巴戟天多糖脱蛋白方法的研究

通过热水浸提、乙醇沉淀的方法得到巴戟天粗多糖,比较Sevag法、三氯醋酸法以及酶与三氯醋酸结合法对巴戟天水溶性多糖的脱蛋白效果,结果表明:经过0.8%(w/v)木瓜蛋白酶处理后,加入3%(v/v)的4mol/L三氯醋酸结合法进行脱蛋白,可以得到多糖损失率低、脱蛋白率高的良好效果。     

澳洲坚果多糖脱蛋白方法研究

为得到纯化的澳洲坚果多糖,采用热水提取多糖,并对其进行分步醇沉。以蛋白脱除率和多糖损失率为指标,比较Sevage法、TCA法、碱性蛋白酶法和碱性蛋白酶-Sevage联用法对60%~90%醇沉粗多糖脱除蛋白的效果,再利用DEAE-Sepharose Fast Flow及Superdex 200柱层析进一步纯化多糖。结果表明,碱性蛋白酶-Sevage联用法为多糖脱蛋白最佳方法,其最优条件为碱性蛋白酶酶用量1.0%(v/v)、酶解温度50℃、酶解时间3 h,再经Sevage法处理一次,蛋白脱除率达92.3%,多糖损失率为39.9%。随后经DEAE-Sepharose Fast Flow及Superdex 200柱层析纯化得到澳洲坚果多糖纯品(MIPS2a),紫外和红外扫描表明MIPS2a不含蛋白且具备一般多糖类物质的光谱特征,达到了多糖纯化的目的。     

剑麻果胶多糖脱蛋白方法研究

以蛋白脱除率和多糖损失率为指标比较5种方法对剑麻果胶多糖脱蛋白效果的影响。结果表明:酶法与D152弱阳离子交换树脂结合法蛋白脱除率较高,并且多糖损失率较低,综合考虑为最佳方案。最佳条件为:先在木瓜酶用量2%、pH 5.0、反应温度50℃、反应时间4 h条件下脱蛋白一次,然后再利用D152弱阳离子交换树脂,在30℃恒温,pH 5.0条件下静态吸附4 h脱蛋白一次。经过最佳条件处理,剑麻果胶多糖的蛋白脱除率88.54%,多糖损失率9.25%。     

荔枝粗多糖脱蛋白方法的研究

以脱蛋白率和多糖损失率为指标,比较Sevag法、三氯乙酸-Sevag联合法以及酶-Sevag联合法对荔枝粗多糖的脱蛋白效果,结果表明:Sevag法、三氯乙酸-sevag联合法和酶-Sevag联合法的脱蛋白率分别为42.83%、78.57%和90.97%,多糖损失率分别为31.55%、25.74%和24.78%,综合比较分析发现酶-Sevag联合法效果最好,是一种有效的荔枝多糖脱蛋白方法.     

姬松茸多糖脱蛋白方法的研究

采用四种方法对姬松茸子实体多糖进行脱蛋白提纯,结果表明:酶法和三氯乙酸-正丁醇法较好,将两种方法结合使用发现,当pH为5时,40℃水浴酶解1h,再加入2倍于多糖溶液体积的三氯乙酸-正丁醇液(V/V=1∶10),振摇15min,静置1.5h,蛋白质去除率最高。     

大枣多糖脱蛋白的研究

讨论采用大枣多糖酶制剂法脱蛋白的最佳工艺条件,试验确定为:温度60℃,pH5.0,浓度10g/L木瓜蛋白酶酶液与多糖液的体积比为0.4:1,酶解时间90 min,蛋白除去率为91.8%.     

