乙酰化修饰对黑穗醋栗果实多糖结构特性及活性的影响

利用乙酸酐对黑穗醋栗果实多糖(BP)进行乙酰化修饰,选择低、中、高3种取代度(DS)的乙酰化多糖ABP-1(DS=0.14±0.02)、ABP-2(DS=0.28±0.02)和ABP-3(DS=0.55±0.01)进行性能测试,考察了乙酰化对BP单糖组成、形貌特征等结构特性及活性的影响。FTIR和GC结果表明,乙酰化修饰对BP碳链主要特征没有影响,ABP-1、ABP-2、ABP-3和BP均含有半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,但其摩尔分数不同。刚果红实验显示,乙酰化多糖和BP均无三螺旋结构;SEM结果表明,乙酰化多糖和BP外观形状不同。活性实验结果表明,乙酰化多糖有较强的自由基(DPPH·、OH·、O_2~–·)清除活性,及α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性,大小顺序为:BP ABP-1 ABP-2 ABP-3 阳性对照(VC或阿卡波糖)。α-葡萄糖苷酶抑制动力学结果表明,BP和乙酰化多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制属于竞争性抑制。     

茯砖茶茶多糖乙酰化修饰及其降血糖活性研究

以水提醇沉法制得伏砖茶多糖,以乙酸酐制备乙酰化伏砖茶多糖并测定取代度,采用体外化学模型研究伏砖茶多糖对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶抑制活性。实验结果表明:伏砖茶多糖的提取率为4.62%,含量为68.72%,乙酰化茯砖茶多糖的取代度为0.214。4.0 mg/mL的茯砖茶多糖和乙酰化茶多糖对α-淀粉酶的抑制率分别为92.3%和96.8%;0.18 mg/mL的茯砖茶多糖和乙酰化茶多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为90.3%和92.2%。两种多糖对两种酶均具有剂量依赖性抑制活性,乙酰化茶多糖抑制活性高于非乙酰化茶多糖,说明乙酰化修饰能增加茶多糖的降血糖活性。     

感应草多糖的化学组成与生物活性研究

对感应草多糖的化学组成与生物活性进行研究,采用水提醇沉法、脱色脱蛋白透析处理,得到粗多糖、脱色多糖和精制多糖,测定多糖的主成分含量,采用薄层色谱法(TLC)及柱前衍生化-高效液相色谱法(HPLC)分析多糖的单糖组成,测定多糖对DPPH·和ABTS~+·的清除能力、还原能力以及对α-葡萄糖苷酶和DPP-Ⅳ酶的体外抑制作用。感应草多糖由5种单糖组成,对DPPH·和ABTS~+·均有清除作用,具有还原能力,对α-葡萄糖苷酶和DPP-Ⅳ酶均有抑制作用。相关性分析表明,多糖的糖含量、糖醛酸含量、还原糖含量和蛋白质含量与其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制活性均无显著相关性。感应草多糖具有抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶及DPP-Ⅳ酶抑制活性。     

两种方法提取琉璃苣叶多糖的理化性质 及生理活性

本研究旨在制备两种琉璃苣叶水溶性多糖，进一步探究其结构特征，并评价其降血糖、抗癌和免疫活性。采用纤维素酶辅助提取（BLP-1）和微波辅助提取法（BLP-2）制备琉璃苣叶水溶性多糖，并比较了BLP-1和BLP-2的理化性质，通过分析α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制效果来评价BLP-1和BLP-2的降血糖活性，通过检测HepG2、MX-1和A549细胞的抑制率来评价抗癌活性，通过检测RAW246.7的免疫因子分泌来评价免疫活性。结果表明，BLP-1和BLP-2具有不同的多糖和蛋白质含量。BLP-1和BLP-2由阿拉伯糖（Ara）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、木糖（Xyl）组成，但摩尔比组成不同，其分子量分别为20.1和22.6KDa。热重分析（TGA）表明BLP-2比BLP-1具有更稳定的结构。这两种多糖具有抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性、抑制HepG-2、A549和MX-1癌细胞增殖以及激活巨噬细胞RAW 264.7细胞分泌免疫细胞因子以介导细胞免疫反应的潜力。两种多糖可作为新功能食品和医药产品中的生物活性成分，为进一步研究两种多糖的构效关系提供了理论依据。     

