昆仑雪菊茶总黄酮提取及抗氧化活性研究

以昆仑雪菊为原料,在单因素试验基础上,结合BoxBehnken响应面法,研究昆仑雪菊茶总黄酮的浸提工艺优化及抗氧化活性。结果表明:昆仑雪菊茶总黄酮的最佳浸提工艺条件为浸提时间13 min、浸提温度98℃、料液比178(g/mL),总黄酮得率为(20.39±0.07)%。最优条件下浸提物的DPPH·清除能力、铁还原力的IC_(50)分别为(82.40±1.98),(137.98±1.56)μg/mL,氧自由基吸收能力(ORAC值)为1 427.89μmol TE/g·DW,证明昆仑雪菊茶总黄酮具有很好的抗氧化活性。     

新疆昆仑雪菊总黄酮含量测定方法研究

以芦丁为标准品,对Na NO2-Al(NO3)3-Na OH法和Al Cl3法测定新疆昆仑雪菊总黄酮含量的结果作了比较。结果表明:Na NO2-Al(NO3)3-Na OH法的测定结果比Al Cl3法对于高原雪菊和平原雪菊分别约高19.76 mg/m L和9.34 mg/m L,Al Cl3法适宜酸度为p H5.5。邻苯二酚干扰实验表明,平均误差为0.019 mg/L,随着邻苯二酚量的增加,测得值无上升趋势。Al Cl3法的线性方程为:A=0.000 638+0.862 3C,r2=0.999 2。因此,对含酚类、酸类较多的昆仑雪菊应采用三氯化铝法测定其总黄酮的含量。     

低聚果糖对家兔离体肠收缩作用机制的影响

目的：探究低聚果糖对家兔离体小肠平滑肌自主性收缩的影响,分析低聚果糖对小肠运动的影响及其效应机制。方法：取家兔近胃幽门处小肠置于台氏液,将张力换能器连接到BL-420E系统,肠段上部与张力换能器相连,下部与L型通气钩连接,待肠管收缩稳定后,加入药品,观察并记录肠管运动变化。结果：低聚果糖在低浓度时可加强小肠紧张性收缩及节律性收缩,当浓度升高到一定程度时作用减小,当超过50 mg·mL-1后,表现为降低小肠紧张性收缩,存在加强小肠平滑肌收缩的最适剂量。结论：低聚果糖在低浓度下可以提高小肠平滑肌紧张性,中浓度无影响,在高浓度情况下可降低小肠平滑肌收缩强度。     

超声波辅助提取竹叶鸡爪茶总黄酮的工艺优化及抗氧化、抑菌活性研究

为优化竹叶鸡爪茶黄酮提取工艺,考察其抗氧化、抑菌活性,通过单因素试验考察超声温度、超声功率、超声时间、乙醇体积分数、液料比5个因素对黄酮含量的影响,继而设计Box-Behnken响应面试验,再以抗坏血酸为阳性对照测定竹叶鸡爪茶醇提物的抗氧化能力,牛津杯法与二倍稀释法测定其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果.所得最佳工...     

铁观音茶提取物对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及机制

研究铁观音茶提取物对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及机制。用脂多糖作用于RAW264.7细胞,建立炎症模型,并用吲哚美辛和不同浓度铁观音提取物处理,检测NO和IL-6的分泌情况,qPCR检测一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6)mRNA相对表达,Western Blot检测炎症相关蛋白激酶(IKKβ),核转录因子κB抑制因子(IκB)、核转录因子κB p65(NF κB p65)及其磷酸化产物的相对表达。结果显示,铁观音茶提取物能显著抑制炎症介质NO分泌和IL-6蛋白表达量(p<0.05),抑制炎症相关基因iNOS、COX-2、TNF-α和MCP-1等表达,并极显著抑制NF-κB信号通路相关蛋白IKKβ、IkB和p65的磷酸化(p<0.01)。以上结果表明,铁观音茶提取物可明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

草苁蓉多糖抑制J774A.1巨噬细胞炎症小体活化及细胞焦亡机制研究

目的：探讨草苁蓉多糖（BRPS）对脂多糖（LPS）联合三磷酸腺苷（ATP）诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症小体活化及细胞焦亡的抑制作用。方法：LPS联合ATP刺激J774A.1巨噬细胞,建立巨噬细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体模型。用细胞增殖毒性试剂盒检测J774A.1细胞存活率,微板法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放,免疫荧光染色法检测细胞膜损伤情况,酶联免疫吸附法检测细胞培养液中白细胞介素-1β（IL-1β）水平,免疫印迹法测定J774A.1细胞NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、IL-1β、消皮素D（GSDMD）以及核转录因子-κB（NF-κB）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）蛋白的表达情况。结果：BRPS能增高LPS/ATP诱导的J774A.1巨噬细胞存活率,降低细胞培养液中LDH释放,减少细胞膜损伤,下调细胞NLRP3蛋白表达,上调Caspase-1前体蛋白水平,下调IL-1β以及GSDMD N端活性片段水平。此外,BRPS下调J774A.1巨噬细胞NF-κB核转位及其磷酸化水平,以及细胞外信号调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶、p38 MAPK磷酸化水平。结论：BRPS可抑制LPS/ATP诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症小体活化和焦亡,其作用可能与调控NF-κB和MAPK信号通路有关。     