库拉索芦荟凝胶多糖脱蛋白方法研究

为研究库拉索芦荟凝胶多糖蛋白质的脱除工艺条件,本文以蛋白质脱除率和多糖保留率为指标,比较三氯乙酸(TCA)法、Sevag法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-TCA联用法、木瓜蛋白酶-Sevag联用法脱除芦荟凝胶多糖蛋白的效果。结果显示,木瓜蛋白酶-TCA联用法效果最好,其条件为酶用量2%、酶解温度60℃、酶解时间1h、pH为6,采用5%TCA除蛋白1次,此时蛋白质去除率为83.4%,多糖保留率为74.9%。不同脱蛋白法对芦荟凝胶多糖的脱蛋白效果有较明显差异,木瓜蛋白酶-TCA联用法是一种有效的芦荟凝胶多糖脱蛋白方法。     

马齿苋多糖脱蛋白方法的研究

本文探讨了五种方法对马齿苋多糖中蛋白质的脱除效果，结果表明：酶法和三氯乙酸-正丁醇法结合使用效果最好，即酶用量为2％，pH为5．0，在60℃水浴中酶解2h，再用等体积的三氯乙酸-正丁醇溶液重复处理4次。蛋白质的脱除效率最高。     

大枣多糖脱蛋白方法的研究

以大枣多糖为对象,比较了多糖的多种脱蛋白方法。在实验比较的五种脱蛋白方法中,复合酶法效果最佳,用中心复合实验设计的方法,研究了不同工艺条件组合对多糖脱蛋白效果的影响,并得出脱蛋白效果最佳时的工艺条件为:蛋白酶浓度为5.3%、反应温度为55℃、反应时间为3.3h。     

大枣多糖脱蛋白方法的研究

以大枣多糖为对象,比较了多糖的多种脱蛋白方法。在实验比较的五种脱蛋白方法中,复合酶法效果最佳,用中心复合实验设计的方法,研究了不同工艺条件组合对多糖脱蛋白效果的影响,并得出脱蛋白效果最佳时的工艺条件为:蛋白酶浓度为5.3%、反应温度为55℃、反应时间为3.3h。      

蚕蛹蛋白营养面包的研制

将蚕蛹蛋白应用于面包的生产.通过单因素试验发现蚕蛹蛋白、水、酵母以及面包改良剂添加量对面包品质影响较大;通过正交试验确定蚕蛹蛋白营养面包的最佳工艺配方.结果表明:蚕蛹蛋白面包的最佳工艺配方为蚕蛹蛋白2％,酵母1.2％,面包改良剂0.1％,水55％,在此工艺条件下,蚕蛹蛋白面包风味和品质最佳.     

蚕蛹多肽制备工艺及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解蚕蛹蛋白,以水解度和清除DPPH·能力为指标对酶解过程进行分析,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶对蚕蛹蛋白具有较好的水解效果,其水解产物有较高抗氧化活性,对DPPH·、超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)都具有较强的清除能力。     

蚕蛹蛋白多肽液抗肿瘤作用的实验研究

通过动物及细胞实验研究蚕蛹蛋白多肽液的抗肿瘤作用。蚕蛹蛋白多肽质量浓度增加可使两肿瘤细胞存活率降低;肿瘤细胞总蛋白质含量随多肽浓度的增加逐渐降低(p<0.01),且在0.5～1.5g/L内呈剂量依赖性;对A549和Ketr-3的周期阻滞分别为G2～M期和G0～G1期;蚕蛹蛋白多肽液在150～600mg/g内,对小鼠S180和H22的抑瘤率分别达到28.72%～58.18%和27.64%～63.88%,明显延长EAC小鼠的生存时间。实验结果表明蚕蛹蛋白多肽液有显著的抗肿瘤作用。     

超临界CO2萃取蚕蛹油的研究

蚕蛹油中富含α-亚麻酸和其他不饱和脂肪酸,具有较高的食用和药用价值。蚕蛹油传统的提取方法存在收率低和溶剂残留等问题。研究了采用超临界二氧化碳萃取技术从蚕蛹中萃取蚕蛹油的工艺,通过单因素试验和正交试验确定了适宜的萃取工艺参数为萃取压力25Mpa,萃取时间2h,萃取温度35℃,在此试验条件下萃取率可达89.9%。     