五种中草药水溶性多糖对α-葡萄糖苷酶活性的影响

从山茱萸、知母、甘草、地榆及诃子中提取水溶性多糖,并通过酶抑制动力学反应考察其对α-葡萄糖苷酶活性的影响。酶动力学反应结果表明:地榆多糖对α-葡萄糖苷酶有激活作用;知母多糖对α-葡萄糖苷酶的活性随时间的变化先激活后抑制;山茱萸多糖、甘草多糖及诃子多糖均对α-葡萄糖苷酶有抑制活性,其中抑制活性最好的是甘草多糖,其抑制率为72.5%;其各自的影响机理还有待进一步研究。     

黄茶多糖的降糖活性研究

利用水提醇沉的方法将黄茶用热水提取后再用70%和90%乙醇沉淀得到70和90部位的粗多糖,进一步脱蛋白、透析、浓缩、冻干后得到的多糖分别命名为YT70和YT90。通过测定黄茶多糖在体外对α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶的抑制率来考察其降血糖活性,结果表明YT70和YT90均具有一定的降糖活性,并且能选择性抑制α-葡萄糖苷酶。     

湘莲中产耐酸性α-淀粉酶菌株的分离及鉴定

目的从湘莲中分离产耐酸性α-淀粉酶菌株,并对其进行鉴定。方法采用淀粉富集培养基分离湘莲中产α-淀粉酶菌株,通过形态学、生理生化分析及16S rDNA序列分析进行鉴定;在不同pH(3.20、3.38、3.56、3.85、4.15和4.45)条件下培养筛选出的菌株,测定酶活力,确定产酶的最适pH;在不同温度(25、30、35和40℃)条件下培养耐酸性α-淀粉酶产生菌,测定酶活力,确定产酶的最适温度;用不同碳源(蔗糖、淀粉和葡萄糖)和不同氮源[牛肉膏、(NH4)2SO4、柠檬酸氢二铵、柠檬酸三铵和蛋白胨]培养耐酸性α-淀粉酶产生菌,测定酶活力,确定产酶的最适碳源和氮源。结果从湘莲样品中筛选出2株酶活力较高的菌株,酶活力分别为376.21和395.62 U/ml,分别编号为LL5和LL9,2株菌株均为解淀粉芽胞杆菌。菌株LL5产α-淀粉酶的最适pH为3.56,最适温度为34℃,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为柠檬酸三铵,为耐酸性α-淀粉酶产生菌。结论成功从湘莲中分离出1株产耐酸性α-淀粉酶菌株LL5。     

天然矿物埃洛石为载体固定α-淀粉酶的工艺和性能

以天然纳米材料埃洛石为载体,通过物理吸附法对α-淀粉酶进行固定.利用红外光谱、扫描电镜、透射电镜等对埃洛石的结构和形貌特征进行测试与表征,同时对埃洛石纳米管固定化α-淀粉酶的条件及固定化酶的酶学性能进行了研究,并与游离酶进行了比较.结果表明:这种具有管状结构的埃洛石硅酸盐矿物是理想的酶载体,酶的固定化效率平均达到37.38%;所得的固定化α-淀粉酶4℃下保存15d后,酶活力仍保持90%以上;固定化α-淀粉酶的热稳定性也明显优于游离酶,连续7批次操作后仍保持56.2%的酶活力.     

