两种方法建立兔VX2肝癌模型的比较及影像学评估

【摘要】 目的 比较两种方法建立兔VX2肝癌模型的成瘤情况及CT、DSA表现。方法 采用新西兰白兔40只,随机分成A、B两组,每组20只。A组采用开腹包埋植入VX2瘤块,B组采用CT引导下穿刺种植VX2瘤块,术后2周行CT及DSA检查。结果 A组成瘤率为50%（10/20）,B组为85%（17/20）,组间差异有统计学意义（P < 0.05）。与A组相比,B组操作简单、成瘤率高。两组CT及DSA造影表现一致。结论 两种方法建立的兔VX2肝癌模型的CT及DSA影像学表现无差别,CT引导下经皮穿刺种植法的应用优于开腹种植。

     

肝动脉栓塞联合射频消融对兔肝癌模型VEGF及MVD的影响

【摘要】 目的 探讨肝动脉化疗栓塞 （TACE）联合射频消融（RFA）对兔肝VX2残余肿瘤血管生成的影响。方法 CT引导下经皮穿刺建立45只新西兰大白兔VX2肝癌模型,3周后荷瘤兔肝肿瘤直径为2.5 ～ 2.7 cm,随机分成对照组（假性治疗组）、单纯RFA组和TACE联合RFA组（联合组）。于治疗后1、4、7 d时每组各处死5只瘤兔,取肿瘤中心组织及边缘组织,用免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）表达。结果 单纯RFA及联合治疗组消融区周边的肿瘤组织VEGF和MVD表达均明显低于对照组（P < 0.05）。联合治疗组VEGF和MVD绝对值略高于单纯RFA组,但差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。残余肿瘤细胞VEGF与MVD表达呈正相关（P < 0.01）。结论 单纯RFA和RFA联合TAE治疗兔肝VX2肿瘤后1周内均能抑制肿瘤血管生成,且联合治疗在抑制肿瘤血管生成作用方面与单纯RFA治疗作用相当。
     

MR导引经皮穿刺瘤块种植法构建兔VX2肝癌模型

【摘要】 目的 探讨MR导引下经皮穿刺瘤块种植法制作兔VX2肝癌模型的方法及建模后影像学和组织学评估。方法 32只新西兰大白兔随机分为A、B两组,每组16只。A组在360°全开放式0.4T MR扫描成像系统光学导航仪导引下,采用剑突左侧肋弓下进针,经皮经肝穿刺将VX2瘤组织块种植于兔肝内;B组通过开腹法将瘤组织块种植于肝内。观察两组手术时间、成瘤率、感染率及肿瘤生长特点。结果A组模型成瘤率为93.7%,手术时间为（18.24±3.24） min,无术后感染发生;B组模型成瘤率为87.5%,手术时间为（25.23±2.16） min,1例发生术后感染。两组间手术时间差异有统计学意义（P＜0.05）。肿瘤HE染色镜下观察显示,2周见癌细胞呈巢状分布,癌细胞核大;3周见明显核分裂像,异型显著;4周可见凝固性坏死及炎性细胞浸润。结论 MR导引下经皮穿刺瘤块种植法构建兔VX2肝癌模型,具有导引准确、操作简便、成功率高等特点,可作为兔VX2肝癌模型构建方式之一。

     

经脾与经肝种植VX2瘤株建立兔肝转移瘤模型的影像学比较

【摘要】 目的 通过经肝及经脾种植VX2瘤株建立兔肝转移瘤模型,分别观察模型建立情况、CT扫描肝内病变数目及强化情况、CT灌注扫描肝内病变与周围正常肝组织灌注参数（BF值、BV值）差值的比较以及数字减影血管造影（DSA）肝内病变数目及染色情况,探讨更为合理实用的方法和更接近人肝转移瘤模型的建立方法。方法 将50只大白兔随机分为两组,每组25只。A组暴露肝脏,注入VX2细胞悬液1 ml; B组暴露脾脏,注入VX2细胞悬液1 ml。术后第14天行CT灌注扫描,第15天行DSA。分别观察CT扫描表现（肝内病变数目及强化特点）、血管造影表现（肝内病变数目及染色情况）及CT灌注扫描参数[肝内病变处与周围正常肝组织血流量（ BF）和血容量（ BV）差值]变化。结果 A组25只、B组21只动物成功建模。两组均有20只动物完成CT灌注扫描及DSA, A组中16只为单个病灶,4只为2个以上病灶,19只可见强化,1只未见强化;B组3只为单个病灶,17只为2个以上病灶,19只可见强化,1只未见强化。A组肝内病变部位与周围正常肝组织BF值和BV值差值分别为（264.58 ± 59.132）ml/min和（19.541 ± 4.030 0）ml/100 g,B组分别为（199.60 ± 32.237）ml/min和（15.869 ± 2.891 3）ml/100 g,组间差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）。DSA显示,A组中13只为单个病灶,6只为2个以上病灶,1只未见明显病灶,19只可见肿瘤染色,1只未见明显肿瘤染色;B组中1只为单个病灶,19只为2个以上病灶,全部可见肿瘤染色。结论 经肝种植VX2细胞悬液建模的成功率为100%,高于经脾种植VX2细胞悬液（84%）法,后者肝内病变多为多个病灶,大部分有强化,多为环形染色,更接近人肝转移瘤的影像表现。

