超滤法分离酪蛋白酶解物中的ACE抑制肽

采用不同截留分子质量的超滤膜对酪蛋白酶解物中ACE抑制肽进行初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后酶解物的ACE抑制活性。结果表明,截留分子质量为10 ku和3 ku的超滤膜能不同程度地提高酪蛋白酶解物的ACE抑制活性,但3 ku的超滤膜能更有效地提高其ACE抑制活性,并且超滤液半抑制浓度值(IC50)为0.46 mg/mL。证明超滤技术可作为一种分离ACE抑制肽的手段。     

乳清蛋白酶解ACE抑制肽分离纯化技术的研究

采用6000 u的超滤膜对乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽进行了初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后水解物的ACE抑制率,结果表明通过超滤可以富积乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽.采用阳离子交换树脂对水解物进行脱盐,通过测定水解物的氮回收率、脱盐率以及ACE抑制率,表明采用阳离子交换树脂脱盐率可以达到80%以上,氮的回收率达到90%以上,而水解物经过阳离子交换树脂基本上对其ACE抑制率没有影响.     

发酵乳中ACE抑制肽的超滤工艺研究

本实验采用超滤法分离发酵乳中的ACE抑制肽,研究了超滤工艺的主要技术参数。结果表明:截留分子量为6000Da的超滤膜,在压力0.10MPa,温度25℃条件下,能得到具有较高ACE抑制活性的超滤液。     

脱盐、超滤处理卵白蛋白源ACE抑制肽及其理化性质的研究

卵白蛋白是蛋清中的主要蛋白质,利用卵白蛋白制备ACE抑制肽可为其高值利用提供参考。本文采用离子交换色谱对卵白蛋白的粗酶解物进行脱盐处理,确定了室温25℃、20 m L进样量、8 BV/h的脱盐工艺条件。在上述条件下,酶解物脱盐率达到83.6%,氮回收率和ACE(血管紧张素转换酶)抑制率分别为87.71%和80.31%。再采用截留分子量为10 ku和3 ku的两种超滤膜将脱盐酶解物分离成10 ku、3~10 ku和3 ku三个组分,最佳操作条件:超滤时间40 min、操作压力1.5 bar、温度35℃(10 ku)和30℃(3 ku)。超滤所得三个组分均具有ACE抑制活性,其中分子量3 ku的超滤物活性最高,该组分与粗酶解物相比较,总巯基和表面巯基含量显著降低(p0.05),同时表面疏水性显著提高(p0.05),热稳定性增加。因此,卵白蛋白的粗酶解物经脱盐、超滤处理,可以明显去除其中的盐分,并得到ACE抑制活性较高的分离组分。     

海蜇血管紧张素转化酶抑制肽的超滤分离

目的探讨分离提取海蜇水解液中血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽的有效方法。方法采用超滤技术分离ACE抑制肽,用凝胶排阻色谱SephadexG-25分析超滤前后肽相对分子质量的分布,用高效液相色谱法测定超滤前后肽ACE的抑制率。结果超滤可明显改变水解液中肽相对分子质量的分布,将ACE抑制率从35．05％提高到58．85％（测定浓度均为0．56mg／mL）。结论超滤明显改变了肽相对分子质量的分布,截留了ACE抑制率较低的大分子肽,提高了滤过液ACE抑制率。但是,超滤的相对流速有待提高。     

核桃蛋白ACE抑制肽分离纯化研究

核桃ACE抑制肽经超滤后,其ACE抑制率由76.58%增至78.43%,再经DA201-C大孔吸附树脂脱盐纯化后,脱盐率达到98.70%,ACE抑制率升高至80.73%;采用Sephadex G-15凝胶分离后,核桃ACE抑制肽被分为三个组分,其中活性最大的G2组分,其ACE抑制率达83.10%,且IC50为1.308 mg/mL,G2组分主要分布在500 Da¹80 Da,系为2180 Da,系为2⁴个氨基酸残基组成小肽。     

ACE抑制肽研究进展

该文对目前国内外有关ACE抑制肽研究进展进行综述,重点介绍制备ACE抑制肽原料、分离提取方法、结构与活性关系、活性测定方法和功能性评价方法,并简介其在食品中应用及发展前景,以期为对ACE抑制肽进一步研究提供参考。     

