PDMS-玻璃微流控芯片上附着态HepG2细胞低温保存条件研究

微流控芯片上细胞样本的低温保存能够显著缩短芯片上细胞实验周期、降低实验成本,有助于芯片上细胞实验的广泛应用。本文对PDMS-玻璃微流控芯片上附着态HepG2细胞的低温保存条件进行了研究,包括降温速率、低温保护剂、低温存储时间及存储温度,确定了芯片上附着态HepG2细胞的低温保存方案。结果表明：采用不同的冷却环境、冷却介质,芯片微通道内能够实现0.36~35.12 ℃/min的降温速率;芯片上附着态HepG2细胞低温保存存在最优降温速率0.5~1.5 ℃/min;﹣20 ℃或液氮表面上方40 cm处冷却环境与﹣80 ℃冷却环境组合冻存能够显著提高芯片上冻存7 d的HepG2细胞存活率;体积浓度为20%的DMSO与0.1 mol/L海藻糖联合能够显著提高芯片上冻存HepG2细胞活性。经过上述冻存条件优化后,芯片上附着态HepG2细胞冻存7 d活性超过90%。     

骨髓,胎肝和外周血造血干细胞的低温生物效应

用生物降温仪、低温显微镜和细胞化学、细胞培养等技术研究证明,低温保存液的相变温度随降温速率的加快而增高,以1℃/min降温时,其相交点在—13.9℃,骨髓细胞浓度对相变温度无影响。液氮(—196℃)冻存后,外用血淋巴细胞体积无明显变化,其糖原和非特异性酯酶含量明显降低。胎肝细胞冻存1098天染色体正常,冻存930天后氧耗量与新鲜值无明显差别,冻存7天后超微弱发光强度为新鲜值的92％。小鼠骨髓和皮肤冻存后,移植免疫排斥反应降低。人骨髓冻存3～300天,胎肝冻存1～1257天,外周血冻存6～53天,其CFU—GM回收率分别为68.9％、62.0％和77.3％。造血细胞活力不随保存时间延长而降低。     

细胞冻融策略优化及设备研究进展

低温冷冻保存是细胞治疗、辅助生殖等生物医学应用的使能技术之一.冷冻和复苏过程中,胞内外冰晶的形成和生长会对细胞产生损伤;其中,升降温速率又与冰晶的形成、生长有密切关系.本文在阐述程序化慢速冷冻和玻璃化快速冷冻两种细胞冻存方式及冷冻损伤两因素假说的基础上,对细胞特性、细胞外环境和升降温策略三个影响细胞冻存效果的要素进行分...     

醇类保护剂对猪软骨低温膨胀过程的作用

在对关节软骨进行低温保存时,常常会观察到低温断裂现象,然而对其生物力学性能的低温损伤机理至今仍不甚明确。采用热机械分析仪,在0 ℃到-60 ℃的温度范围内,不同慢速降温速率下,研究了四种醇类低温保护剂对猪关节软骨热膨胀行为的影响。结果表明：降温过程中,软骨细胞外存在的热膨胀现象,导致关节软骨产生了较大热应力;当添加浓度较高的乙醇和乙二醇时,降温速度越快,关节软骨产生的热应力越大,因而,降温速度越慢,越适合关节软骨的低温保存;而添加1,2-丙二醇和甘油时,则存在最佳降温速率(30C/min),最佳降温速率下的软骨产生的热应力最小。同时分析结果表明,四种醇类低温保护剂中,甲基化高的醇类保护剂的热膨胀保护效果更优。     

人胎肝细胞的低温保存和临床应用

102例人胎肝细胞在液氮中(—196℃)保存1—1257天后,平均细胞回收率、CFU—GM回收率和台盼兰拒染率分别为98％、71％和62％。18例再生障碍性贫血患者输注了冻存胎肝细胞,9例显示了较好的治疗效果;2例白血病患者冻存胎肝移植成功;冻存胎肝细胞输注对改善肝脏疾病的临床症状有一定好处。     

