酶解大豆粕蛋白制备大豆低分子肽的研究

以小分子肽得率为考察指标,研究了由枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶制备大豆低分子肽的工艺条件。通过单因素实验和正交实验确定AS1.398中性蛋白酶酶解大豆粕蛋白制备大豆低分子肽的最佳条件为:底物浓度6%、温度45℃、加酶量17 000 U.g-1、pH值7.5。检测了在最佳条件下水解不同时间所得酶解液的活性,发现水解2.5 h的大豆肽液的抗氧化活性最强。     

沙虫总蛋白提取及酶解条件优化

以沙虫(Sipunculus nudus)为原料提取总蛋白,选用四种不同蛋白酶对总蛋白进行酶解优化获得最佳蛋白酶,再采用单因素和正交实验探究最佳蛋白酶的不同影响因素对沙虫总蛋白水解度的影响。实验结果表明中性蛋白酶为最佳酶,且在pH为5、酶与底物比(E/S)为7%、温度为50℃和时间为4 h条件下,沙虫总蛋白的最大水解度为86.1%。在最佳酶和最佳酶解条件下,沙虫酶解多肽具有显著的清除自由基活性,为沙虫的开发与利用奠定基础。     

油松花粉小肽及多功能化妆品的制备

利用油松花粉酶催化制备小肽,研究了各种蛋白酶水解制备小肽的条件。确定小肽最佳水解条件：45℃,pH=9溶出2h,按质量比1：9加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶水解,底物浓度为10％,水解2h。在此条件下,提取率为10．5g／100g花粉。将制得的小肽液作为营养成分加入化妆品中。在RH为43％条件下保湿率为73．62％;50gg／mL时,自由基清除率大于70％．对羟基自由基具有较强的清除能力;波长在400nm以内有很好的吸收．具有较强防晒功能。     

超声前处理对获取猪皮抗氧化肽效果的影响

以猪皮为原料,采用单酶单因素试验,以猪皮抗氧化肽对ABTS自由基的清除率为指标优选碱性蛋白酶酶解猪皮的最适条件,并探讨了超声前处理对酶解效果的影响。结果:酶与底物浓度比为2.5%,酶解pH值为8,酶解时间为4h,酶解温度为50℃的提取条件下获得的酶解产物对自由基的清除率最高。超声时间为50min时酶解产物对ABTS清除率达到最高。结论:超声前处理有利于酶解进行。     

酪蛋白抗凝血口服液的制备及其活性的初步研究

以酪蛋白为原料,采用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对酪蛋白进行混合酶水解,制备酪蛋白酶解液。采用正交试验优化4种酶酶解酪蛋白的生产工艺为:底物浓度为15%,四种酶浓度(g/mL)混合比例为1:1:1:2(V/V),水解温度为50℃,水解时间为4 h、pH为6.5。按照该工艺制备的酶解液抗凝血活性为40 ATU/mL。通过添加适量的防腐剂和矫味剂将酶解液制备成具有一定抗凝血活性和口感风味良好的口服液,进行了口服液的稳定性试验。     

富铁亚硝基猪血红素肽的制备

目的制备富铁亚硝基猪血红素肽。方法以新鲜猪血为原料制备血红蛋白,分别取胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶及碱性蛋白酶,在各自最适温度和p H条件下水解,有限酶解成较长的多肽链,分析水解效果,选择最适酶进行酶解条件确定试验。取酶解后的产物,合成富铁亚硝基血红素肽,定性检测合成肽产物。结果综合螯合物颜色和铁螯合活性,确定最佳酶解用酶为胰蛋白酶。最佳酶解条件为:底物浓度10%,加酶量5 000 U/g,反应时间4 h,在此条件下,水解产物与亚硝酸钠反应生成亚硝基血红素肽,且螯合铁的效果最好。定性检测显示,产物中生成了亚铁血红素肽及亚硝基血红素肽。结论成功制备了富铁亚硝基猪血红素肽。     

可控酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化活性多肽的研究

以脱脂、脱色后的蚕蛹蛋白粉为原料,选取碱性蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶对超声处理后的蚕蛹蛋白溶液进行单酶以及复合酶水解实验,以蛋白水解度、多肽得率和水解产物的抗氧化活性为指标筛选出最适单酶和最适复合酶,采用响应面法确定可控酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化活性多肽的最佳工艺条件为:选用碱性蛋白酶+中性蛋白酶(碱性蛋白酶∶中性蛋白酶=1.3∶1)作为最适水解酶,超声处理(10min,工作3s,间歇2s)蚕蛹蛋白溶液,pH值7.47、固液比1∶10(g∶mL)、加酶量2.1%、水解时间2.7h、温度59.2℃。在此工艺条件下,蛋白水解度为41.73%,多肽得率为33.29%,水解产物的羟基自由基清除率为59.48%、超氧阴离子自由基清除率为40.57%。     

