南极磷虾抗氧化多肽制备的研究

以清除超氧阴离子自由基、DPPH自由基和羟基自由基能力为指标,筛选制备南极磷虾抗氧化多肽的水解条件,得到高效的抗氧化多肽制品。结果表明:胰蛋白酶、中性蛋白酶复合,酶解南极磷虾6h后得多肽的抗氧化能力最强,超氧阴离子自由基的清除率达到11.5%,DPPH自由基的清除率达到72.7%,羟基自由基的清除率达到84.8%。经超滤分离,分子量范围在5~10ku的多肽表现出较强的清除三种自由基的能力。对其进行tricine-SDS-PAGE电泳,结果显示电泳图谱上出现了两个条带。     

枸杞多肽的制备及其抗氧化活性研究

研究了中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合水解制备枸杞活性肽的工艺条件,并采用离子交换层析和凝胶柱层析对酶解产物进行纯化,以制备具有较高抗氧化活力的枸杞多肽.以DPPH·清除率为指标,通过响应面优化得到最佳酶解工艺条件:酶解温度51℃,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比1∶2.65,酶解时间4.3 h,p H=7.0.此条件下得到的枸杞多肽对DPPH·清除率为(23.32±0.47)%.分别采用DEAE阴离子交换层析和Sephadex G-25凝胶柱层析对枸杞多肽进行分离,最终获得DPPH·和OH·清除率分别为(72.65±1.84)%和(58.72±1.88)%的A-1组分,该组分的DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和OH·清除能力均随浓度的增大而提高.     

美拉德反应优化藜麦多肽抗氧化活性的研究

通过美拉德反应修饰藜麦多肽，以期获得抗氧化活性更高的藜麦多肽美拉德产物(QP-MRPs)。通过单因素试验，考察了QP-MRPs对DPPH自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)的清除能力。运用电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance, EPR)波谱技术，更加直接、准确地研究QP-MRPs的抗氧化活性。结果表明，4种糖(核糖、木糖、葡萄糖、果糖)的美拉德产物均有抗氧化活性，核糖、木糖生成的QP-MRPs的DPPH·和·OH清除率较高，选择木糖进行工艺优化。运用均匀试验设计法对条件进行优化，得到最佳工艺条件：肽糖比为1.5∶1,反应pH为10,反应温度为140℃,反应时间为240 min。以优化所得到的最佳条件进行验证试验，QP-MRPs的DPPH·清除率和·OH清除率分别为76.11%和71.57%。使用木糖在最优条件下修饰藜麦多肽，可生产抗氧化活性高的QP-MRPs。     

挤压膨化脱脂处理对高温豆粕制备蛋白多肽抗氧化性的影响

采用挤压膨化预处理酶水解法制备高温豆粕多肽,再通过超滤处理分离出不同分子质量的多肽,研究挤压膨化脱脂处理对高温豆粕制备蛋白多肽抗氧化性的影响。在单因素试验基础上,通过响应面分析法对挤压膨化工艺条件进行优化,确定挤压膨化最优工艺为:物料含水量22%,套筒温度95℃,螺杆转速125 r/min,模孔孔径20 mm。在最优工艺条件下,多肽的O2-·清除能力和抑制ROO·能力分别为46.23%和51.41%。通过电子自旋共振(ESR)对不同分子质量豆粕多肽的·OH清除率进行测定,结果表明,分子质量小于1 ku的多肽·OH清除能力最大。     

超滤精制对芝麻蛋白水解液ACE抑制活性和抗氧化活性的影响

以芝麻饼粕为原料,采用超滤技术制备功能多肽,研究超滤对蛋白酶水解肽的氨基酸组成、肽谱、降血压和抗氧化功能特性等影响。结果表明:经截留分子质量为10 ku和3 ku的超滤膜过滤,所得到的3个组分(相对分子质量分布10 ku、3~10 ku和3 ku)的必需氨基酸质量分数分别为15.6%、14.9%、15.0%,显著高于未经超滤(12.9%),分子质量分布在3~10 ku组分的总氨基酸质量分数达53.1%,比未经超时提高了7.6%;其中分子质量分布为3~10 ku和3 ku酶解液的IC50值分别降低了6.6%和7.9%,血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性显著提高;分子质量分布为3~10 ku和3 ku酶解液的DPPH·自由基清除率IC50值与未经超滤时均降低了8.6%,羟自由基清除率分别降低4.20%和26.57%,抗氧化活性显著提高。     

