Bestimmung von Kuhmilch-Casein in Schaf- und Ziegenk?se mittels Immunelektrophorese

Zusammenfassung Durch Kombination der Kreuzimmunelektrophorese nach Clarke u. Freeman mit einer Modifikation der Silberfärbung nach Willoughby u. Lambert wird es unter Verwendung eines käuflichen Antiserums gegen Rindercasein möglich, bei der Herstellung von Schaf- und/oder Ziegenkase zugesetzte Kuhmilch bis zu der unteren Grenze von 0,1–0,2% eindeutig und reproduzierbar zu bestimmen. Die Nachweisgrenze liegt damit im unteren Größenord-nungsbereich des Starterkulturenzusatzes bei der Herstellung von Rohmilchkäsen und sogar um mehr als das 10fache unter den Mengen an Starterkulturen, wie sie zur Käseherstellung aus erhitzter Milch eingesetzt werden. Durch die Möglichkeit Casein als Bestimmungsgröße zu verwenden, ist die Methode zur Untersuchung von Käsen aus Rohmilch sowohl als auch von solchen aus erhitzter Milch hergestellten in gleicher Weise geeignet.

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Detection of bovine casein in sheep and goat milk cheese by means of immunoelectrophoresis

Summary By means of crossed immunoelectrophoresis according to the method of Clarke and Freeman combined with a modification of the silver staining technique of Willoughby and Lambert, using a commercial anti-bovine casein rabbit serum, in sheep's and goat's cheese it is possible to evaluate the added cow's milk in a clear and reproducible way down to a level of 0.1–0.2%. The lower detection limit is within the lower scale after the addition of starter cultures usual in the production of cheese from raw milk and more than tenfold below the amounts of starter cultures used in the production of cheese from heated milk. Because of the possibility of using casein for detection, this method is suitable for analysis, not only in cheese made from raw milk, but also in that made from heated milk.

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Die vorliegende Arbeit wurde aus Mitteln der Mitverantwortungsabgabe von der Kommission der Europäischen Gemeinschaft in Brüssel finanziell unterstützt     

Enzymatic precipitation in agar gel as a method for the detection of sodium caseinate in raw and heated meat products

Summary A simple and inexpensive enzymatic precipitation method for the specific detection of sodium caseinate in meat products and other foods is described. The casein complex of other casein-containing additives such as dry milk powder, pasteurized whole and skim milk does not react with the proteolytic enzymes used to precipitate the caseinate. The reaction is not influenced by the presence of moderate amounts of polyphosphates, and the method is equally well applicable to raw and heated products. With some experience the method may be used in a semi-quantitative assay of sodium caseinate. The smallest amount of caseinate that can be detected is approximately 0.2–0.4%.

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Zusammenfassung Es wird ein einfacher und billiger Präcipitationstest für den spezifischen Nachweis von Natriumcaseinat in Fleischprodukten und anderen Lebensmitteln beschrieben. Der Caseinkomplex von anderen Casein enthaltenden Zusätzen, wie Trockenmilchpulver, pasteurisierte Voll- und Magermilch, ergibt keine Reaktionen mit den proteolytischen Enzymen, die für den Test verwendet werden. Die Reaktion wird durch das Vorhandensein geringer Mengen kondensierter Phosphate nicht beeinflußtt und kann sowohl für rohe als auch für erhitzte Produkte angewendet werden. Die unterste Nachweisgrenze für Caseinat liegt bei etwa 0,2–0,4%.

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This work was supported by a grant from the Agricultural Research Council of Norway.     

Immunologische Bestimmung des Caseinanteiles in erhitzten Lebens- und Futtermitteln

Zusammenfassung Casein kann aus hitzebehandelten unlöslichen Lebens- und Futtermitteln durch milde Perameisensäureoxydation freigesetzt und nach Vorreinigung durch Fällung immunologisch mit Antiserum gegen natives Casein bestimmt werden. Während die Genauigkeit der experimentell sehr einfachen Radial-Immunodiffusions-Technik für quantitative Analysen unbefriedigend ist, werden immunoelektrophoretisch Aussagen über den Casein- bzw. Milchanteil von Erzeugnissen mit verschiedenartigen Eiweißstoffen in einer Qualität erhalten, die derzeit mit anderen Untersuchungsmethoden kaum erreichbar ist.

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Immunological analysis of the casein proportion in heated food and feedstuffs

Summary Casein can be liberated from heat treated, unsoluble food and feedstuffs by performic acid oxidation under mild conditions. After purification by precipitation the oxidized solubilized protein still reacts with antibodies against native casein. Whereas the radial immunodiffusion technique, which easily can be handled, doesn't meet the requirements of quantitative analysis with respect to precision, an immuno-electrophoretic method gives information about the proportion of casein or milk, respectively, in products containing different proteins to a degree, which cannot yet be reached by any other analytical technique.

     

Selenium content of sheep's milk and its distribution in protein fractions

The selenium (Se) distribution in sheep's milk is reported. Skim milk was found to contain the major part (98%) of total milk Se. The Se distribution over casein and whey protein fractions depends on the separation method used, but irrespective of these methods, skim milk Se is mainly associated with the casein fraction (>68%). Approximately 11%, 4% and 17% Se is removed by dialysis (molecular mass cut-off 10–12 kDa) from skim milk, casein and whey respectively, indicating a major association of Se with milk proteins. This observation is confirmed through Se analysis of individual caseins and whey proteins isolated through ion-exchange chromatography and gel filtration. Se concentrations of the different isolated milk proteins show considerable variations (caseins, 304–750 ng Se/g; whey proteins, 241–806 ng Se/g).

