侗族传统酸鱼中降亚硝酸盐乳酸菌的筛选、鉴定及其在发酵香肠中的应用

以侗族传统酸鱼作为乳酸菌筛选源,分离出17株乳酸菌。以降亚硝酸盐能力为筛选指标对初筛所得乳酸菌进行复筛,筛选到2株降亚硝酸盐能力优良且适于肉制品发酵的乳酸菌菌株,经16S r DNA全序列分析鉴定2株菌分别为植物乳杆菌(DLY-7)和发酵乳杆菌(DLY-10)。以筛选到的菌株为发酵剂制作单菌株发酵香肠,结果显示,在发酵结束时发酵香肠的NaNO2含量为9.81 mg/kg(DLY-7)和11.23 mg/kg(DLY-10),均低于国家标准,表明筛选菌株可用于开发成用于生产低亚硝酸盐的健康肉制品发酵剂。     

一株耐盐高效苯酚降解菌的分离、鉴定及其应用

从新疆盐碱土壤中分离筛选得到一株能在高盐条件下降解苯酚的微生物菌株HNA-14,经16S r DNA序列及系统进化分析,鉴定其为芽孢杆菌属的一株菌。通过对HNA-14的生理生化特征及苯酚降解能力的研究,确定该菌的最适生长温度为30℃,p H值为8.0,Na Cl浓度为7%,且在10%的高盐浓度下,HNA-14能在96h内完全降解浓度为500mg/L的苯酚。并将该菌株成功应用于皮化企业的含苯酚废水处理。     

金种子优质窖泥高产己酸菌的筛选鉴定及其应用性能分析

在浓香型白酒酿造过程中,窖泥作为酿酒微生物的重要载体对曲酒的酒体质量与风格特征具有重要影响。从优质窖泥中筛选高产己酸菌,并制备人工窖泥以提高酒体中己酸乙酯的含量或制备生产己酸乙酯产品等,对曲酒生产具有重要意义。本文通过富集培养、平板涂布、发酵液己酸含量检测、16S rDNA分析等方法,筛选鉴定高产己酸菌株,并考察培养温度、乙醇浓度、pH值等发酵条件,分析己酸菌液配方组分单因素含量影响等。结果表明,筛选得到的高产己酸菌JZZ,其液态发酵己酸平均产量为4.36 mg/mL,温度耐受区间为36~39℃,乙醇耐受浓度为2%~6%,己酸菌液配方组分添加量为硫酸镁0.01%,硫酸铵0.05%,磷酸氢二钾0.3%,乙醇2%,16S r DNA比对结果表明,JZZ菌株为克氏梭状杆菌(Clostridium kluyveri)。     

葡萄酒MLF高耐受性优良乳酸菌的筛选与鉴定

以活菌数为指标,以L450为对照菌株,考察了从自然发酵葡萄酒中分离的14株乳酸菌对酒精度、SO2浓度、p H值的耐受能力,筛选出高耐受性优良菌株。通过菌落形态、菌体形态、生理生化特征和16S r DNA分子测序进行优良菌株鉴定。结果表明:菌株G23与L42综合耐受能力最强且优于对照菌株L450,二者被鉴定为植物乳杆菌,可作为葡萄酒MLF高耐受性优良乳酸菌。     

一株降解呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的筛选与鉴定

目的:分离筛选能够降解呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的芽孢杆菌,以用于该毒素的生物降解。方法:采集霉变秸秆、土壤和粪便样品,先将样品加热80℃后,取上清液接种到以DON为唯一碳源的分离培养基富集DON降解菌。以LB培养基分离纯化富集菌,然后对分离到的菌株进行DON毒素降解能力检测。对降解能力最强的菌株进行形态学观察、生理生化实验和16S r DNA序列鉴定。结果:从16株分离菌中筛选得到一株对DON降解能力最强的菌株B.JG05,降解率最高可达80.61%,且对含DON饲料的降解率为82.68%。该菌株呈短杆状,能形成芽孢;生理生化特性符合蜡样芽孢杆菌的基本特征;16S r DNA序列进化树分析表明该菌株与蜡样芽孢杆菌的亲缘关系最近。结论:筛选获得了一株高效降解DON的蜡样芽孢杆菌B.JG05,为饲料和食品中DON毒素的生物降解提供了可能。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解菌的筛选与鉴定

以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为唯一碳源,通过平板分离纯化,经高效液相色谱(HPLC)检测,对降解效果较高的菌株进行分子鉴定.最终筛选得到的菌株对DON的降解率达56.61％,通过16S r DNA序列分析,鉴定为假单胞杆菌,为更进一步的研究提供了菌株材料.     