酪朊酸钠制备ACE抑制肽的研究

采用商业化的胰蛋白酶对底物浓度为10％的酪朊酸钠进行可控酶解，将酶解液的上清液经截留分子量为10ku的超滤膜分离后利川紫外分光光度法测定各组分ACE体外抑制活性，结果表明酪朊酸钠的胰蛋白酶酶解液具有较强的ACE抑制活性，超滤分离可提高产品的ACE体外抑制活性，为开发新一代降血压保健食品提供广阔的前景。     

超滤法制备高ACE抑制活性玉米肽

为了获得高降血压活性的玉米肽,采用截留分子质量为5、3、1 ku超滤膜对玉米蛋白酶解液进行分级分离,比较了各级份及未分级玉米肽的肽含量及血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性;并采用正交试验对最佳膜分离条件进行了优化。结果显示:经截留分子质量3 ku的膜滤过肽液的ACE抑制活性最高,其最佳膜分离条件为:原液浓缩比3∶1,pH值为5.5,温度为35℃时,此玉米肽滤过液的ACE抑制率大于82.27%。截留分子质量为3 ku的超滤膜为分离玉米ACE抑制肽的最佳超滤膜。     

蚕蛹源ACE抑制肽的稳定性和抑制ACE动力学

研究了温度、pH、干燥方式和体外肠道酶消化对蚕蛹源ACE抑制肽稳定性的影响,并通过Lineweaver-Burk双倒数曲线作图和紫外光谱初步探讨了蚕蛹源ACE抑制肽对ACE的抑制机理。结果表明:蚕蛹源ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下不稳定,易失活;冷冻干燥和喷雾干燥对蚕蛹源ACE抑制肽的活性影响较小;蚕蛹源ACE抑制肽对胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶具有较强的抗消化能力,经胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶共同消化后,蚕蛹源ACE抑制肽仍能保留初始活性的94.0%;蚕蛹源ACE抑制肽竞争性抑制ACE,其抑制常数(Ki)为0.06 mg/mL;ACE被蚕蛹源ACE抑制肽抑制后,ACE在240～280 nm附近的紫外吸光值明显增加,初步揭示了蚕蛹源ACE抑制肽抑制ACE活性时,ACE的分子结构发生了改变。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽培养基条件优化

以菜籽粕为原料,通过枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE 抑制肽。先以肽得率、ACE 抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的培养基条件,再以响应面分析法,优化枯草芽孢杆菌液态发酵培养基中的3 种成分,确定枯草芽孢杆菌发酵生产菜籽肽的最佳培养基工艺条件为：磷酸二氢钾0.45g/100mL、葡萄糖0.8g/100mL、料液比1:23、初始pH7.0。优化后的ACE 抑制率可达69.79%。     

蛋清蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽研究进展

在分析蛋清蛋白的组成及酶解性质的基础上,综述了国外蛋清血管紧张素转化酶抑制肽来源、制备方法、降压活性、酶解动力学、结构修饰和包埋技术的研究现状,并对其在食品、医药领域研究和应用的方向进行了展望。以期为我国蛋清蛋白降压肽的研究与开发提供参考。     

燕麦麸蛋白ACE抑制肽的制备及性质研究

以燕麦麸为原料制备了燕麦麸蛋白,并利用蛋白酶对其酶解。测定了不同蛋白酶的水解产物的ACE抑制活性,以Alcalase和Trypsin酶解物活性最强。在此基础上进一步考察了Alcalase和Trypsin酶解物的DH对ACE抑制活性的影响,结果表明DH11.0%的Alcalase酶解物和DH12.2%的Trypsin酶解物有最大ACE抑制活性,分别达92.31%和86.36%。两种酶解物的肽组分相对分子质量均较低,大部分都低于1 000u。氨基酸分析表明ACE抑制肽中富含Glu、Leu、Pro和Phe。为了达到活性组分富集的目的,超滤技术是一种切实可行的方案。     

Two Novel Bioactive Peptides from Antarctic Krill with Dual Angiotensin Converting Enzyme and Dipeptidyl Peptidase IV Inhibitory Activities