     

兔肝癌模型的改良接种及其DSA影像分析

目的建立可供实验研究稳定的兔Vx２移植性肝癌模型,探讨不同植瘤方式的成功率,并分析该肿瘤的DSA影像特征。方法６０只新西兰白兔随机分３组,每组２０只。将Vx２瘤细胞（５×１０ ７ 个）经肝动脉或经肝包膜分别接种于２组兔的肝左叶,建立对照肝癌模型。第３组经肝包膜植入瘤组织块（约含１０ ６ ～１０ ８ 个瘤细胞）建立改良肝癌模型。观察:①不同组植瘤的成活率。②改良Vx２移植性肝癌的DSA影像特征。结果３组植瘤成活率分别为７／２０、１０／２０、１９／２０,改良组植瘤成活率最高,差异有统计学意义（P＜０．０５）。DSA影像示该移植性肝癌具有丰富的血供。结论成功建立了兔Vx２移植性肝癌改良模型,瘤组织块种植方式成功率明显高于动脉途径和细胞液注射方式,为肝癌介入治疗的基础及临床研究提供了成熟的大型实验动物模型。     

兔VX2门静脉癌栓模型构建

【摘要】 目的 经肠系膜上静脉插管注入VX2肝癌瘤粒或瘤条，构建不同类型兔门静脉癌栓（PVTT）模型。方法 剖腹后直视下穿刺肠系膜上静脉，在兔门静脉主干近端置入经皮肝穿刺胆道造影（PTC）套管。20只健康大白兔随机分成两组，A组（n=10）注入0.1～0.2 cm瘤粒，B组（n=10）注入0.1 cm×1.5～2.0 cm瘤条。术后1周，DSA造影观察癌栓生长情况，处死后作病理学观察。结果 两组实验兔均成功完成门静脉插管，瘤株接种成功率均为100%。术后1周造影显示，A组8只兔见门静脉一级分支癌栓，2只兔见门静脉主干癌栓，10只兔均见肝内弥漫散在的多发转移灶；B组10只兔均见门静脉主干癌栓，肝实质内未见弥漫性转移灶。结论 采用介入技术将不同大小的VX2肿瘤瘤粒或瘤条种植于兔门静脉内，能形成伴有或不伴有肝内弥漫性转移灶的门静脉主干或一级以上分支癌栓模型。
     

CT引导下兔VX２肝癌模型的制作及综合评估

目的探讨CT引导下兔VX２肝癌模型的制作及影像学和组织学评估。方法选择新西兰大白兔２９只作为实验动物（前期９只,后期２０只）,采用CT引导下经皮穿刺瘤组织块种植于兔肝左中央叶。前期从左侧肋缘进针,术后未予抗感染;后期从剑突下最大层面进针,术后抗感染３d。分别于接种后１、２、３和４周行CT增强扫描及组织学观察。结果前期实验移植模型成瘤率为８８．９％,腹壁种植转移率为６２．５％,５０％并发胸腔积液。后期实验肝癌移植模型成功率为９５％,腹壁种植转移率为１０．５％,无并发胸腔积液。CT平扫瘤体为低密度或等密度,均匀强化（２周）或环状强化（３周、４周）;静脉期、延迟期呈低密度,但CT值较动脉期无明显下降。组织学上VX２为血管丰富的低分化鳞状细胞癌,２周出现点灶状凝固性坏死,３周出现肝内转移,４周出现大量凝固性坏死。自然生存时间为５～９周,死亡原因主要为广泛肺和腹腔转移伴全身衰竭。结论CT引导下兔VX２肝癌模型的制作成功率高,并发症发生率低,进行兔VX２肝癌模型介入治疗实验研究宜选择２周为宜     

