食品检测用木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂培养基标准物质的研制

目的 研制食品检测用木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(xylose lysine deoxycholate agar,XLD)培养基标准物质.方法 将XLD培养基各成分按比例称量、球磨后分装制成标准物质.倾注平板后观察培养基形态,检测pH.根据GB 4789.28—2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求...     

不同品牌乳酸菌国标检验MRS琼脂培养基质量比对研究

目的 考察市售5个国产品牌和2个进口品牌的MRS琼脂培养基对乳酸菌的培养效果,比较国内外不同品牌培养基的产品质量.方法 采用螺旋涂布计数的方法,对3株GB 4789.28-2013中规定的乳酸菌和9株非国标规定乳酸菌(包括标准菌株和实验室分离菌株)在5个国产品牌和2个进口品牌的MRS琼脂培养基上的生长情况进行定量测定....     

MC与M17琼脂在嗜热链球菌计数中的比对研究

目的评价国标中使用的MC琼脂与ISO标准中使用的M17琼脂在嗜热链球菌计数中的优劣。方法按照GB 4789.35-2016,使用MC琼脂与M17琼脂对2种以嗜热链球菌为主要成分的菌粉,以及含有嗜热链球菌的发酵乳,进行了计数比对。结果使用M17琼脂对菌粉和发酵乳中嗜热链球菌计数,其计数值均高于采用MC琼脂的计数值,对于2种菌粉样品和发酵乳样品, M17琼脂计数值较MC琼脂分别高出116%、89%和30%;对配对计数结果进行了t检验分析,差异具有极显著性(P0.01)。且分组数据的方差分析表明,与MC琼脂计数结果相比, M17琼脂计数结果的方差更小,精密度更高。结论对于嗜热链球菌的计数, M17琼脂在回收率、精密度和实用性方面显著优于MC琼脂。     

3个厂家即用型Baird-Parker琼脂平板性能评测

目的通过对3个厂家产品的性能评测,寻找最适宜的即用型Baird-Parker琼脂平板。方法对3个厂家的Baird-Parker琼脂平板分别进行产品外观、质量控制测试、金黄色葡萄球菌菌落形态、特征性反应和菌落计数5个方面的比较,选择适合实验室的产品。结果 3个厂家的Baird-Parke琼脂平板均符合GB4789.28-2013的质控要求,但A厂家产品不稳定首先排除,B和C厂家产品的主要区别表现在外观和菌落大小方面,综合考虑实验室最终选择B厂家产品供日常检验使用。结论不同厂家的培养基产品存在差异,运输过程中保存条件的变化也会导致产品性能方面发生变化,使用前应进行严格的筛选和质量控制。     

琼脂块法快速平板初筛米根霉L-乳酸高产菌

以米根霉(Rhizopus oryzae)CS-323为出发菌株,经过紫外线(UV)诱变后,利用溴钾酚绿平板变色圈法及高锰酸钾-溴化钾平板透明圈筛选出18株变异株.基于上述方法,设计琼脂块溴钾酚绿变色圈法及琼脂块高锰酸钾-溴化钾透明圈法,对18株变异株进行进一步筛选,经摇瓶初筛验证,琼脂块透明圈法能准确且迅速的判断菌株产酸大小,并对平板定量初筛检出高产株有较大的意义.     

计数标准微球分散及浓度对酿酒酵母计数的比较

针对计数标准微球在微生物计数中的微球聚集、使用浓度及统计数量进行分析比较。以计数标准微球和酿酒酵母ATCC9080为实验对象,研究了Tween 20、Tween 80对计数标准微球的分散效果以及标准微球浓度、统计数量对酿酒酵母计数结果的影响,并将标准微球计数结果与平板计数结果进行比较。实验表明计数标准微球在0.08% Tween 20或0.06% Tween 80中的分散效果适宜,可使分散指数为3.30。对每毫升105、106、107个酿酒酵母悬液进行计数时,统计的标准微球总数依次应不小于2 000、1 500、1 000个,统计的细胞总数分别应不小于200、400、2 600个。在每毫升105~107个酿酒酵母浓度范围,以每毫升106个标准微球最适宜,且对酿酒酵母的计数结果与平板计数结果呈线性关系（R2=0.996 9）。结果表明Tween 20或Tween 80可有效分散计数标准微球,采用分散的、适宜浓度的计数标准微球可对微生物悬液进行准确计数,明确了计数标准微球用于微生物计数的适宜参数,补充 GB/T 39730-2020标准微球使用条件。     