熊猫豆提取物抑制肿瘤活性及诱导结肠癌细胞Caco-2凋亡机制研究

为了探究熊猫豆的抑制肿瘤活性及其诱导Caco-2凋亡的机制,采用80%丙酮浸提法制备熊猫豆粗提物,通过MTT法测定其对人结肠癌细胞Caco-2增殖的抑制效果,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、酶联免疫分析等技术与方法检测细胞周期、DNA及凋亡相关蛋白相对表达量的变化。结果发现,与空白对照组相比,0.1~1.0 mg/m L熊猫豆丙酮提取物对Caco-2细胞增殖有明显的抑制作用,且呈现剂量效应关系,IC50为0.72 mg/m L。0.4、0.6、0.8 mg/m L熊猫豆丙酮提取物处理72 h后的Caco-2细胞,可以观察到典型的凋亡细胞的梯状DNA条带,细胞周期G1期延长,Cyt C、caspase-9、caspase-3蛋白的相对表达量均有显著上升。熊猫豆丙酮能够抑制结肠癌细胞Caco-2增殖,这种抑制作用是通过阻滞细胞周期和诱导线粒体通路介导的细胞凋亡实现的。     

蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物对链脲佐菌素诱导2型糖尿病小鼠的降血糖作用及机制研究

研究蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物(PHAE)的降血糖活性及其作用机制。建立链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病C57BL/6J小鼠模型,考察PHAE灌胃处理对糖尿病模型小鼠糖脂代谢相关指标的影响。在此基础上,利用小鼠胰岛杂交瘤细胞MIN6初步探讨其作用机制。结果表明,与模型组相比,连续20 d灌胃PHAE(1000、3000 mg/kg)可显著提高糖尿病小鼠体重和血清胰岛素水平(p<0.05),并显著降低其空腹血糖、血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平(p<0.05)。此外,PHAE可刺激MIN6细胞增殖、促进分泌胰岛素并且显著上调Epac2蛋白表达。实验结果提示,蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物具有降血糖和调血脂活性,其降糖活性可能与其作用于胰岛细胞并促进胰岛素分泌有关,这一研究结果为蝙蝠蛾拟青霉的深入研究开发提供一定的数据依据。     

东紫苏精油对间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的影响及机制

为探讨东紫苏精油对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2 成脂分化的作用及降脂机制,利用噻唑蓝[the 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法检测细胞成活率,以界定浓度的适宜范围;用油红O 染色法对东紫苏精油作用后的细胞成脂分化作用进行分析;甘油磷酸氧化酶—过氧化物酶（glycerol phosphate oxidase-p-aminophenazone,GPO-PAP）法、胆固醇氧化酶、过氧化物酶和4-氨基安替比林苯酚（cholesterol oxidase,peroxidase and 4-aminoantipyrine phenol,COD-PAP）酶法检测东紫苏精油处理后细胞内甘油三酯、胆固醇含量的变化;荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和蛋白质印迹（western blot）分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxide proliferator-activated receptor γ,PPARγ）、CCAAT 增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer-binding proteins α,C/EBPα）、脂肪酸结合蛋白4（fatty acid-binding protein4,FABP4）mRNA 和相关蛋白在成脂分化中的表达水平。结果表明：与空白对照组相比,高脂模型组的总胆固醇（total cholesterol,TC）和甘油三酯（triacylglyceride,TG）含量显著增加（P＜0.05）,小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2 中PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA 和蛋白表达明显增加。与高脂模型组相比,中剂量（50 μg/mL）和高剂量（100 μg/mL）精油组TC 和TG 含量明显下降,小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2 中PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA 和蛋白表达明显下降。试验结果表明,东紫苏精油可能通过调控PPARγ/C/EBPα/FABP4 信号通路发挥对C3H10T1/2 细胞成脂分化的抑制作用,达到减脂目的。     

芒果苷改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱的作用及机制研究

为探讨芒果苷改善大鼠2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）糖脂代谢紊乱的作用及潜在机制,将T2DM大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组（100 mg/kg）及芒果苷低、中、高剂量组（50、100、200 mg/kg）,另设正常对照组,10只/组;灌胃给药,1次/d,持续8周。评价空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）、胰岛素抵抗指数（insulin resistance index,HOMA-IR）及血清游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）、甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）等指标,并检测肝组织谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）及胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate 1,IRS-1）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）/葡萄糖转运蛋白4（glucose transporter 4,Glut4）信号通路相关mRNA和蛋白表达。结果发现,芒果苷可以改善T2DM大鼠毛色、活动及精神等一般状态,减缓体重下降趋势;与模型对照组比较,经芒果苷治疗8周后,各治疗组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR及血清FFA、TG、TC含量均显著或极显著降低（P<0.05,P<0.01）;各治疗组大鼠肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力显著或极显著高于模型对照组（P<0.05,P<0.01）,而MDA含量极显著降低（P<0.01）;与模型对照组比较,芒果苷低、中、高剂量组大鼠肝组织IRS-1 mRNA表达无显著差异（P>0.05）,Akt、Glut4 mRNA及p-IRS-1(Tyr)、Akt、Glut4蛋白表达显著或极显著增加（P<0.05,P<0.01）,而p-IRS-1(Ser)蛋白表达显著或极显著降低（P<0.05,P<0.01）。上述结果表明,芒果苷具有改善T2DM大鼠糖脂代谢紊乱的作用,该作用与抗氧化应激及调节IRS-1/Akt/Glut4信号通路有关。     

灵芝多糖抗肿瘤的细胞机制及作用通路研究

灵芝多糖是灵芝的主要活性物质,对荷瘤机体有免疫调节作用,包括提高抗原提旱细胞、单核吞噬细胞功能,增强细胞和体液免疫功能,在体内引起一系列信号级联反应.但灵芝多糖的免疫调节及抗肿瘤作用机制尚未十分明确,仍有许多问题尚待解决.