自然发酵剂"西藏雪莲"的初步研究与菌种鉴定

将获得的“西藏雪莲”菌块切片观察发现有规律的多种菌相。将样品用无菌水反复冲洗后制备菌悬液做梯度稀释，并选择牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，PDA及番茄酵母吐温80醋酸盐3种培养基做分离。28％，培养48h后，根据菌落特征并结合细胞形态挑选典型菌株，进一步纯化获取单克隆。初步鉴定出酵母菌3株，杆菌5株，球菌1株。     

四种克鲁弗酵母菌培养及形态特征的观察

以克鲁弗酵母菌(S.kluyveri)作为实验材料,研究培养基及甜菜糖蜜添加量对4种S.kluyveri菌落增殖的影响,同时对菌落形态和细胞形态进行观察。结果表明:与麦芽汁固体培养基和马铃薯葡萄糖琼脂培养基相比,4种S.kluyveri均适合生长在甜菜糖蜜培养基中,其甜菜糖蜜最适添加比例为4%。4种S.kluyveri在同一培养条件下生长,其形态结构并无明显差异,其菌落均为湿润有光泽、不透明的圆形菌落,细胞形态均为圆形的两端芽殖细胞。其中编号为1685和编号为10955的菌株菌落和细胞大小较其他两种菌株较大。     

高耐性酿酒酵母的筛选及其耐受性研究

优良的耐逆性菌株的添加能有效提高酱油生产效率和产品品质风味,该研究筛选出两株耐高温、耐高渗和耐高酸的酵母菌株用于酱油发酵。通过对酵母菌株高温热激之后稀释点板,对比各稀释度的菌落数量和形态,以及通过在高渗板和高酸板上各个菌的生长情况和在抗性培养基中菌的生长曲线测定来对比各菌株的耐受性。稀释点板实验以及生长曲线结果都显示,酿酒酵母L-19和L-38在55 ℃热激条件下以及在分别含有6%NaCl、0.6%乙酸和5%乳酸固体平板上菌落形态和大小都优于酱油酵母,而且在含有高盐和高酸的液体培养基中生长速率均高于酱油酵母。因此,成功筛选出两株具有高耐性的酿酒酵母。     

机械化生产黄酒酵母菌性能的研究

针对“三边发酵“理论中黄酒酵母菌性能的要求,通过研究黄酒酵母在TTC培养基中的变色情况、发酵力情况、糖化酶糖液中酵母生长情况、酵母耐酒精度、酵母形态和产香、酵母醭生成情况、酵母起发速度、酵母巨大菌落形态、酵母死灭温度、酵母与杆菌在MRS液体培养基中共同生长和凝聚情况及在锥形瓶中发酵试验.从中筛选出2#和3#酵母菌株搭配使用,更加适宜于机械化黄酒中的大罐发酵.     

传统面食发酵剂中酵母菌的分离鉴定

从民间发酵传统面食用的发酵剂中,分离纯化出4株酵母,通过菌落形态观察、细胞形态观察、子囊孢子形态观察、菌丝观察、掷孢子的形成试验、糖发酵试验、碳源同化试验、氮源同化试验、耐高糖试验、分解尿素试验、产生类淀粉试验、产酯试验、石蕊牛乳试验、无维生素培养基培养试验、热致死试验、耐酒精试验等,将其确定到属,初步鉴定为:丝孢毕赤氏酵母属(Hyphopichia),酵母属(Saccharomyces),球拟酵母属(Torulopsis)。     

一种基于口含烟特性的菌落总数检测方法

目的:为了评价口含烟的细菌污染程度和卫生质量,开发一种口含烟菌落总数的定量检测方法。方法:将口含烟样品与灭菌DE肉汤进行20倍稀释,振荡1 h充分混匀后形成样品液,将口含烟样品液制作成5个不同浓度的10倍递增的样品稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1 mL样品稀释液置于无菌平皿,与营养琼脂培养基充分混合,在(36±1)℃培养箱中培养(48±2)h后取出,对每个平皿中形成的菌落个数进行观察并记录。结果:在样液稀释倍数为20倍、振荡时间为1 h的条件下,回收率为84.1%±5.0%,符合菌落总数检测方法要求,方法可行有效。结论:建立的口含烟菌落总数指标检测方法的前处理操作快速简便、检测灵敏度高,适用于口含烟的微生物检测。     

调味品酿造微生物的实验技术(续)

(二)形态特征 1.麦穿汁培养基25℃,培养3天观察:细胞圆形、卵圆或卵圆～长卵形。圆～卵形大小为(2.6～5.2)×(3.4～6.2μ,卵～长卵形大小为(2.6～4.5)×(3.5～10.5)μ。细胞成小群的粘在一起(如图3)。培养基底部有沉渣,有时菌体在培养基液面形成小的环。     

大肠菌类快速检验方法(试行方法)