用于点样,计数及平板影印的综合模格设计及应用

探讨和设计了一种可以用于点样,菌落计数和平板影印的综合模格,以期为微生物平板筛选方法提供新的方法和思路。国家发明专利申请号：2007100291346。     

基于图像计数酿酒酵母的统计分析

图像计数可快速定量微生物的活细胞浓度,但对其统计参数及定量结果的可靠性研究较少。该研究以酿酒酵母为材料,研究了自行设计的微型计数板图像计数方法中异常数、中位数、平均数、图像间菌体数量的相对标准偏差等统计量与计数图像数量的关系,比较了图像计数和GB 4789.15—2016平板计数定量的相对标准不确定度,以及结果的差异性和相关性等。结果表明,酿酒酵母10⁵～10⁷ CFU/mL时,图像计数可使用中位数、平均数统计活菌数量;10⁵ CFU/mL时需计数50个图像,10⁶～10⁷ CFU/mL时计数13个图像可准确获得酿酒酵母浓度。图像计数的相对标准不确定度(0.022～0.100)小于平板计数法(0.099)。在10⁵～10⁷ CFU/mL时,图像计数与平板计数对酿酒酵母定量的结果一致。     

食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定

依据国家标准和测量不确定度的评定方法以及国际通行的普松理论(poisson theory),评定食品中大肠菌群检测结果的不确定度.通过分析影响食品中大肠菌群平板计数结果的不确定度来源,建立一种简单适用的大肠菌群平板计数不确定度评定方法.结果表明,影响食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的主要因素为取样量的不确定度、稀释倍数的不确定度、加样体积的不确定度、平板上大肠菌群数量的不确定度和煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管产气比例产生的不确定度,其中后两者产生的不确定度所占分量最大.     

雪茄烟中霉菌计数方法的适用性评价

为明确霉菌计数方法对雪茄烟的适用性, 采用孟加拉红琼脂培养基、改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基和SYMPHONY Agar快速显色培养基对13种雪茄烟进行霉菌计数, 评价3种培养基在不同接种方式条件下雪茄烟中霉菌计数结果的一致性, 并对各霉菌计数方法进行比较。结果表明:①同种接种方式条件下, 3种培养基的霉菌计数结果的一致性较好;②相同培养基条件下, 平板涂布法操作更简便, 菌落分布均匀, 典型菌落更易判读;③3种霉菌计数培养基相比, SYMPHONY Agar快速显色培养基培养周期短, 霉菌典型菌落大小均匀, 更容易计数。因此, SYMPHONY Agar快速显色培养基和平板涂布法接种方式更适合于雪茄烟中的霉菌计数。      

AOAC PetrifilmTM菌落总数测试片法与食品中菌落总数测定国标方法的比较研究

目的:确证AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片计数食品中菌落总数的检测性能.方法:对AOAC990.12 PetrifilmTM菌落总数测试片法与国家标准GB4789.2菌落总数测定法进行比较实验.在20个政府机构和食品企业实验室,对生肉、熟肉、水产品、调味品、冰激凌、原奶、奶粉和豆制品等8大类845份食品样品进行了测定.结果:AOAC 990.12PetrifilmTM方法与国标GB4789.2法检测8类食品样品的菌落总数测定结果的P值均大于0.05,无显著性差异.结论:使用AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片法检测食品中的菌落总数等效于食品微生物学检验菌落总数测定的国家标准方法.     