Inhibition of dipeptidyl peptidase IV (DPP‐IV) and angiotensin converting enzyme (ACE) are considered useful in managing 2 often associated conditions: diabetes and hypertension. In this study, corolase PP was used to hydrolyze Antarctic krill protein. The hydrolysate (AKH) was isolated by ultrafiltration and purified by size‐exclusion chromatography, ion exchange chromatography and reversed‐phase high‐performance liquid chromatography (RP‐HPLC) sequentially. The in vitro inhibitory activities of all AKHs and several fractions obtained against ACE and DPP‐IV were assessed. Two peptides, purified with dual‐strength inhibitory activity against ACE and DPP‐IV, were identified by TOF‐MS/MS. Results indicated that not all fractions exhibited dual inhibitory activities of ACE and DPP‐IV. The purified peptide Lys‐Val‐Glu‐Pro‐Leu‐Pro had half‐maximal inhibitory concentrations (IC₅₀) of 0.93±0.05 and 0.73±0.04 mg/mL against ACE and DPP‐IV, respectively. The other peptide Pro‐Ala‐Leu had IC₅₀ values of 0.64±0.05 and 0.88±0.03 mg/mL against ACE and DPP‐IV, respectively. This study firstly reported the sequences of dual bioactive peptides from Antarctic krill proteins, further provided new insights into the bioactive peptides responsible for the ACE and DPP‐IV inhibitory activities from the Antarctic krill protein hydrolysate to manage hypertension and diabetes.     

小龙虾头中血管紧张素转化酶抑制肽提取工艺优化研究

采用胃蛋白酶水解小龙虾头制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,通过体外检测法测定ACE抑制率。采用二次旋转优化组合试验对制备工艺进行优化,结果表明:pH2.4,温度40.85℃,底物浓度10.05%,酶-底物质量比6.97,水解4.5 h时ACE抑制率可达到80.9%。     

酶法制备火麻肽及其血管紧张素转化酶抑制活性研究

以火麻蛋白为原料,在碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味酶和木瓜蛋白酶4种单酶酶解火麻蛋白的基础上,再优选碱性+中性蛋白酶、碱性+风味酶、碱性+木瓜蛋白酶双酶分步对火麻蛋白进行酶解,酶解物(HPH)及其超滤组分的体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性采用高效液相检测法(HPLC)进行测定。结果得到火麻蛋白最佳酶解组合为碱性+中性蛋白酶,最佳工艺条件为:碱性蛋白酶加酶量8000 U/g,pH10.0,酶解温度50℃,酶解时间4 h;中性蛋白酶加酶量8000 U/g,pH7.0,酶解温度45℃,酶解时间4 h,分步酶解物水解度(DH)和ACE抑制活性分别达74.52%和82.14%,但其与超滤各组分对ACE抑制活性差异并不显著。该研究为产业化制备火麻降血压肽提供理论依据。     

牛骨血管紧张素转化酶抑制肽发酵动力学及结构与特性分析

前期筛选蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus MBL13-U),结合嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus,St)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,Lp)混合发酵牛骨粉制备血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,对其发酵动力学进行研究,采用Logistic和Luedeking-Piret等方程对发酵过程进行非线性拟合,建立发酵过程中菌体生长、产物生成、基质消耗动力学模型,拟合度均高于0.97。通过扫描电镜、紫外扫描、差示扫描量热仪对ACE抑制肽进行结构表征。结果表明,由于牛骨ACE抑制肽具有良好的吸湿性,其在扫描电镜下表面出现明显的沟壑痕迹;在222 nm波长处出现强吸收峰,符合胶原多肽的特征吸收;与牛骨胶原蛋白相比,其热变性温度升高,热稳定性较强。同时对其特性分析表明,牛骨ACE抑制肽具有较好的溶解性、较强的耐酸碱性,在0.9 mol/L以内的NaCl浓度条件下耐盐性较强,胃肠道酶对牛骨ACE抑制肽的影响较小。     

一种筛选血管紧张素转换酶抑制肽的方法

实验建立一种从蛋白水解物中快速高效鉴别血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的方法：先对蛋白按照酶解位点进行序列搜寻,建立一个样品肽库;在量效结构关系(QSAR)研究的基础上对样品库中的肽的ACE抑制活性进行预测,然后化学合成目标肽及测定活性;必要时用现代分析技术确证蛋白水解物中目标肽的存在。用此方法对油菜、大米、小麦蛋白水解物中三肽ACE抑制活性进行研究,发现IC50在10μmol/L以下的三肽多达34条,选择了11条活性较高的肽合成验证,最后发现潜藏在油菜Cruciferin BNC1 (P33523)蛋白序列347～349的LRL活性最高,IC50达到3.42μmol/L,且具有较好的稳定性。抑制动力学研究表明,LRL属于竞争性抑制剂;油菜蛋白胃蛋白酶水解物进行分子质量分段,取分子质量小于1000D部分进行高效液相色谱(HPLC)分析发现有LRL。