梯度醇沉兰州百合多糖结构及降血糖活性分析

以兰州百合为原料，采用热水提取和不同体积分数乙醇（30%，50%，70%，80% ）醇沉得到4种兰州百合多糖，分别记为BLP-30、BLP-50、BLP-70和BLP-80。测定BLP-30、BLP-50、BLP-70和BLP-80中可溶性总糖质量分数、蛋白质量分数、糖醛酸质量分数、紫外吸收光谱、单糖组成、相对分子质量等结构表征，运用相关性分析比较多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制能力与结构表征的相关性。结果表明，4种兰州百合多糖均不含或含有极少量糖醛酸和蛋白，可溶性总糖质量分数最高的为BLP-80的30.96%。4种多糖为混合多糖，均由甘露糖、葡萄糖和少量半乳糖组成，相对分子质量从BLP-30-1的645 kDa逐渐减小至BLP-70-4的2.45 kDa。其中BLP-30和BLP-50为葡聚糖，BLP-70为半乳甘露葡聚糖，BLP-80为甘露葡聚糖，BLP-30甘露糖、葡萄糖、半乳糖摩尔分数分别为10.18%、88.67%、1.15%；BLP-50甘露糖、葡萄糖、半乳糖摩尔分数分别为2.49%、97.02%、0.49%；BLP-70甘露糖、葡萄糖、半乳糖摩尔分数分别为26.94%、68.21%、4.85； BLP-80甘露糖和葡萄糖摩尔分数分别为41.56%和58.44%，不含半乳糖。4种多糖均具有一定的体外降血糖活性，且呈量效关系，4种多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制能力强弱顺序分别为BLP-70＞BLP-80＞BLP-30＞BLP-50和BLP-50＞BLP-70＞BLP-80＞BLP-30。相关性分析显示，4种多糖对α-淀粉酶的抑制能力与甘露糖和半乳糖的摩尔分数呈正相关（P＜0.05），多糖对α-淀粉酶的抑制能力与葡萄糖的摩尔分数呈负相关（P＜0.05）；多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制能力与可溶性总糖质量分数、糖醛酸质量分数、甘露糖摩尔分数呈负相关（P＜0.05），多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制能力与葡萄糖摩尔分数呈正相关（P＜0.05）。4种兰州百合多糖中BLP-70的体外降血糖活性更强，推测兰州百合多糖的相对分子质量在2~3 kDa之间，甘露糖与葡萄糖物质的量比在n（甘露糖）：n（葡萄糖）=1：2.5之间更有利于兰州百合多糖发挥体外降血糖活性。     

海洋微生物来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选及性质研究

建立了α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型。10株海洋微生物经摇床培养得到发酵液,经大孔树脂吸附、甲醇洗脱得到粗提物;以阿卡波糖为阳性对照,用比色法（PNPG法）对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定,并对产生活性代谢产物的菌株做进一步研究。结果发现：有6株菌株的代谢产物均具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制作用,其中菌株N-1的代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强,每毫升N-1样品液中含有的活性代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用相当于5mg的阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用;该活性产物具有较强的酸碱耐受性及温度耐受性,在pH值1～14、50～100℃时稳定性较好;初步分析活性代谢产物的成分并非蛋白质、氨基酸、糖类及皂苷类物质。     

条斑紫菜多糖对α-淀粉酶的抑制效果

目的分析条斑紫菜多糖对α-淀粉酶的抑制效果。方法从条斑紫菜中提取多糖α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI),分析其在不同浓度(2.5~30 mg/m L)下,经热(30~90℃,20 min)、酸(p H 2.0~7.0,室温,30 min)、碱(p H 7.0~10.0,室温,30 min)、蛋白酶(分别为100 U/g的风味蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶,50℃,2 h)以及模拟胃肠道环境(胃处理:p H 2.0,100 U/g胃蛋白酶;肠道处理:p H 8.2,100 U/g胰蛋白酶)处理后对α-AI活性的影响,探讨α-AI的稳定性及其对淀粉酶的抑制效果。结果条斑紫菜多糖α-AI在多糖浓度为2.5~30 mg/m L之间对α-淀粉酶的抑制呈剂量依赖关系,浓度为30 mg/m L具有较高的抑制率。经不同条件处理,α-AI活性无显著变化(P0.05),仍具有良好的淀粉酶抑制活性,且其活性在胃液和肠液中稳定,可较好地发挥生理作用。结论条斑紫菜多糖α-AI在控制血糖稳定方面具有较强的应用价值,可作为2型糖尿病患者潜在的功能性食品。     

山胡椒抑制体内外α-糖苷酶活性研究

对山胡椒抑制酵母α-葡萄糖苷酶和大鼠小肠α-葡萄糖苷酶活性进行了研究。利用96微孔板法检测其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,抑制酵母α-葡萄糖苷酶实验中,山胡椒石油醚部位(IC50=229.70μg/mL)、乙酸乙酯部位(IC50=259.10μg/mL)和正丁醇部位(IC50=165.80μg/mL)活性低于阳性对照Acarbose(IC50=1081.27μg/mL);抑制大鼠小肠α-葡萄糖苷酶实验中,仅有乙酸乙酯部位(IC50=418.17μg/mL)具有活性,阳性对照Acarbose未检测出其IC50。实验证明,山胡椒各提取部位具有较好抑制酵母α-葡萄糖苷酶活性,但只有乙酸乙酯部位具有良好的大鼠小肠α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

朱砂七提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

分别提取朱砂七鞣质和朱砂七多糖,以对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,考察朱砂七提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响.结果发现,两种提取物对α-葡萄糖苷酶均具有抑制作用,其中朱砂七鞣质的抑制作用较朱砂七多糖更强;朱砂七鞣质和朱砂七多糖对α-葡萄糖苷酶活性的最大抑制率分别为91.3％和41.18％,IC50值分...     