响应面法优化鹿茸胶原蛋白制备抗氧化肽的水解条件

以鹿茸中下段胶原蛋白为酶解底物,用木瓜蛋白酶酶解制备小分子抗氧化肽,以清除1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH?)自由基的能力为指标,采用响应面法优化酶水解条件。结果表明,最优实验条件为时间56 min,酶添加量1.40wt%,pH=5.60,温度60℃。该条件下所得抗氧化肽对DPPH?自由基的清除率为83.09%。用超滤膜、半制备色谱柱和超高效液相色谱?质谱联用仪分级分离获得分子量0.2?0.6 kDa的具有最高抗氧化活性的多肽,其具有与头段类似的保健功效,更易被人体吸收,且易进一步加工和储存。     

鲎血胶原蛋白酶解条件及其体外活性的研究

为了考察鲎血胶原蛋白(HXJ)酶解条件及其体外活性,以酶解后的肽得率为考察指标,在单因素的基础上,采用正交设计试验对酶解p H、酶解温度和底物浓度进行筛选,寻找HXJ的最佳酶解条件;对酶解后的HXJ进行体外α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酶抑制活性测试,同时对其总抗氧化力和对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子清除率进行测试。结果表明,HXJ的最佳酶解条件为:p H为7.0、温度为70℃、底物质量浓度为0.38 mg/m L、胰酶质量浓度为2.20 mg/m L、酶解时间为5 h,此时肽得率为36.50%;对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶的最大抑制率分别为47.9%和97.5%;HXJ具有一定总抗氧化能力,对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的最大清除率分别为29.3%、97.3%和25.9%。HXJ能有效抑制α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶,具有较强的抗氧化活性。     

南瓜籽蛋白酶解产物的制备及其抗氧化性的研究

采用碱提酸沉法提取南瓜籽蛋白,对南瓜籽蛋白提取工艺优化;并且用4种不同的蛋白酶水解蛋白,通过正交实验确定蛋白酶解的最优条件。结果表明,南瓜籽蛋白的最佳提取条件是料液比1:15 g/mL,pH=8.5,35℃超声3 h,蛋白质量分数可以达到83.68%。将南瓜籽蛋白酶解后,以酶解液的DPPH清除率为指标,选择最佳水解蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解的最佳条件为在5%底物浓度下,酶底比2%,酶解时间4 h,pH=9,在此条件下,酶解产物DPPH自由基清除率达到83.47%。     

生物活性肽的酶法制备

讨论了酶法制备活性肽工艺流程的主要步骤,确定了判定酶解效果的指标、酶的选用、酶解各种影响因素如温度、酸度、加酶量、底物浓度、水解时间等。     

双酶同加法制备花生粕多肽的工艺研究

选用AS1.398中性蛋白酶和木瓜蛋白酶作为水解酶,采用双酶同加法制备了花生粕功能性小肽.对各水解工艺参数进行了优选,发现各因素对蛋白水解度影响的顺序依次为:反应温度＞pH值＞底物浓度＞酶用量＞反应时间,确定最佳工艺参数如下:底物浓度为3.5%、反应温度为45℃、酶用量为12 500 U·g-1、pH值为7.5、反应时间为3.0 h.     

酶法制备猪肺抗氧化肽

为了分离制备猪肺抗氧化肽,该文研究了中心组合设计和响应面分析优化猪肺抗氧化肽的提取工艺,以DPPH自由基清除率为响应值,分析了料液比、水解时间和酶浓度对制备抗氧化肽的影响,再通过葡聚糖凝胶Sephadex G-50、G-25和G-10对抗氧化肽进行分离纯化,得到了具有抗氧化活性的肽段,测定其清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基、羟基自由基以及金属螯合的能力。猪肺抗氧化肽的最佳提取工艺参数为：新鲜猪肺质量与水质量的比例为（料液比）1:3,水解6h,酶浓度为6500U/g,此时DPPH自由基清除率为66.89%;抗氧化活性最强的组分A5清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基和羟基自由基的IC50分别为0.073g/L、0.989 g/L、0.192 g/L和1.261 g/L,金属螯合能力的IC50为6.505 g/L;其相对分子质量为175.00Da。     