罗汉果内生菌中乙醇降解菌株的筛选及其发酵条件优化

通过传统培养分离法从广西龙胜县的罗汉果植株中分离内生菌,通过乙醇耐受性测定和重铬酸钾-硫酸法从中筛选出对乙醇具有降解活性的菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定,并以乙醇降解率为评价指标,采用单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,从罗汉果中分离得到68株内生菌,从中筛选到1株乙醇降解活性较高的菌株G-1,并被鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,其降解乙醇的最优发酵条件为马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基,初始pH值6.0,接种量7%,装液量200 mL/500 mL,发酵温度32 ℃,130 r/min条件下振荡培养3 d。在此优化条件下,乙醇降解率为29.77%,表明罗汉果内生菌具有降解乙醇的潜力。     

黄曲霉毒素B1 降解菌株的分离鉴定、发酵条件的 优化及活性组分分析

为筛选出一株高效降解黄曲霉毒素B1（AFB1）的菌株，选取土壤为菌株来源，进行富集培养，经过以香豆素为唯一碳源的初筛和添加AFB1的复筛后，对筛选得到的各菌株进行16S rDNA鉴定，比对其测序结果，选取降解AFB1最高的菌株，探究发酵时间、发酵温度、初始pH、接种量、培养基对菌株降解AFB1的影响规律，通过正交试验优化发酵条件，并对降解方式进行初步探索。结果表明：经过初筛和复筛得到7株能够降解AFB1的菌株，经鉴定均为伯克霍尔德菌属，其中Burkholderia sp. D6的AFB1降解率最高；最优发酵条件为以LB培养基为发酵培养基、发酵时间84 h、发酵温度37 ℃、初始pH 7.0、接种量10%，在此条件下Burkholderia sp. D6对AFB1的降解率为（87.91±2.32)%；初步判断降解AFB1的活性组分是蛋白质或者酶。综上，通过筛选得到了一种能够高效降解AFB1的菌株，蛋白质或酶参与了AFB1的降解。     

高产胞外多糖乳酸菌的筛选及其发酵条件优化

从新疆酸马奶中分离到的7株乳酸菌中筛选到1株产胞外多糖能力较强的乳酸菌RB2,以苯酚-浓硫酸法测得其胞外多糖的产量为491.03μg/m L,经生理生化和16S r DNA序列分析法鉴定为发酵乳杆菌。通过正交试验确定该菌株产胞外多糖的最适发酵条件是:发酵温度34℃,接种量1%,发酵时间12 h,此时胞外多糖的产量为511μg/m L。     

茅台地区酱香型酒糟中高温放线菌的分离鉴定

从茅台地区酱香型酒糟中筛选出耐高温菌株,编号为DF。对其进行个体形态观察、菌落形态观察、16S r DNA基因序列分析以及其对淀粉、纤维素、蛋白质等的降解能力的研究,结果表明,菌株DF菌落干燥紧实、基内暗黄色、表面白色粉状、不透明,生长温度范围为35~60℃,最适生长温度为55℃,通过16S r DNA基因序列分析以及系统发育树分析,可以初步鉴定菌株DF为产色高温单孢菌(Thermomonospora chromogena)。该菌株对淀粉、纤维素、蛋白质有一定的降解能力,可以用作降解酒糟的菌剂。     