贮藏时间及缫丝工艺对桑蚕蛹蛋白质和脂肪酸组成及蛹油体外抗氧化活性的影响

以桑蚕蛹为对象,研究其在贮藏过程中及缫丝后蛋白质、脂肪酸变化及蚕蛹油的抗氧化活性,为缫丝副产物深加工提供理论支持。按照蚕蛹的形态变化,将贮藏期分为4 个阶段,对各阶段蚕蛹进行基本化学成分析;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析桑蚕蛹蛋白质组分;气相色谱-质谱联用分析蚕蛹油脂肪酸组成;此外,对蚕蛹油1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基清除能力进行评价。结果表明,贮藏时间对蚕蛹基本化学成分总体有显著性影响（P＜0.05）。蚕蛹蛋白质主要分布在约30 kDa和约70 kDa处,且表达量随着蚕蛹贮藏时间延长而降低。蛹油含有16 种脂肪酸,相对含量较高的棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和α-亚麻酸在贮藏期内变化显著（P＜0.05）。贮藏期蛹油DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率的半抑制质量浓度范围分别为20.93～52.00 mg/mL和33.32～156.81 mg/mL,其体外抗氧化活性可能与其总酚含量（15.95～77.50 mg/kg）变化有关。经缫丝加工后,蚕蛹蛋白质和脂肪酸组成发生明显变化,且蚕蛹油体外抗氧化活性降低。综上,蚕茧的贮藏时间、缫丝工艺能够影响蚕蛹蛋白质、脂肪酸组成和蛹油中总酚含量,并对蚕蛹油的抗氧化活性产生较大影响。因此,可根据目的产物的表达水平或生物活性有针对性地收集各贮藏阶段的蚕蛹应用于加工生产中。     

蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究

将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉.用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果.然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性.     

微生物发酵法脱除蚕蛹蛋白臭味的研究

利用微生物发酵法脱除蚕蛹蛋白的臭味。结果表明：活性干酵母和瑞士乳杆菌发酵均可有效去除蚕蛹蛋白的臭味。活性干酵母发酵脱臭工艺条件为：从节省原料考虑,活性干酵母用量为0.3%,不加葡萄糖和其他营养物质, 37℃发酵80min 可完全除臭;从节省时间考虑,活性干酵母用量为0.3%、葡萄糖用量为2%,37℃下发酵28～35min 可完全除臭。瑞士乳杆菌发酵脱臭工艺条件为：活菌数为108CFU/ml 的瑞士乳杆菌液用量为2%、MRS 培养基用量为10%, 37℃下发酵7h 可完全除臭。     

霍山铁皮石斛多糖的脱蛋白工艺及结构分析

优选霍山铁皮石斛多糖脱蛋白工艺,并对其进行分离纯化及结构分析。以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,比较Sevag法、酶法及酶-Sevag法3种脱蛋白方法。结果表明,酶-Sevag法脱蛋白效果最佳,蛋白脱除率为81.58%,多糖损失率为15.63%。采用DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100凝胶柱分离纯化石斛多糖,得活性组分DOPA-1;采用紫外扫描光谱、高效液相色谱鉴定DOPA-1为均一多糖;采用气相色谱分析表明组分单糖由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成(各单糖的物质的量比为1∶0.42∶0.27);采用红外光谱和刚果红实验分析糖链结构表明,DOPA-1有典型的糖类特征吸收峰,存在β-D-甘露吡喃糖苷,且具有三股螺旋构象。     

复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

四角蛤蜊多糖脱蛋白方法研究

目的：优选出四角蛤蜊粗多糖脱蛋白的方法,并对脱蛋白后的产物进行含量测定和活性验证。方法：通过离子交换法、三氯乙酸(TCA)法、絮凝法及盐析法分别对四角蛤蜊粗多糖进行脱蛋白,比较各种方法的脱蛋白效果。结果：离子交换法、TCA法、盐析法脱蛋白效果都较理想,所得除蛋白多糖总糖含量分别为85%、90.96%、83%,絮凝法不适合对四角蛤蜊粗多糖中蛋白质的去除,活性实验表明TCA法和离子交换法所得样品降血糖活性较好,其中TCA法所得样品与模型对照组比较有显著性差异,P＜0.05。结论：优选方法合理可行。