超滤对大鲵多肽抗氧化活性的影响

为了获得具有高抗氧化性的大鲵多肽,以大鲵肌肉为原料,经复合酶(风味蛋白酶和中性蛋白酶)酶解后,水解度达到44.12%,制得多肽得率为90.28%的大鲵多肽酶解液,用截留分子量分别为20、5、2、0.3 ku的超滤膜将其分离成5个分子量段,研究不同分子量段大鲵多肽对DPPH·、·OH和O-2·清除能力的影响。结果表明:不同分子量段的大鲵多肽组分的抗氧化能力大小顺序为:0.3~2 ku组分2~5 ku组分小于0.3 ku组分5~20 ku组分。分子量为0.3~2 ku的大鲵多肽抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH和O-2·的EC50分别为0.4、0.7、1.5 mg/m L。因此,采用截留分子量为2 ku和0.3 ku的超滤膜可以分离得到具有高抗氧化活性的大鲵多肽。     

小米多肽酶解工艺及其抗氧化和ACE抑制活性

以小米蛋白为原料，制备具有抗氧化活性和血管紧张素转移酶(ACE)抑制活性的食源性多肽。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解小米蛋白，选取最优酶解工艺。选用碱性蛋白酶酶解4 h，得到的蛋白水解液分别通过3 ku和10 ku的超滤膜，得到分子质量＜3，3~10 ku和＞10 ku的3种组分，测定其抗氧化活性和ACE抑制活性。结果表明:采用碱性蛋白酶酶解4 h得到的蛋白水解液经超滤后得到分子质量＜3 ku的多肽具有最高的抗氧化活性和ACE抑制活性，其DPPH清除能力为38.44%，ABTS自由基清除能力为81.62%，羟基自由基清除能力为68.49%，ACE抑制活性为87.53%。此方法得到的多肽分子质量小，功能氨基酸含量较高，具有良好的抗氧化活性和ACE抑制活性。本研究结果为抗氧化肽和ACE抑制肽的开发提供试验依据，对未来工业化的发展提供理论参考。     

玉米多肽抗氧化作用的研究

用K3[Fe(CN)6]测定了玉米多肽的还原力;采用脱氧核糖一铁体系、超氧阴离子自由基体系、二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)体系对玉米多肽的抗氧化活性进行了研究,并同VC进行了比较.结果表明玉米多肽具有还原力.玉米多肽对这几种自由基均有不同程度的清除作用,其中在20～50 mg/mL清除羟基自由基能力与VC相差不大;玉米多肽清除DPPH·和O2-·的能力均低于VC,玉米多肽5 mg/mL时,DPPH·清除率接近57.59%,10 mg/mL时,O2-·清除率为46.05%.     

裙带菜多肽的制备及其抗氧化活性的研究

实验以裙带菜为原料制备裙带菜蛋白,通过单因素和正交试验确定了碱性蛋白酶为裙带菜抗氧化肽制备的最佳酶,最优酶解条件为:料液比4%、酶解温度55℃、酶解时间3.5h、加酶量7500U/g、pH 10.0,该条件下制备的裙带菜多肽的还原能力最强,700nm处的吸光值为0.411。对制备的裙带菜多肽进行超滤分级,从O_2~-·清除率、·OH清除率、DPPH自由基清除率、Fe~(2+)螯合率4个方面,探究了不同分子量裙带菜多肽的抗氧化能力。结果表明:裙带菜多肽对Fe~(2+)的螯合能力和DPPH自由基的清除能力较强,对O_2~-·和·OH的清除能力相对较弱,且总体呈现低分子量肽段的抗氧化活性较强,高分子量肽段的抗氧化活性较弱的趋势。     

脱脂麦胚发酵过程中抗氧化活性变化研究

该实验通过测定脱脂麦胚发酵前后对DPPH、羟基、超氧阴离子、ABTS自由基的清除率以及总还原能力、多肽含量的变化,研 究了脱脂麦胚发酵过程中抗氧化活性的变化。 结果表明,脱脂麦胚发酵后,各指标均呈先增大后减小的趋势,除ABTS自由基的清除率在24 h达到最高外,其他指标均在32 h达到最高。 DPPH·、·OH、O2·、ABTS 的清除率分别提高了37.60%、8.75%、4.57%和5.76%,抗氧化活性显著提高。 多肽含量及总还原能力在发酵时间为32 h时达到最大值,吸光度值分别为0.34和0.12。     

洋葱蛋白及多肽体外抗氧化活性研究

目的:测定洋葱蛋白及多肽的体外抗氧化性。方法:以Vc为对照品,采用普鲁士蓝法、邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法分别测定洋葱多肽与蛋白的总还原能力和对·OH、O_2~-·、DPPH·3种自由基的清除能力。结果:相同浓度的洋葱多肽总还原能力稍强于洋葱蛋白,并在0.032 g/m L时达到对照品Vc总还原能力的58%以上;浓度为0.24 g/m L时洋葱蛋白和多肽的O_2~-·清除率分别为53%和63%;浓度大于0.24 g/m L时,洋葱多肽及蛋白的DPPH·清除率分别为57%和42%;浓度高于0.032 g/m L时,洋葱蛋白的·OH清除效果稍高于多肽,达到Vc对·OH的清除率的50%以上。结论:洋葱蛋白及多肽均具有一定体外抗氧化能力,且洋葱多肽的总还原能力、对O_2~-·和DPPH·的清除能力强于洋葱蛋白,较高浓度时洋葱蛋白对·OH的清除能力则强于多肽。     