酶法制备猪肺抗氧化肽

为了分离制备猪肺抗氧化肽,该文研究了中心组合设计和响应面分析优化猪肺抗氧化肽的提取工艺,以DPPH自由基清除率为响应值,分析了料液比、水解时间和酶浓度对制备抗氧化肽的影响,再通过葡聚糖凝胶Sephadex G-50、G-25和G-10对抗氧化肽进行分离纯化,得到了具有抗氧化活性的肽段,测定其清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基、羟基自由基以及金属螯合的能力。猪肺抗氧化肽的最佳提取工艺参数为:新鲜猪肺质量与水质量的比例(料液比)为1∶3,水解6 h,酶浓度为6 500 U/g,此时DPPH自由基清除率为66.89%;抗氧化活性最强的组分A5清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基和羟基自由基的IC50分别为0.073、0.989、0.192和1.261 g/L,金属螯合能力的IC50为6.505 g/L;其相对分子质量为175。     

鲢鱼鱼鳞抗氧化活性肽的酶法制备工艺研究

鱼鳞是鱼类加工的主要副产物之一,含有丰富的胶原蛋白质。在本研究中,以鲢鱼鱼鳞为原料,经过脱钙、碱性蛋白酶酶解等程序制备了胶原蛋白抗氧化活性肽。首先应用单因素试验探讨了不同因素对酶解效果的影响,然后在此基础上进行了正交试验优化。结果表明,在加酶量为1500 U/g、酶解温度为55℃、酶解p H为8. 0、酶解时间为5 h的条件下,鱼鳞胶原蛋白水解液的抗氧化活性最高,羟自由基(·OH)的清除率达90. 21%。     

酶法辅助提取生姜挥发油及其抗氧化活性研究

采用酶法辅助水蒸气蒸馏法提取生姜挥发油,考察了酶种类、酶用量、酶解温度、酶解pH对酶法辅助提取生姜挥发油的影响,应用脂质过氧化法和DPPH自由基清除法测定生姜挥发油的抗氧化活性。结果表明,酶法提取生姜挥发油的最佳工艺条件是:纤维素酶,酶用量2.0%,酶解温度50℃,酶解pH为6.0,酶解时间2.0 h,水蒸气蒸馏3.0 h,挥发油提取率最高为3.86%。生姜挥发油抗脂质过氧化及对DPPH自由基清除均有良好效果。     

大鲵肽在牙膏中的应用研究

采用酶法从人工饲养大鲵肉中提取得到大鲵肽,利用串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF/TOF)测定其分子量主要为1 422,1 521,1 746,1 828和1 879,均小于2 000,酶解产物大鲵肽为低聚肽。将提取到的大鲵肽应用到牙膏中,应用自由基清除活性评价方法研究了大鲵肽牙膏的抗氧化活性。结果表明,牙膏中添加质量分数为0.1%的大鲵肽可达到较好的抗氧化效果,其牙膏水溶液具有清除DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基以及ABTS自由基的能力。     

利用水解酶提取文冠果油脂

采用3种酶对文冠果种仁进行水酶法提油,其中Alcalase 2.4 L蛋白酶的效果最好. 在Alcalase 2.4 L蛋白酶用量为0.02 mL/g的条件下,通过单因素实验和Box-Behnken中心组合实验,应用SAS软件分析得出水酶法提取文冠果油脂的最佳工艺条件为：温度55℃, pH 9, 固液比1 g:6 mL, 水解时间4 h,在此条件下油脂提取率和蛋白水解度分别达到78.67%和9.15%.     

碱性蛋白酶水解林蛙卵粕蛋白的工艺条件优化

研究了碱性蛋白酶水解林蛙卵粕蛋白制备混合氨基酸的工艺,分析了反应温度、酶加量、底物浓度和反应时间对蛋白水解度的影响.通过单因素实验和正交实验确定碱性蛋白酶水解林蛙卵粕蛋白的最佳工艺条件为:反应温度60℃、酶加量2000 U·g-1、底物浓度4％、反应时间120min,此时的蛋白水解度为10.18％.     

腐竹废水制备大豆多肽复合酶解条件研究

将腐竹废水进行回收利用,经蛋白酶酶解、分离、提纯制得大豆多肽.通过正交实验分析,确定腐竹废水复合酶解的最佳工艺条件为:采用三酶复合蛋白酶(由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶以1∶2∶4的比例复合而成)、底物含量3%、pH值8.0、酶解时间4 h,此时多肽转化率为94.56%.