一株具有潜在益生特性屎肠球菌的筛选及在酸菜中的应用

从东北地区自然发酵酸菜中筛选获得发酵性能优良且具有益生特性的乳酸菌,用以强化酸菜的营养价值。通过生理生化反应和16S r DNA分子序列分析对菌株进行鉴定,测定菌株亚硝酸盐降解能力、耐酸耐胆盐能力、模拟肠胃道存活能力、抗氧化性分析及在酸菜发酵中的应用,综合评价该菌株在制备功能性酸菜食品中的应用潜力。实验筛选获得1株屎肠球菌(Enterococcus faecium HS38),该菌的亚硝酸盐降解率为82.27%,经pH3.0酸处理和0.3%耐胆盐处理后,存活率分别为89.6%和85.7%,在模拟胃肠液中存活率分别为79.7%和41.4%,胞外羟自由基的清除率为92.47%。屎肠球菌HS38发酵酸菜速度快,能够有效控制酸菜中的亚硝酸盐含量,风味与自然发酵无差异。E.faecium HS38具有开发功能性酸菜产品的潜力。     

包埋培养法筛选白酒窖泥中一株功能细菌

采用微包埋培养法结合流式细胞分选技术,对白酒窖泥中的细菌进行分离和筛选,分离到95株细菌。经菌株生长实验从中筛选出8株生长较缓慢的菌株LS4、LS27、LS32、LS37、LS64、LS66、LS69’、LS85,经气相色谱分析,LS66菌株产白酒香味物质较为丰富,确定其为出发菌株。对其进行形态学观察、生理生化和16S r DNA鉴定,该菌株可能为一株窖泥未培养功能菌株uncultured bacterium clone N8-7,对该菌株的培养条件进行初步研究,菌株生长的最适温度、最适p H值和最佳发酵接种量分别为35℃、p H 6.5和4%。     

一株产几丁质脱乙酰酶海洋细菌的筛选、鉴定及发酵优化

目的:从海洋样品中筛选产几丁质脱乙酰酶细菌,对菌株进行鉴定和发酵条件优化。方法:利用显色平板从黄海海州湾燕尾港海域的海泥中筛选几丁质脱乙酰酶产生细菌。利用形态学、生理生化特性以及16S r DNA序列分析对菌株进行鉴定。利用单因素实验和正交实验优化菌株发酵条件。结果:筛选获得几丁质脱乙酰酶产生菌MCDA01,经形态学特征、生理生化特性以及16S r DNA序列分析将菌株鉴定为天目不动杆菌(Acinetobacter schindleri)。菌株最佳生长条件为30℃,p H8.0,Na Cl 4%。最佳产酶发酵条件为:发酵时间60 h,发酵温度20℃,培养基起始p H7,装液量20%,诱导剂几丁质浓度1%。在此条件下,产酶量达到201.37 U/m L,比优化前提高了4.14倍。结论:几丁质脱乙酰酶产生菌MCDA01产酶量达到201.37 U/m L,有工业应用潜力。      

产脂肪酶海洋微生物的筛选、鉴定及酶学性质研究

目的:从海洋来源样品中筛选脂肪酶产生菌,并对其进行鉴定和酶学性质研究。方法:以橄榄油为唯一碳源,采用固体平板变色圈观察法筛选脂肪酶产生菌。利用16S r DNA序列分析对其进行鉴定,并对脂肪酶酶学性质进行研究。结果:从海鳗和鲍鱼肠道内容物以及平潭海域、北极和盐湖泥样5个样品中共分离筛选出22株脂肪酶产生菌,其中ZF-16菌株产酶能力较强,根据其形态特征及16S r DNA序列分析鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。其酶学性质研究表明,该脂肪酶最适反应p H为9.0,在p H 5.0~10.0范围稳定;最适反应温度75℃,当温度小于40℃时较稳定;低浓度(1 mmol/L)的Na+和K+对脂肪酶的活性有激活作用,Zn2+对脂肪酶有强烈的抑制作用;对C4~C18均有降解作用,尤其对中长链的三辛酸甘油酯(C8)具有较强的降解能力。结论:从海洋来源的样品中筛选到产脂肪酶能力较强的细菌ZF-16菌株,经鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。其所产脂肪酶为碱性高温脂肪酶,对C4~C18底物有降解作用,可用于食品烘焙、废纸脱墨和造纸脱胶工业。     