清酱肉多肽的抗氧化活性和氨基酸分析

以清酱肉为研究对象,提取并通过超滤分离得到清酱肉多肽（分子质量＜10 kDa）,测定不同质量浓度多肽液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（·OH）的清除效果、Fe2＋螯合能力和还原能力,分析清酱肉多肽的氨基酸组成。结果表明：当清酱肉多肽液的质量浓度为5 mg/mL时,其对·OH和DPPH自由基的清除率分别可达51.49%和57.50%,与相同质量浓度的谷胱甘肽（glutathione,GSH）相比差异显著（P＜0.05）;清酱肉多肽的Fe2＋螯合能力随其质量浓度的增加而显著提高,当质量浓度为5 mg/mL时,其对Fe2＋的螯合率可达50.97%;清酱肉多肽还具有一定的还原性。此外,清酱肉多肽液的氨基酸组成较为丰富,其中必需氨基酸含量为29.14%;与抗氧化活性相关的碱性、酸性及疏水性氨基酸的总量达到87.75%。综上所述,清酱肉多肽液具有一定的抗氧化能力及营养价值。     

木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性研究

目的:研究木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物的抗氧化特性.方法:测定不同酶解时间下的酶解液的抗氧化性;用葡聚糖凝胶分离活性肽段并测定其抗氧化性.结果:在酶用量6 000 U/g 底物、底物质量分数3%、pH7.5、温度55℃的酶解条件下酶解210 min,酶解液的抗氧化活性较高,0H·清除率55.43%,O2-·清除率64.23%,DPPH·清除率79.32%,总抗氧化能力98.74%单位/mL;通过葡聚糖凝胶分离并与已知标准品对照,木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性多肽的分子质量主要集中在1321～607 Da,该分子质量片段活性多肽对0H·的清除率为42.26%,对02-·的清除率为57.33%,对DPPH·清除率为74.43%,总抗氧化能力88.43单位/mL.结论:木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白210 min时酶解液的抗氧化活性较高,抗氧化活性多肽分子质量主要集中在1 321～607 Da之间.     

罗非鱼鱼皮多肽的超滤分离及其抗氧化活性研究

采用超滤技术分离罗非鱼鱼皮蛋白酶解液(TSP-I),研究超滤压力、时间和浓度对膜渗透通量、渗透增量和膜效能的影响.结果表明:超滤处理的压力为28Psi,时间为40min,浓度为5%的操作条件下,膜渗透通量为9.98LHM,渗透增量为2.68g/10min,膜效能为3.41g/m 2·min,超滤处理达最佳效果.利用分光光度法检测了抗坏血酸和超滤后所得多肽粉(TSP-II)对超氧阴离子自由基(O 2·)、羟基自由基(·OH)、二苯代苦味酰自由基(DPPH·)及双氧水(H 2O2)的清除能力.实验发现:超滤处理所得多肽具有一定的抗氧化能力,TSP-II对四种自由基的清除作用顺序为:H2O2＞·OH ＞O2·＞DPPH·.以清除H2O2的能力为代表相比较,0.80mg/ml TSP-II和0.03mg/ml抗坏血酸清除H2O2的能力相当.     

不同分子量真鲷鱼骨多肽抗氧化活性的研究

以真鲷鱼骨为原料,经胰蛋白酶、风味蛋白酶酶解后,用截留分子量分别为10、5、3ku的超滤膜将其分离成4个分子量段,研究了不同分子量段对·OH、DPPH·和O2-·的清除能力,对Fe3+还原能力以及对油脂的抗氧化性。结果表明:不同分子量多肽组分均具有抗氧化活性,其抗氧化活性强弱为:分子量小于3ku多肽组分>分子量在3~5ku多肽>分子量在5~10ku多肽>分子量大于10ku多肽。     