新型卵母细胞载体降温速率的实验研究

降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响。本文采用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温速率,结果发现载体的降温主要通过对流换热实现;载体横卧时,载体的气孔方向与液氮垂直时降温速率高于气孔与液氮相切时的降温速率;将载体直接插入液氮时的降温速度大于插入后左右摆动的操作方法的降温速率;当采用载体倒置插入时,降温速度高于采用载体正置和横卧的降温速率。当采用载体倒置直接插入时,降温速率最高,可以达到54572±1338 K/min,有利于卵母细胞的玻璃化保存。     

糖醇类物质对人肝细胞低温保存的影响

将传统肝细胞冻存保护剂配方中的DMSO的浓度减为5%,并添加不同浓度的D-山梨醇、木糖醇或麦芽糖醇,置于-80℃的冰箱冻存两周,两周后将细胞快速复温,进行细胞存活率、24h贴壁率以及细胞形态学的检测,并与10%浓度DMSO组对照比较。结果表明,D-山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇均对人肝细胞的低温保存有一定的保护作用,其中5%DMSO+0.4M D-山梨醇组复温后细胞的存活率、贴壁率均优于其他冻存液组,D-山梨醇与DMSO联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用。     

海藻糖和胎牛血清对人乳腺细胞HBL-100低温保存的影响

建立高质量的生物样本库至关重要,低温保存过程中保护剂的种类和浓度对样本的冷冻效果有很大影响。本文以人乳腺细胞HBL-100为研究对象,在Me_2SO含量10%的DMEM溶液中分别添加不同浓度海藻糖(0~0.3 mol/L)和不同体积分数FBS(20%~60%)。采用逐步降温法,先在-80℃冰箱中慢速降温4 h,再快速投入到液氮中(-196℃),冻存7 d后,在37℃水浴锅中快速摇晃复温。分别用台盼蓝法、CCK法和24 h贴壁率法检测细胞的成活率,结果表明:与对照组相比,海藻糖和FBS对细胞的冷冻效果都有显著影响。当海藻糖浓度一定时,FBS体积分数越高,细胞的冷冻效果越好,但不添加海藻糖时,FBS的作用不明显;当FBS体积分数一定时,三种检测指标在海藻糖浓度为0.2 mol/L时最优,且高浓度海藻糖可能会抑制FBS作用。考虑成本等因素,最适宜冻存人乳腺细胞HBL-100的冻存液为10%Me_2SO+40%~60%FBS+0.2 mol/L海藻糖。     

电子封装用高硅铝合金热膨胀性能的研究

采用雾化喷粉与真空包套热挤压工艺制备了高硅铝合金电子封装材料,测定了合金在100～400℃间的热膨胀系数值,并运用理论模型对该温度区间的热膨胀系数进行了计算,分析了高硅铝合金材料热膨胀性能的影响因素.结果表明:Si相作为增强体能显著改善Al-Si合金的微观组织与热膨胀性能,430℃热挤压下的高硅铝合金材料在100～400℃之间的热膨胀系数平均值与Turner模型很接近.     

微波复温对玻璃化冻存小鼠骨髓有核细胞活性的影响

对ICR小鼠骨髓有核细胞进行玻璃化深低温保存,在冻存1、5、10、20、30d后,骨髓有核细胞样品分别采用常规的38℃水浴复温和微波复温,即在300mL10℃水中,控制微波功率为800W,频率2450MHz,复温时间80s.检测骨髓有核细胞的功能变化,比较两种复温方法对细胞活性的影响.结果表明:骨髓有核细胞玻璃化冻存1～20d,其存活率、细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性都有下降的趋势,过氧化氢(H2O2)含量显著增加,但冻存20d后这些指标保持基本稳定,与第30d比较无显著差异(P＞0.05).微波复温组的细胞存活率,细胞内SDH、SOD的活性高于水浴复温组,细胞内H2O2含量明显低于水浴复温组.说明微波复温能够提高复温速率,对骨髓有核细胞的损伤要低于水浴复温.     