控制图法评定食品中菌落总数检测的不确定度

目的运用控制图法对食品中菌落总数项目进行不确定度评定。方法依据GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测方法,在保证精密度的条件下进行菌落总数的测定,基于控制图法对积累的数据进行统计和分析。结果通过建立测量值X与EWMA的叠加图及MR图,表明测量结果仅受随机效应的影响,结果符合正态性和独立性假设,计算得到扩展不确定度结果 U=0.10 lgCFU/mL。结论控制图法评定菌落总数不确定度将不确定度评估与实验室内部质量控制工作相结合,简便且易于操作,适合实验室内应用。     

3M PetrifilmTM快速测试片用于饮料中菌落总数的测定

使用3M PetrifilmTM快速测试片法（3M测试法）和滤膜法对饮料中的菌落总数进行定量测定,分析两种方法的一致性程度。选用大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、爱媛类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、Asia Siamensis、白色念珠菌和黑曲霉七种菌,对饮料样本进行人工接种并测试。实验结果显示,对于不同菌株及不同污染水平的测试,3M测试法和滤膜法的线性拟合度较好（决定系数R2均>0.95）。且3M测试片法结果回收率均>70%,RSD值（2.9%~34.3%）也均在2020《中国药典》的规定范围内,说明3M测试片法的准确度及精密度较好。对于细菌、真菌分别污染的专属性检验和不同批次的3M测试片的重复性测试中,3M测试片法的回收率>70%,且RSD值（3.6%~34.3%）均在可接受范围之内,表现出良好的专属性和重现性。使用相对正确度和精度剖面分析方法对3M测试片法和滤膜法的结果进行分析,结果显示两种方法具有较好的一致性和等效性。综合以上分析结果,3M测试片法可等效于滤膜法,进行饮料中的菌落总数测定。     

双层平板法对海产食品中副溶血性弧菌定量效果评价

评价了双层平板(DLAP)计数法对海产食品中副溶血性弧菌的定量分析效果。通过在混合菌悬液和鱼、虾、贝等生物体中人为模拟染菌,并进行冷冻受伤减菌处理,采用DLAP计数法对副溶血性弧菌处理前后的菌量变化进行分析,同时采用MPN法、BCVM平板计数法和TCBS平板计数法3种方法作为对照,运用SPSS软件分析4种方法测定结果的显著性差异(P<0.05)。试验结果表明,在理想的控制条件下,4种方法对不同基质条件中副溶血性弧菌的测定结果不存在明显差异;在菌体活力不强或受伤状态下,DLAP计数法对该菌的测定结果与MPN法在同一水平上且缩短了5d的检验周期,其准确性优于BCVM平板计数法和TCBS平板计数法,具有省时、准确的特点,适合广普应用。     

Evaluation of a Double Layer Agar Plate For Direct Enumeration of Vibrio parahaemolyticus

A double layer agar plate (DLAP) was developed according to the thin agar layer (TAL) method as a 1‐step procedure for direct enumeration of injured Vibrio parahaemolyticus cells based on the formation of unique purple colonies by V. parahaemolyticus. The DLAP was prepared by overlaying an equal volume (10 mL) of a nonselective medium (tryptic soy agar supplemented with 1.5% NaCl) onto a selective medium (Bio‐Chrome Vibrio medium). The DLAP was capable of detecting V. parahaemolyticus in mixed cultures containing non‐Vibrio bacteria. Production of purple colonies by V. parahaemolyticus on DLAP was not affected by the growth of other bacteria, even when V. parahaemolyticus was only a small fraction (5%) of the entire bacterial population. Direct plating on DLAP was found as effective as the most probable number (MPN) method for recovering heat‐and cold‐injured V. parahaemolyticus cells, which could not be detected by direct plating on Bio‐Chrome Vibrio medium or thiosulfate‐citrate‐bile salts‐sucrose agar. The DLAP offers an alternative to the MPN method for detecting injured V. parahaemolyticus cells and can be used as a simple 1‐step procedure for quick screening of V. parahaemolyticus in foods.     