星点设计-效应面法优化纤维素酶提取黄精多糖

采用星点设计-效应面优化法探讨纤维素酶提取黄精粗多糖的最适宜工艺条件。在单因素试验基础上选取酶解温度、酶解pH值和加水量为自变量,黄精粗多糖提取率为因变量,对自变量各水平进行二项式拟合,用效应面法选择较适宜工艺条件,并进行预测分析。结果表明,黄精粗多糖最适宜提取工艺为：纤维素酶用量为黄精质量的0.50％,酶解时间120...     

嗜热菌(Bacillus Caldolyticus)产生耐高温α-淀粉酶的动力学研究

通过一种新的能够产生耐高温α-淀粉酶(酶活力最适温度为90℃)的嗜热菌 Bacillus Cal-dolyticus(培养温度为60℃)变异株 M_1,以乳糖为碳源培养基进行菌体生长和产酶动力学的研究,结果推导出一组间歇发酵过程菌体浓度、底物浓度及产酶活力变化的数学模型:     

乙基纤维素固定化α-淀粉酶的研究

对乙基纤维素固定化α-淀粉酶进行了研究,优化了α-淀粉酶的固定化工艺条件,并比较了游离酶和固定化酶的特性。结果表明,在α-淀粉酶浓度为4g·L-1、乙基纤维素质量分数为0.50%、4℃的条件下,固定化α-淀粉酶的重复操作稳定性最好;固定化α-淀粉酶的最适反应pH值为7.0、最适反应温度为60℃,具有良好的热稳定性、重复使用性和储存稳定性;该固定化方法操作简便,减少了酶变性的可能,最大程度保留了酶的活力。     

微波变性淀粉水解规律的研究

利用α-淀粉酶和葡萄糖苷酶作用于微波变性木薯淀粉，并与原木薯淀粉进行比较，考察微波变性木薯淀粉在α-淀粉酶和葡萄糖苷酶作用下的降解规律。结果表明在相同水解条件下，微波变性淀粉更易于被水解。     

可见分光光度法测定α-淀粉酶活力

利用I~-_3与淀粉络合所呈现的蓝色在一定波长下有特征吸收这一特性,采用可见分光光度法,通过测定添加α-淀粉酶前后发生水解的淀粉量的变化测定α-淀粉酶活力。结果表明,淀粉与I~-_3在pH值6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中显色良好,并在580 nm处具有最大吸光度。加入一定量的淀粉,α-淀粉酶浓度(x)在0.001～0.008 mg·mL~(-1)范围内与酶活力(y)线性关系良好,标准曲线方程为y=375.75x+0.1208(R~2=0.9939)。因此,可以利用碘与淀粉的显色反应对α-淀粉酶活力进行测定。     

夜寒苏粗多糖体外抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶活性

研究了药食兼用植物夜寒苏粗多糖体外抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶的活性.采用闪式提取法提取夜寒苏粗多糖,并以苯酚-硫酸法测定多糖的提取率;测定夜寒苏粗多糖对DPPH自由基、ABTS+自由基的清除能力及还原能力,以评价其体外抗氧化活性,并研究其对α-葡萄糖苷酶活性的影响.结果表明,夜寒苏多糖提取率为1.56％,多糖含量为63...     

低聚壳聚糖的复合酶法制备研究

通过对黏均分子量、酶活力、水解率和还原糖浓度的测定,研究了由商业α-淀粉酶、纤维素酶和果胶酶1∶1∶1(m/m/m)组成的复合酶降解壳聚糖的最佳工艺条件,结果表明:复合酶在酶底物比为1∶5(m/m)、pH 5.3、温度56℃的条件下,酶解2 h可得到分子量为1 000～4 000的低聚壳聚糖,且通过傅里叶红外光谱分析酶解后的产物结构无明显变化。