Estimation of Parameters of Universal Distribution of Moments of Failure of Products

A method is proposed for estimating the parameters of a mixture of exponential and Weibull distributions for which the accuracy of preliminary estimates obtained by graphical analysis is refined in accordance with the criterion of maximum likelihood. The efficiency of the proposed method is supported by the results of statistical modeling.     

水三相点复现的不确定度评定

水三相点是开尔文热力学温度的唯一基准点，也是ITS-90国际温标重要的定义固定点。因此，水三相点不确定度分析对整个温标的建立、温度量值传递起着至关重要的作用。近3年来，中国计量科学研究院研制出一系列高质量的水三相点容器，加强了水三相点的研究，为不确定度的分析提供了更为可靠的实验依据。同时，不确定度的分析也是客观评价新研制容器性能的一个重要指标。因此，根据实验结果对新研制容器所复现的水三相点进行了不确定度评定。评定结果表明，其扩展不确定度为0．16mK(k=2．69，P=0．99)。     

Assurance of the Uniformity of Measurements of the Power of Laser Radiation

On the basis of an analysis of the principle underlying the construction of standards and systems designed for reproduction of the unit of mean power and energy of laser radiation, it is shown that these standards consist of unified subsystems that carry the principal metrological load. By means of such a division, it is possible to realize a systems-engineering synthesis of standards with preassigned error. __________ Translated from Izmeritel'naya Tekhnika, No. 11, pp. 20–23, November, 2005.     

方波幅度的测量不确定度

介绍了用众数法评价方波幅度时的不确定度分析和评价过程;讨论了主要的不确定度来源,包括众数判别区间的影响、波形测量系统幅度测量误差的影响等等;给出了减小不确定度的主要措施,并结合一个实例,给出了方波幅度的不确定度评价结果。     

Assurance of the Uniformity of Measurements of Energy of Short-Pulse Coherent Radiation

Ways of creating unified automatized reference (calibration) and standard measurement equipment for the purpose of developing a subsystem for the assurance of the uniformity of measurements of the energy of short-pulse laser radiation are considered. __________ Translated from Izmeritel'naya Tekhnika, No. 11, pp. 24–28, November, 2005.     

水线震荡对斜拉桥拉索风雨激振稳定性的作用

从理论和试验两个方面研究了水线震荡对斜拉桥拉索风雨激振稳定性的作用。建立了拉索和水线的运动方程，应用李雅普诺夫函数给出了水线不平衡角的判别公式。设计了一种新型的带有可运动人工水线的拉索模型，并进行了风洞试验。理论和试验结果表明，水线震荡是导致拉索风雨激振具有较大不稳定范围的主要原因。试验结果证明了理论模型和分析的结果是正确的。     

二硝基重氮酚重氮化反应机理再探

文中依据杂化理论分析了亚硝酸的结构特点，主要以分子结构理论为基础，从理论上指出在ＤＤＮＰ重氮化反应中，可能是氯化亚硝酰作为重氮反应的亲电试剂，其进攻发生在氨基的氮上，从而推测了获得ＤＤＮＰ的反应历程。     

逻辑分析仪部分参数测量结果的不确定度评定

介绍了逻辑分析仪部分参数测量结果的不确定度分析评定方法,评定过程及结论,可应用在对于计量标准进行相应指标的不确定度评定分析上。     

空压机轴承箱蜗壳温度探头油封改造

由于空压机进气侧轴承箱蜗壳温度探头密封效果不好,使空压机及其后续管道受到油污染。后将温度探头的O形圈密封改为骨架油封,杜绝了轴承箱漏油问题。文章简介空压机的结构和技术参数,详细介绍了骨架油封的制作和优点。     

Calculation of the Heat of Combustion of Hydrocarbon Components of Fuels

Development is continued of the empirical method for the calculation of the heat of combustion of organic compounds and, in particular, of hydrocarbons of different structures by the additive scheme based on their chemical structure.