缺氧诱导因子 -１α 在兔 VX２ 肝癌模型 TACE 术后的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-１α（HIF-１α）在兔VX２肝癌模型TACE术后的表达及其与肿瘤血管生成的相关性。方法２４只荷VX２瘤兔随机分为３组，每组８只。对照组:经肝动脉注入生理盐水２ml；TAE组:单纯碘油（UFLP）０．５～０．８ml栓塞，TACE组:碘油抗癌药混悬液（UFLP＋THP）栓塞，UFLP０．５～０．８ml，THP２mg。于术后２周应用免疫组化法分别检测肿瘤组织中HIF-１α、血管内皮生长因子（VEGF）的表达，用CD３４单克隆抗体标记肿瘤血管内皮细胞，计数肿瘤组织中的微血管密度（MVD）。结果TAE组和TACE组HIF-１α、VEGF表达与MVD值均明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜０．０５），HIF-１α与VEGF的表达及MVD的变化呈正相关（r S ＝０．５３７，P＜０．０１；r S ＝０．４２３，P＜０．０５）。结论TACE能明显上调HIF-１α的表达，HIF-１α通过调控其下级基因VEGF的表达而促进肿瘤血管的生成，影响肝癌的预后。     

内皮抑素在兔VX２肝移植瘤介入治疗中的应用价值

目的探讨内皮抑素在兔VX２肝移植瘤介入治疗中的应用价值。方法建立兔肝移植瘤模型,随机分为对照组（NS,１０只）,TACE组（Lipiodol＋ADM,１０只）和内皮抑素组（Lipiodol＋ADM＋ES,１０只）,多排螺旋CT测量肿瘤大小,计算肿瘤增长率（GR）;术后１周取出病理标本,利用免疫组化染色及半定量RT－PCR法分别检测残瘤组织微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果３组肿瘤增长率分别为对照组（２７０．８６±１４８．９４）％,TACE组（－８．９１±２１．７７）％,内皮抑素组（－２０．４０±３６．０７）％,３组间相互比较,对照组呈明显正增长,与其余２组比较差异均有统计学意义（P＜０．０１）,而TACE组与内皮抑素组之间差异无统计学意义（P＞０．０５）;各组的MVD值分别为８０．００±１７．１４（对照组）、８４．２２±１６．４５（TACE组）和５７．００±１３．２６（内皮抑素组）,内皮抑素组MVD值最低,与另外２组比较差异均有统计学意义（P＜０．０５）,对照组和TACE组之间差异性不明显（P＞０．０５）;VEGF１６５mRNA:对照组为（０．８５±０．０５６）,TACE组为（１．１０±０．０８７）,内皮抑素组为（０．７２±０．０６５）,TACE组表达水平最高,与其余２组比较差异有统计学意义（P＜０．０１）。结论兔VX２肝移植瘤的介入治疗中应用内皮抑素后,肿瘤明显缩小,肿瘤组织VEGF的表达减低,MVD的分布减少,提高了肿瘤的治疗效果。     

海藻酸钠微球与碘化油栓塞治疗兔VX2肝转移瘤对比研究

【摘要】 目的 对比海藻酸钠（KMG）微球与碘化油栓塞治疗兔VX2肝转移瘤模型效果，分析KMG微球栓塞治疗肿瘤的安全有效性及可行性。方法 VX2肿瘤细胞悬液（浓度1×107/ml）1 ml接种新西兰大白兔脾脏，制作兔肝转移瘤模型。50只成功建模的兔模型随机分为3组，A组（n=20）以KMG微球栓塞肝固有动脉，B组（n=20）于以碘化油栓塞肝固有动脉，C组（n=10）未作栓塞。A、B组接种瘤株后15 d作DSA造影及栓塞治疗。分别观察各组模型兔子生存时间（接种VX2瘤株至死亡），栓塞前、栓塞后7 d及栓塞后14 d测定谷氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）值，栓塞后7 d CT灌注扫描检测瘤灶边缘血流量（BF）、血容量（BV）及肝动脉分数（HAF）；兔模型死亡后取肝脏作苏木精-伊红（HE）染色病理切片，镜下观察肿瘤坏死情况。结果 A组KMG微球栓塞剂平均用量为（0.15±0.03） g，B组碘化油栓塞剂平均用量为（1.3±0.4） ml，均无栓塞剂反流。栓塞后7 d、14 d血清ALT、AST值，A、B两组均较术前明显升高，C组变化不明显；A、B两组与C组相比，差异均有显著统计学意义（P=0.015，P=0.005），但A、B两组间差异无统计学意义（P=0.423）。栓塞后7 d CT灌注扫描显示，A组BV、BF、HAF值明显低于B组（P=0.003，P=0.002，P＜0.000 1）。兔模型生存时间分别为A组（46.28±2.85） d、B组（43.92±2.17） d、C组（33.44±1.86） d，A、B两组均明显长于C组（P=0.001，P=0.004）。A、B两组组织病理HE染色显示，癌巢中央可见大片坏死，坏死区中残存瘤细胞核明显固缩。结论 KMG微球作为肿瘤栓塞剂安全有效、可行。KMG微球栓塞治疗兔VX2肝转移瘤效果优于碘化油。