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研究了pH 值、温度、底物浓度、金属离子对青霉菌(Penicillium sp.)B01 所产胞外菊粉酶活性的影响以及酶活随反应时间的变化情况。结果表明,pH4.6 时菊粉酶活力最大,最适反应温度是55℃。在pH3.6~5.4 的范围内,60℃以下酶活较稳定。Ca2+ 对菊粉酶有激活作用,而Cu2+ 对其活性强烈抑制。采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对该酶粗液进行蛋白质分析,获得较清晰的6 条蛋白谱带;2,3,5- 氯化三苯基四氮唑(TTC)活性染色结果显示,只有3 条谱带表现为具有菊粉酶活性。对酶解产物用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法的分析结果,进一步证实这3 条谱带具有菊粉酶活性,并确定其主要为外切型菊粉酶,产物主要为果糖。 相似文献
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利用海藻酸钠包埋法固定青霉(penicillium)产菊粉酶,研究了最佳固定化条件及固定化酶性质,为固定化菊粉酶应用于果糖工业生产提供理论依据。结果表明:海藻酸钠浓度为4%,氯化钙浓度为1%时,固定化酶活力最高且机械强度好;加酶量越少,固定化效率越高;固定化酶与游离酶的最适pH为4.5,但固定化酶在pH4到6.5范围内相对酶活要比游离酶酶活高;固定化酶与游离酶的最适温度均为55℃,在35℃到55℃范围内两者酶活变化不大,在55℃到75℃范围内固定化酶的温度适应性比游离酶的好;在重复利用方面,将固定化酶反复利用7次,酶活仍为原酶活的50.6%。由此说明,固定化酶成本低,利用率高,在工业生产方面具有利用价值。 相似文献
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β-1,3葡聚糖酶高产菌株的筛选及其产酶条件研究 总被引:11,自引:0,他引:11
从土壤中分离筛选出一株β-1,3葡聚糖酶活较高的菌株,编号为M014,初步鉴定为木霉。研究了碳源、氮源、培养温度与时间等因素对M014产酶的影响。实验结果表明,MOl4在含3%茯苓粉、0.5%酵母膏及一些无机盐的液体培养基中(pH6.0),于30℃,150r/min振摇培养6d,β-1,3葡聚糖酶活最高,达到4.95U/ml。另外,还就β-1,3葡聚糖酶的酶解条件进行了研究,结果显示,β-1,3葡聚糖酶的最适反应pH为4.5,最适反应温度为60℃.粗酶液在40℃和50℃保温12h,酶活基本稳定,最适反应温度为60℃保温时,酶活迅速下降。 相似文献
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菊粉酶产酶菌株的诱变选育及产酶条件的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以克鲁维酵母(Kluyveromyces)野生株为出发菌株,经紫外线处理筛选到一株产菊粉酶较高的突变株UV-G-40-3,并对其进行了发酵条件的研究,在菊糖3%、蛋白胨3%、酵母膏1%、pH5.5、36℃,装量30ml/300ml,240r/min摇瓶培养33h,酶活比野生株提高近一倍,为13.9U/ml。 相似文献
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黑曲霉Aspergillus niger No.26菊粉酶的研究 总被引:10,自引:2,他引:10
通过筛选菌种,分离出3株菊粉酶活力较高的菌株,对其中No.26菌株经过培养基组成的研究,酶活力达37.1u/ml。比原活性6.7u/ml提高5.5倍。经纸上层析鉴定,在菊粉水解过程中,果糖逐步增加,未见中间产物生成,并有很强的水解蔗糖为果糖和葡萄糖,以及水解棉子糖为果糖和蜜二糖的能力。因此该酶主要为外切型菊粉水解酶。该酶在55℃以下较稳定,最适pH为3~5,其低而宽的pH范围有防止微生物污染的能力,具备工业应用的良好性能。 相似文献
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Fernanda V. A. Risso Marcio A. Mazutti Helen Treichel Fátima Costa Francisco Maugeri Maria Isabel Rodrigues 《Food and Bioprocess Technology》2012,5(1):331-337
This work is focused on the synthesis of the fructooligosaccharides (FOS) from sucrose using free inulinase from Kluyveromyces marxianus NRRL Y-7571 in aqueous and aqueous–organic systems. The most significant variables for the aqueous–organic system were identified
using a fractional factorial design. The evaluated variables were the temperature, pH, sucrose concentration, inulinase activity,
aqueous/organic ratio, and the polyethylene glycol concentration. The use of sequential experimental design methodology was
shown to be very useful in the optimization of the FOS synthesis by inulinase either in aqueous or aqueous–organic systems.
