥时搁板温度控制在-30℃，二次干燥时搁板温度控制在＋15℃，整个冻干过程在25小时的工艺下，通过改变脐带血中冻干保护剂组分及浓度，比较冷冻干燥后有核细胞的恢复率，得出恢复率最高（68.397％）的配方（40％PVP＋30％海藻糖＋10％甘露醇），并比较了细胞冻干前后的形态，然后将样本在常温下放置三周后进行了PI染色活性检测（89．08％）。     

人肝癌细胞Hep-G2的冷冻干燥保存初探

冷冻干燥是长期有效保存细胞的手段之一。本文以肝癌细胞Hep-G2为研究对象,选取了不同体积分数的Me2SO、丙三醇及不同质量浓度的PVP、复方保护剂进行冷冻干燥保存,筛选出最佳保护剂配方。此外,将细胞在不同摩尔浓度的海藻糖溶液中孵育,通过检测细胞回收率、存活率和24 h贴壁率,探究胞内海藻糖对细胞冷冻干燥的影响。结果表明:添加40%PVP(w/v)+10%甘油(v/v)+15%FBS(v/v)+20%海藻糖(w/v)保护剂的细胞,在复水后回收率、存活率和24 h贴壁率分别为29.58%、42.18%和18.71%,与对照组相比三项指标均得到有效提高,该种保护剂的效果最佳;当胞外海藻糖摩尔浓度为800 mmol/L时,冻干效果最好,肝癌细胞Hep-G2在复水后回收率、存活率和24 h贴壁率分别为27.81%,66.65%和33.68%,存活率和贴壁率显著高于其他组。     

蛋黄卵磷脂对冻干红细胞恢复率的影响

蛋黄卵磷脂可以用来修复红细胞细胞膜在冻干过程中的损伤.将不同浓度、不同粒径的蛋黄卵磷脂加入红细胞样品中,孵育不同的时间后冻干、复水,研究蛋黄卵磷脂浓度、粒径、孵育时间对冻干红细胞恢复率的影响.实验结果表明,蛋黄卵磷脂能够提高冻干红细胞的恢复率,当蛋黄卵磷脂的粒径为0.8μm、浓度为0.88mM、孵育时间为15min时,红细胞恢复率达到(59.7±4.8)%.     

聚乙烯吡咯烷酮和葡萄糖在冰冻干燥保存人红细胞中的效果研究

冰冻干燥（冻干）保存人红细胞在临床输血和战伤救治方面具有重要意义。一些研究表明糖类能提高细胞膜的耐干燥性。试验采用葡萄糖和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）作为主要保护剂进行红细胞的冻干保存研究。首先对影响红细胞葡萄糖吸收率的因素,如浓度、孵育温度和时间进行了优化筛选,而后将负载葡萄糖的红细胞与保护液混合并进行冻干保存。结果表明;红细胞对葡萄糖的吸收率依赖于外源葡萄糖浓度、孵育温度以及时间的变化。另外,随着PVP浓度的上升,保护液的结晶起始温度也随之下降,但过度的玻璃化不利于红细胞的冰冻干燥。试验冻干保存的红细胞再水化后的游离血红蛋白浓度低于1g／L。总之,采用PVP和葡萄糖冻干保存红细胞是可行的,但是如何降低PVP对细胞的渗透压伤害是今后研究的重点。     

食品冷冻干燥速率的影响因素分析

在实验性冷冻干燥机中建立了食品冷冻干燥的数学模型和实验研究。认为冷冻干燥机的热传递既有传导热,也有辐射热。利用所建立的数学模型解出了所需的升华时间。并对牛奶、豆腐、洋葱、芦荀、人参、牛肉、生姜、黄花等进行了试验研究。分析了影响升华速率的因素,以便缩短升华时间。     

冷冻干燥技术的应用

介绍了冷冻干燥技术及其应用.     

真空冷冻干燥残余水分监测方法概述

通过残余水分含量来判断真空冷冻干燥过程中升华干燥和解吸干燥结束点是一种直接的方法。对当今残余水分监测的方法进行总结和分析,认为湿度传感器法和介电法将成为未来的一个研究方向,而称重法若能解决传热及安装等问题,也会是一种理想的测量手段。     

冷冻干燥工艺程序自动化研究

对冷冻干燥过程中的传热传质进行分析,依据冻干塌陷原理,编制具有自适应性的逻辑公式,设置物料塌陷温度、真空仓压力和过热度等输入参数.在BSNFD05冻干机上进行测试,结果表明,在冷冻干燥过程中,按照PLC中的自适应逻辑,以高精量传感器采集的加热板温度、真空仓压力和冷阱（捕水器）过热度为控制量,通过三通调节阀、真空挡板阀和供液电子膨胀阀等执行机构,实现在冷冻干燥过程中按照逻辑判断、不断修正自动形成工艺程序,最终完成冷冻干燥.     

冷冻干燥过程中溶液冻结特性的DSC研究

利用差示扫描量热仪(DSC)研究了蔗糖水溶液的冻结特性,分析了溶液浓度和热历史对冻干过程的影响.DSC实验结果表明,过冷度和最大冻结浓缩溶液的玻璃化转变温度Tg'均与热历史有关;降温时溶液中的水分能否充分结晶受浓度和降温速率的共同影响.降温过程中的结晶热可用来确定溶液降温后的冻结水含量以及最大冻结浓缩溶液中的水分含量.     

基于图像处理优化真空冷冻干燥工艺参数

通过三因素二次通用旋转组合试验设计,考察了物料厚度、加热板温度和干燥室压力对真空冷冻干燥人参面积收缩率的影响,得出了人参面积收缩率与各因素间的回归模型.试验结果表明,影响试验指标的主要因素是物料厚度,试验因素主次排列为物料厚度、加热温度、干燥室压力.其较优组合为物料厚度为12 mm、加热温度为40℃、干燥室压力为40 Pa.     

真空冷冻干燥机节能途径浅析

真空冷冻干燥机在运行时产生较高的能耗.本文在概述真空冷冻干燥技术的基本原理和干燥过程的基础上,分析了影响真空冷冻干燥速率的主要因素,提出有效降低真空冷冻干燥机能耗的途径为:改变物料的形态和浓度、控制预冻速度和物料厚度、采用联合冻干工艺和改进真空冷冻干燥机设计,旨在为真空冷冻干燥机在实际应用中节能降耗提供借鉴.     

真空冷冻干燥超细天麻粉体的研制

真空冷冻干燥(简称冻干FD)是发展近代生物医药工程与中药现代化的关键高新技术,近年来,日本将中国名贵中药天麻制成超细粉体胶囊(粉体中心粒径D50～50μm),用来取代西药治疗失眠,取得很好效果,无毒副作用.据近年研究表明,在中药粉体的中心粒径达到10 μm～15 μm的细度以下时,人体对其有效成份的吸收率将会更好.在此研制的鲜天麻真空冷冻干燥超细粉,按粒子分布曲线(用Mastersizer-2000型激光衍射仪检测)与4000倍扫描电子显微镜检测,其粉体中心粒径高达D50=12.996μm,部分还进入亚微米级.本文对其研制方法、技术、设备及检测质量控制等作了阐述.