鸡蛋壳表面细菌数量及种群多样性分析

采用GB 4789.2-2010菌落总数计数及Miseq测序分析物种多样性及群落结构的方法,对蛋鸡场鸡蛋壳表面细菌数量及种群结构进行研究。结果检测8组样品的菌落总数为3.79±0.67~5.06±0.75 Log CFU/eggshell±SD;获得的163214条优化序列分属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)及蓝菌门(Cyanobacteria)。8组样品普遍存在假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、泛菌属(Pantoea)、芽孢杆菌属(Bacillus)、肠球菌属(Enterococcus)细菌;而各样品分别以假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)以及肠球菌属(Enterococcus)的相对丰度最大,依次为67.89%、36.15%、68.08%、40.12%、21.59%和26.98%。试验结果表明鸡蛋壳表面细菌数量大、种群多,不同样品间存在相似性差异。鸡蛋腐败变质可能与鸡蛋壳表面细菌种群有关,有待进一步研究。     

TVB-N Correlation with Odor Evaluation and Aerobic Plate Count in Mahi-Mahi (Coryphaena hippurus)

ABSTRACT: Two groups of 6 mahi-mahi fillets, one untreated and the other dipped in a suspension of Morganella morganii , were refrigerated at 7°C and sampled after 0, 2, 4, 6, 8, and 10 d of storage. Results were similar for both groups of fish. Total volatile base-nitrogen (TVB-N) reached 30 mg-N/100 g on d 3, at which time aerobic plate count (APC) reached 10⁶ colony forming units (CFU)/g and odor scores reached 6 on a scale of 1 to 10 (10 very fresh and 1 very spoiled). Good correlation existed between TVB-N and odor intensity (r = 0.84), between TVB-N and the log₁₀ APC (r = 0.71), and between odor and the log₁₀ APC (r = 0.91). These results show that TVB-N can serve as a good indicator of chilled mahi-mahi quality.     

海藻酸钠-壳聚糖-五倍子提取物微胶囊琼脂平皿扩散法抗菌性研究

本文采用锐孔造粒法,以海藻酸钠、壳聚糖为壁材,五倍子提取物为芯材制备了海藻酸钠-壳聚糖-五倍子提取物微胶囊。利用扫描电镜、红外光测试等手段确定了制备此微胶囊的最佳工艺,并采用琼脂平皿扩散法测定及评价了所制备微胶囊的抑菌性能。实验结果表明:制得的微胶囊包封效果、成球性和粒径均一性良好,且具有较好的抑菌性能,抑菌效果理想。     

加权平均法表述菌落总数测定的数学模型与 测量不确定度的评定

摘 要 目的:建立食品菌落总数测定的通用数学模型和测量不确定度的评定方法。方法：按照加权平均的算法对菌落总数计算公式进行推导,建立了菌落总数计数方法的通用数学模型。以某橙汁饮料菌落总数的测定过程为例,从三个方面分析并量化了各不确度的分量,分别为：不同稀释度平板上菌落数的分布（以同一稀释度上两个平板计数结果的相对相差表示）,样品移取和稀释过程（以各量具的容量允差及稀释过程对稀释倍数贡献的相对不确度表示）,数字修约（以修约间隔引入的粗大误差表示）。按照均方根法则,将各计数平板的测量不确度进行加和,即为总测量不确度。结果：本例中该橙汁饮料菌落总数的扩展不确度U=0.2×104 CFU/mL, k =2。结论：建立了简便准确的食品菌落数测量不确定度的评定方法。     

肠侵袭性大肠埃希氏菌国家核酸标准样品的研制

目的研制肠侵袭性大肠埃希氏菌核酸标准样品,并对其均匀性和稳定性进行评价。方法本文研究了肠侵袭性大肠埃希氏菌核酸标准样品的关键制备技术和保存技术,定值技术和定值方式,开展均匀性和稳定性试验,并对食品中肠侵袭性大肠埃希氏菌核酸标准样品的不确定度进行确定;标准样品采用Pico Green DNA分子荧光定量方法进行定值。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。结果标准样品均匀性标准不确定度为0.016%,不稳定标准差为0.0100,均匀性和稳定性试验结果表明,本文研制的标准样品均匀且稳定。结论研制出具有溯源性的肠侵袭性大肠埃希氏菌核酸标准样品并获得国家标准样品证书,可适用于肠侵袭性大肠埃希氏菌的检测和质量控制。