For the aqueous–organic system, the maximum Y
FOS reached was 16.7 ± 1.1 wt.% with the following operational conditions: temperature of 40 °C, enzyme activity of 4 U mL−1, organic solvent/total system ratio of 25/100, pH of 6.0, and sucrose concentration of 55%. In the aqueous system, the maximum
conversion obtained was 12.8 ± 1.0 wt.% under the following conditions: 40 °C, pH 5.0, 55% sucrose, and inulinase activity
4 U mL−1. 相似文献
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为实现酶法水解菊糖制备高果糖浆,从宛氏拟青霉(Paecilomyces variotii)XS27发酵液中分离纯化菊粉酶,并对其酶学特性进行研究。发酵液经过硫酸铵盐析、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow层析、Sephacry S-100分子筛过滤层析,得到电泳纯的菊粉酶,比活力327.4 U/mg,纯化倍数37.85。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳测得菊粉酶为单一亚基的酶蛋白,分子质量62.0 kDa。菊粉酶能在较宽的pH值范围(3.5~6.5)内保持高活性,最适作用pH 4.0。在温度40~65 ℃之间,酶活力较高,最适作用温度为60 ℃。薄层色谱分析显示菊粉酶水解菊糖最终产物为果糖。以菊糖为底物,酶的Km和Vmax分别为5.93 μmol/L和75.18 μmol/(L·min)。Mg2+、Mn2+、Ca2+对酶有显著激活作用,Ba2+、Ni2+和Hg2+对酶有一定抑制作用。β-巯基乙醇、二硫苏糖醇和乙二胺四乙酸对酶有抑制作用,表面活性剂(十二烷基硫酸钠、Tween 80和Trition X100)以及乙醇对酶活力没有影响。从宛氏拟青霉XS27发酵液中分离纯化的菊粉酶在强酸高热的环境下具有强活性和稳定性,对表面活性剂乙醇有高耐受性,适合于果葡糖浆的工业化生产。 相似文献
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克鲁维酵母突变株UV-G-40-3菊粉酶性质的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
研究了克鲁维酵母突变株(Kluyveromyces-UV-G-40-3)所产菊粉酶的分布为胞外酶∶胞壁酶∶胞内酶比是5.7∶1.6∶1。该酶S/I为5.3,最适温度为50℃,最适pH为4.5,在50℃以下、pH4.5~8的范围内比较稳定,4℃贮存稳定性好,14d后仍保持76%活力,为外切型菊粉酶,酶解粗菊糖(洋姜提取液)活性为纯菊糖的4倍。 相似文献
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通过固体分离培养基的分离培养和牛奶琼脂鉴别培养基的鉴别初筛,从烟草(Nicotiana tabacum L.)的初烤烟叶中分离到一株嗜热产蛋白酶菌株,编号为YYFG3,其生长温度范围是30℃-65℃,最适生长温度55℃左右,对pH的耐受范围是5-9,最适范围是6-7;在发酵产酶培养基中,56℃、180 r/min条件下发酵32 h的蛋白酶活力达到最大值35.3 U/mL,故将YYFG3定性为产蛋白酶高温菌株。通过光学显微镜和扫描电子显微镜对该菌株形态特征的观察、相关生化特性的测定、16S rDNA的克隆测序以及对菌株分子遗传进化树的构建,确定菌株YYFG3隶属于土芽孢杆菌属Geobacillus,暂将其命名为Geobacillus sp.YYFG3。菌株YYFG3可作为产蛋白酶高温微生物诱变育种和全基因组育种的良好材料,具有良好的开发应用潜力。 相似文献