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Der Selengehalt von Schafsmilch und seine Verteilung in den Proteinfraktionen

Zusammenfassung Diese Studie bespricht die Selen-Verteilung in Schafsmilch. Magermilch enthält 98% des gesamten Se der Milch. Die Se-Verteilung ist abhängig von der Trennungstechnik bei der Abscheidung des Caseins und der Molkenproteine. Das Selen befindet sich in der Magermilch, hauptsächlich in der Casein-Fraktion (>68%). Ungefähr 11% bzw. 4% bzw. 17% des Se wurden aus Magermilch bzw. Casein bzw. Molke durch Dialyse (molekulare Ausschaltung 10–12 kDa) entfernt, was auf eine Assoziation von Se mit den Milchproteinen hinweist. Dies wird bestätigt durch eine spezielle Se-analyse des Caseins und den Molkeproteinen mit Hilfe der Ionen-austauschchromatographie bzw. Gelfiltration. Der Segehalt der isolierten Milchproteine zeigt bemerkenswerte Unterschiede: Casein: 304–750 ng Se/g; Molkenproteine: 241–806 ng Se/g.

     

Selenium content of goat milk and its distribution in protein fractions

Summary This study reports on selenium distribution in goat milk. Skim milk was found to contain the major part (94%) of total milk selenium. The selenium distribution over casein and whey protein fractions depends on the separation method used, but irrespective of these methods, skim milk selenium is mainly associated with the casein fraction (> 69%). Approximately 9%, 7% and 24% of selenium is removed by dialysis (molecular cutoff 10–12 kDa) from skim milk, casein and whey respectively, indicating a major association of selenium with milk proteins. This observation is confirmed by selenium analysis of individual caseins and whey proteins isolated through ion-exchange chromatography and gel filtration. Selenium concentrations of the different isolated milk proteins show considerable variation (caseins: 294–550 ng Se/g; whey proteins: 217–457 ng Se/g).

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Der Selengehalt von Ziegenmilch und seine Verteilung in den Proteinfraktionen

Zusammenfassung Diese Studie bespricht die Selen-Verteilung in Ziegenmilch. Magermilch enthält 94% des gesamten Selens der Milch. Die Selen-Verteilung ist abhängig von der Technik des Abtrennens des Caseins von den Molkenproteinen, aber ungeachtet dessen befindet sich das Selen der Magermilch hauptsächlich in der Casein-Fraktion (>69%). Ungefähr 9% bzw. 7% bzw. 24% des Selens wurden aus Magermilch bzw. Casein bzw. Molke durch Dialyse (molekulare Ausschaltung 10–12 kDa) entfernt, was auf eine Assoziation des Selens mit den Milchproteinen hinweist. Dies wurde bestätigt durch die Selenanalyse des durch Ionenaustauschchromatographie bzw. Gelfiltration isolierten Caseins und der Molkeproteine. Der Selengehalt der verschiedenen isolierten Milchproteine zeigt bemerkenswerte Differenzen (Caseine: 294–550 ng Se/g; Molkeproteinen: 217–457 ng Se/g).

     

Evaluation of an in vitro method for the estimation of the selenium availability from cow's milk

The present study evaluates the application of an in vitro digestion procedure for estimating the selenium (Se) availability from cow's milk. The results obtained by this in vitro method indicate that only a small portion (<10%) of milk Se can be estimated as available. The available fraction of whole milk (4.7%) was significantly lower compared to the Se availability of skim milk (7.3%). Investigations on the methodology of the in vitro method indicate that the portion of total potentially available Se, determined as total dialysable Se, increases simultaneously with protein digestibility along with the digestion process. Therefore it is concluded that protein digestibility might largely influence the Se availability from milk.

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Bewertung einer In-vitro-Methode für die Bestimmung der biologischen Verfügbarkeit von Selen in Kuhmilch

Zusammenfassung Diese Studie bewertet die Anwendung eines In vitro Digestionsverfahrens für die Bestimmung der biologischen Verfügbarkeit von Selen in Kuhmilch. Danach ist nur eine kleine Portion (<10%) des Milchselens verfügbar. Die verfügbare Fraktion von Vollmilch (4,7%) war erheblich niedriger als die der Magermilch (7,3%). Die Untersuchung der Methode legt dar, daß der Anteil des totalen potentiellen verfügbaren Selens, bestimmt als das totale dialysierbare Selen, gleichzeitig zunimmt mit der Proteindigestierbarkeit während des Digestionsverfahrens. Hieraus kann geschlossen werden, daß die Protein-digestierbarkeit einen Einfluß auf die Verfügbarkeit des Selens in Milch haben kann.

     

Zur Hydroxyprolinbestimmung in Lebensmitteln II. Farbbildung des extrahierten Hydroxyprolin-Oxydationsproduktes in Isobutanol

Zusammenfassung Durch Extraktion der bei der Oxydation von Hydroxyprolin mit H₂O₂ gebildeten Pyrrolcarbonsäure mit Isobutanol kann die Farbbildung mit p-Dimethylaminobenzaldehyd mit größerer Ausbeute und störungsfrei durchgeführt werden. Der für die Gleichgewichtseinstellung erforderliche Reagensüberschuß kann wesentlich reduziert werden.

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About the hydroxyproline determination in foods II. Colour formation of the extracted hydroxyproline-oxidation product in isobutanol

Summary Pyrrol-carbonic acid, formed by oxydation of hydroxyproline with hydrogenperoxide, is extracted with isobutanol. The following simultaneous decarboxylation and reaction with p-dimethylaminobenzaldehyde can bring greater yield and can be carried out without interference. The excess of reagent necessary to reach equilibrium, can be lowered.

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Auszug aus der Dissertation von Fritz Niermann: Untersuchungen zur Ehrlichschen Reaktion als Grundlage der Hydroxyprolinbestimmung in Lebensmitteln. Technische Universität München 1973 (Promotionstag 30. Juli 1973).