1.按常法将奶制品做成1:10稀释液(鲜乳则不必稀释)2.将鉴别培养基(伊红美蓝、远藤氏或乳糖胆盐平板)预先放在37℃孵箱内烘干1.5～2小时,使培养基表面干燥并富有吸水性。3.吸取1:10稀释液(或原乳)1毫升,滴加在烘干的鉴别培养基上,用三角形的大接种环将样品稀释液在培养基表面均匀涂布。用同样方法共接种3个平板。4.于37℃培养18～24小时,检查在培养基上是否有大肠菌类的典型菌落,并进     

1株酸浆豆腐中产蛋白酶菌种的分离与鉴定

以市售酸浆豆腐为样品,首先筛选样液适宜的稀释倍数,将样品稀释液接种于马铃薯葡萄糖平板和MRS平板进行纯培养,然后接种于脱脂牛奶培养基,以产透明圈为指标,再以酪蛋白为底物测定酶活,筛选分离产蛋白酶菌种,继而通过肉眼观察菌落形态、光学显微镜和电镜、显微镜观察菌体形态,进一步通过各种生理生化反应、ITS测序方法进行菌种鉴定。结果表明:25 g样品稀释至10^-5浓度适宜,在脱脂牛奶培养基中,温度28 ℃、有氧培养72 h后产生透明圈,酶活为9.6 U/mL;肉眼观察菌落为乳白色,呈绒毛状,有同心圈并呈放射线状,显微镜下节孢子呈单个或链状,扫描电镜观察菌丝体宽4~5.5 μm,孢子大小多数为(3.3~5.7) μm×(7.0~17.1) μm;根据生理生化反应结果,查阅《真菌鉴定手册》,鉴定为白地霉(Geotrichum candidum);ITS测序显示与白地霉同源性达100%。根据生长曲线可知,0~8 h,菌株处于延迟期;8~40 h,菌株处于对数期;40~68 h,菌株处于稳定期;68 h以后,菌株处于衰亡期。     

贵州黔南地区泡制酸菜中酵母菌的分离与鉴定

采用纯培养的方法从贵州黔南地区20份自然发酵泡制酸菜中分离出115株酵母菌,通过WL培养基观察菌落特征,并结合显微细胞形态及生理生化特性,将115株酵母分为17种类型。从每种类型中挑选一株进行26S rDNA D1/D2区系列测定,通过序列分析及构建系统发育树,进行种属鉴定。结果表明：17类酵母共115株分属于11个属,其中30.43%为Kazachstania酵母、26.96%为毕赤酵母属(Pichia)、17.39%为地霉属(Geotrichum)、4.35%为假丝酵母属(Candida)、3.48%为耶罗威亚酵母属(Yarrowia)、3.48%为丝孢酵母属(Trichosporon)、3.48%为Meyerozyma酵母、2.61%为有孢汉逊酵母属(Hanseniaspora)、2.61%为Wickerhamomyces酵母、2.61%为Apiotrichum酵母、2.61%为棒孢酵母属(Clavispora)。     

法夫酵母高密度培养条件的优化

本文采用正交试验对法夫酵母高密度培养条件进行了研究,得到其优化培养基组成为:葡萄糖35g/L、酵母膏9g/L、KNO30.6g/L、(NH4)2SO4 0.5g/L、KH2PO4 1.5g/L、MgSO4 0.2g/L,最适摇瓶装液系数为10%。在10L罐上的实验结果表明:采用优化后的培养基在48h细胞总数就可以达到1.5×109个/mL,与初始培养基相比细胞总数提高了88.7%,到达最高菌体浓度提前了12h。     

啤酒接种酵母检查

啤酒酿造过程中,接种酵母的性能状态是影响啤酒质量和发酵运行的主要因素之一。生产现场回收的酵母泥,准确及时地判断其活力状况和性能优劣,在发酵工艺质量控制中有其重要作用。1.酵母泥活力检测1.1 镜检形态种酵母泥经适当稀释后在显微镜下观察,酵母细胞呈园形或卵园形,大小正常,无异常细胞。细胞     

苹果酒酵母增殖培养基的优化

以麦芽汁装液量(mL)、(NH_4)_2SO_4、Na_2HPO_4和 MgSO_4的质量浓度(g/L)为影响因素,以苹果酒酵母细胞浓度(个/L)为考察指标,利用二次回归正交旋转组合设计研究了1株苹果酒酵母增殖所需培养基的数学模型,进而优化了针对该菌株的增殖培养基。研究结果表明,在100mL 三角瓶中,培养开始酵母细胞浓度为 1．923×10~8个/L,麦芽汁装液量20mL,(NH_4)_2SO_4浓度0．196～1．033g/L,Na_2HPO_4浓度2．559～5．566g/L, MgSO_4浓度1．778～3．222g/L 的培养条件下,培养24h 后,酵母细胞浓度可望高于1．125×10~(11)个/L。     