大鲵多肽体外抗氧化活性研究

通过4种体外抗氧化评价方法(DPPH·清除能力、ABTS~+·清除能力、·OH清除能力、过氧化氢清除能力)综合评价大鲵多肽的抗氧化能力,在此基础上,采用超滤技术对大鲵肌肉酶解液进行分离纯化,比较各组分清除DPPH·和·OH的能力,最后分析比较大鲵肌肉、酶解物及超滤组分ADPP-Ⅰ中氨基酸成分。结果:大鲵多肽在不同的体外抗氧化模型中均具有良好的抗氧化能力;4个超滤组分ADPP-Ⅳ、ADPP-Ⅲ、ADPP-Ⅱ和ADPP-Ⅰ的比例分别为17.85%、10.02%、64.92%和7.21%,ADPP-Ⅰ清除DPPH·和·OH的能力最强,达85.83%,较超滤前提高了23.09%;对氨基酸组成进行分析,发现ADPP-Ⅰ中的疏水性氨基酸含量由酶解物的35.59%增加到41.69%,芳香族氨基酸含量由酶解物的6.42%增加到8.30%。结论:大鲵多肽具有良好的抗氧化能力,超滤组分ADPP-Ⅰ中的疏水性氨基酸和芳香族氨基酸含量均相应地提高,在一定程度上有利于大鲵多肽抗氧化活性的提高。     

碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉制备抗氧化多肽

为优化碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉蛋白制备抗氧化多肽的条件,采用响应面分析法,以·OH清除率为响应值,研究酶解温度、酶用量、酶解p H值对制备抗氧化肽的影响。此外,还研究了不同分子质量魔芋多肽的抗氧化活性,结果表明:最佳酶解工艺参数:底物质量分数2.25%、温度55℃、酶用量3 228 U/g底物、p H 7.84、水解时间270 min。该条件下抗氧化多肽(18.35 mg/m L)的·OH清除率为73.41%,多肽得率为75.37%。通过Sephadex G-25和Sephadex G-15串联柱分离得到5个多肽组分,其中分子质量为1 500 u和1 000 u的组分抗氧化活性较高,其清除DPPH·的IC50分别为2.82 mg/m L和3.65 mg/m L;清除·OH的IC50分别为9.03mg/m L和14.16 mg/m L;抑制大鼠肝脏自发性脂质过氧化的IC50分别为0.21 mg/m L和0.66 mg/m L;抑制大鼠红细胞H2O2诱导氧化溶血的IC50分别为0.11 mg/m L和0.22 mg/m L。     

黑豆抗氧化肽的酶解条件优化及分级制备

以黑豆分离蛋白为原料,利用Alcalase对其进行酶解制备黑豆抗氧化肽,研究加酶量、底物质量分数、酶解温度和酶解时间对酶解产物抗氧化性和水解度的影响,通过单因素试验和正交试验确定最优酶解条件。采用不同截留相对分子质量的超滤膜对最优酶解条件下制备的黑豆分离蛋白酶解产物进行超滤分离并测定不同组分的抗氧化性。结果表明:制备黑豆抗氧化肽的最优酶解条件为加酶量3%、底物质量分数6%、酶解温度55℃、酶解时间70 min,在此条件下酶解产物的抗氧化性最高,·OH清除率达21. 62%;超滤分离所得组分相对分子质量越小,抗氧化性越强,相对分子质量小于3 kDa组分的抗氧化性最高,·OH清除率达29. 54%,DPPH·清除率达22. 05%,还原力(OD值)达1. 298。     

山杏仁多肽的制备及清除自由基能力研究

以DPPH自由基清除率为指标,对风味蛋白酶酶解脱脂山杏仁的工艺进行研究。在单因素实验的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计对其酶解工艺进行优化。建立脱脂山杏仁酶解液的DPPH自由基清除率与蛋白酶用量、酶解温度及酶解pH,3个实验因素的正交回归模型方程,通过频率分析法得到酶解最佳工艺条件:蛋白酶用量0.50%,酶解温度55℃,酶解pH7.2,酶解时间4h,最佳条件下酶解液的DPPH自由基清除率为56.8%。在此条件下,山杏仁蛋白酶解液清除DPPH自由基的IC50值为4.18mg/mL。经过超滤分离获得不同分子量的抗氧化多肽,用DPPH自由基清除率评价其抗氧化性,得分子量小于5ku的肽清除DPPH自由基能力最强。     

元宝枫籽多肽的制备及其抗氧化性的研究

通过单因素试验对胰蛋白酶水解条件进行筛选,并采用正交试验优化酶解条件,得到最终酶解条件为:底物浓度2%、酶解时间5 h、加酶量12000 U/g、pH 7.5,此时DPPH清除率为46.2%。再将多肽溶液进行超滤分离,得到不同分子质量的水解产物,收集产物并进行冷冻干燥,测定不同分子量肽的抗氧化活性。分子量3 kDa的抗氧化活性最高,达到70.4%。对活性最高的组分(3 kDa)进行稳定性的研究,最终得到元宝枫籽抗氧化肽在20～60℃、pH为7、NaCl为0.2%或0.5%、葡萄糖为1%～2%的条件下抗氧化肽较为稳定,DPPH清除率基本不变。