高压脉冲电场作用下亚致死酵母的存在与检测

为探究高压脉冲电场(PEF)对酿酒酵母的灭菌机理,研究了从亚细胞水平揭示PEF处理下的损伤亚致死酵母细胞的存在及产生规律。采用pH7.2的磷酸盐缓冲液(PBS)模拟体系,30 kV/cm电场强度下循环处理100～500μs,通过选择性培养基与非选择性培养基菌落计数对PEF处理前后亚致死酵母细胞进行了研究。结果显示,亚致死酵母的临界渗透压为4%NaCl,PEF处理后,酿酒酵母的亚致死率可达到4.5个对数,亚致死细胞数量达到1.5个对数,且亚致死程度随处理时间的延长而加大。选择性培养基可用于PEF处理过程中亚致死细胞的定量检测。     

护手霜中菌落总数测定用培养基的探讨

检测化妆品菌落总数时,为使菌落在培养基中清晰可辨,允许在卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(以下简称TTC)。文章以护手霜为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母工作菌悬液,制备5mg/100mL浓度的TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,同时以不添加TTC卵磷脂、吐温80一营养琼脂平板进行验证,以营养琼脂培养基作为对照,对菌落计数结果进行对比。结论:添加了5mg/100mLTTC的培养基用于化妆品菌落总数检测时对G+有明显的抑制作用,建议在日常检测过程中需慎重选择。     

肉品中菌落总数和大肠菌群快速检测试纸片的研究

对肉品中菌落总数和大肠菌群快速检测试纸片进行了研究.选择中速定性滤纸为材料,分别浸入经不同特殊处理(不同浓度的TTC、琼脂、NaCl)的培养基中,40℃下烘干制得试纸片;将所制得的菌悬液涂布于成份不同的试纸片上,于32℃,培养20h(试纸片法),或涂布于平板计数琼脂上,于32℃,培养48h(国标法),然后计数,将二者得到的数据进行比较.结果表明:试纸片法与国标法具有很高的相似性.在100ml培养基中,TTC的浓度为0.02‰时试纸片的显色情况最好,生成的红色菌落数目最多.菌落生长受琼脂浓度的影响,当琼脂的浓度高于或低于0.15%时,细菌生长速度逐渐减慢.NaCl的浓度在0.4%时菌落生长呈现最好势态.     

东北酸菜发酵液中耐低温乳酸菌的分离及抑菌性研究

从东北地区低温(10～15℃)贮藏的酸菜发酵液中分离出25株乳酸菌,获得在10℃能良好生长的菌株CCT-1,经形态、生理生化和16SrDNA鉴定,该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。分别将MRS固体培养基与LB、查氏、牛肉膏蛋白胨和YPD半固体培养基组成双层平板,对大肠杆菌(Escherichia coli)、黑曲霉(Aspergillus niger)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及啤酒酵母(S.cerevisiae)4种指示菌进行抑菌性研究,结果显示:CCT-1对4种指示菌均有抑菌作用。利用牛津杯法研究菌液的最低抑菌浓度,测得CCT-1菌悬液稀释3倍时,细胞浓度为3.4×106cfu/mL,此时还存在抑菌作用,啤酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉的抑菌圈直径分别为10,9.8,9,8.5mm,该研究可为冷藏食品的保藏提供生物防腐菌株。     

不同SO2浓度对灰霉孢子萌发和菌丝生长的影响

根据天然贵腐葡萄酒的生产特点,以马铃薯蔗糖培养基(PS/PSA)和葡萄汁培养基,对从葡萄果实上分离的灰霉孢子在不同SO2条件下的萌发和菌丝生长情况进行了研究.实验结果表明:灰霉孢子在天然葡萄汁中能够萌发和生长,形态上没有观察到显著的变化.在马铃薯蔗糖培养基上,当SO2浓度在0 ～ 300mg/L范围内时,灰霉孢子的萌发率和菌落生长速率受到SO2浓度的显著抑制;而在葡萄汁培养基上,孢子的萌发率和菌落生长速率在不同的SO2浓度水平上没有显著差异.     

一株优良啤酒酵母菌株的选育

以山东中德发酵技术有限公司的毕赤酵母泥为实验材料,采用平板分离培养法,通过分离培养基的选择、酵母菌落外观形态、细胞形态观察及细胞大小、酵母死亡率、增殖量以及发酵力等指标的检测,筛选出1株优良的酵母菌种,以满足校办啤酒生产车间的发酵生产需求。     

航天诱变啤酒酵母菌株的复壮与筛选

对经航天诱变的啤酒酵母菌进行复壮,并对复壮后的酵母菌株从细胞大小、菌落形态、发酵力、增殖情况以及死灭温度等几方面进行了筛选.试验结果表明,诱变后菌株的发酵力、生长速度均优于出发菌株,死灭温度基本相同.并依此筛选出了l株各种生理性状都较好的诱变菌株,其适宜的生长培养基为麦芽汁培养基,适宜的培养时间为24h.