假单胞菌降解含油脂废水的研究

从含油脂污水、污泥中通过驯化筛选得到降解油脂能力强的两株菌，经全自动微生物鉴定仪鉴定两株菌都为假单胞菌：W-1为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)，W-2为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeraginosa)。其中，W-2菌株最适降解条件为pH7．0、温度30℃。实验测得所筛选菌株对油脂化工生产废水有较好的降解能力。     

茅台地区酱香型酒糟中高温放线菌的分离鉴定

从茅台地区酱香型酒糟中筛选出耐高温菌株,编号为DF。对其进行个体形态观察、菌落形态观察、16S r DNA基因序列分析以及其对淀粉、纤维素、蛋白质等的降解能力的研究,结果表明,菌株DF菌落干燥紧实、基内暗黄色、表面白色粉状、不透明,生长温度范围为35~60℃,最适生长温度为55℃,通过16S r DNA基因序列分析以及系统发育树分析,可以初步鉴定菌株DF为产色高温单孢菌(Thermomonospora chromogena)。该菌株对淀粉、纤维素、蛋白质有一定的降解能力,可以用作降解酒糟的菌剂。      

云南杨梅发酵液中酵母菌筛选及耐受性研究

以云南杨梅为材料进行自然发酵,发酵液经酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)培养基和麦芽汁培养基分离纯化获得酵母菌。对菌株进行产酯、产乙醇及产H₂S能力测定,结合杜氏小管发酵实验筛选,然后对筛选酵母菌进行耐受性测试,最后基于26S r DNA基因片段序列对筛选酵母菌进行分子生物学鉴定。结果表明,从云南杨梅发酵液中分离纯化获得59株酵母菌,筛选到3株优良酵母菌,编号为JYR-5、JYR-14、JYR-17,3株菌在温度40℃、乙醇体积分数5%、pH 2.5、葡萄糖质量浓度300 mg/L、SO₂质量浓度400 mg/L的条件下仍能正常生长。经鉴定,菌株JYR-5、JYR-14为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),菌株JYR-17为库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。因此,从云南杨梅发酵液中筛选的3株酵母菌为杨梅酒酿造微生物资源开发利用提供一定参考价值。     

一株可调节浓香窖泥pH的克氏梭菌对基酒质量影响

浓香大曲酒在发酵过程中窖泥pH降低，形成窖泥的老化，窖泥产己酸能力减弱，导致基酒中己酸乙酯含量降低，影响基酒质量。为解决此问题，筛选出一株高产己酸的微生物，使用筛选培养基对该菌株进行富集培养，该菌株具备调节窖泥pH功能。采用显微镜镜检技术对该微生物进行形态鉴定，并采用16S rDNA测序进一步鉴定菌株的种属，鉴定该菌株为Clostridium celerecrecns。将Clostridium celerecrecns（克氏梭菌）制成养护液喷洒于窖池中，可有效改善窖池pH下降，保证基酒中己酸乙酯稳定产出，基酒中主体香更加突出，窖池中己酸菌菌数较对照组增加50%～70%，窖池pH升高2.0左右，基酒己酯含量提升0.9g/L，可有效防止窖池老化，提升基酒质量。     

降解白酒酒糟中纤维素的细菌的分离鉴定

为筛选得到降解白酒酒糟中纤维素能力较强的菌株,该研究以酒醅和窖泥为研究对象,通过富集、分离,并以CMC-Na为唯一碳源初筛得到9株产纤维素酶菌株,菌株P7 D/d值最大,达到23;经复筛,菌株P7 CMC酶活最高,为49.31 U,在4 d将滤纸条完全降解,酒糟降解率为22.1%。不同发酵条件对酶活的影响研究表明,菌株P7和P′16对酒糟利用较好,最适培养时间在48 h左右,在初始pH 4.0和44℃下酶活高于其他菌株。对菌株P7和P′16进行生理生化鉴定,结合16S rDNA测序对比,菌株P7为贝莱斯芽孢杆菌,P′16为解淀粉芽孢杆菌。     

四川传统发酵肉中乳酸菌的分离及发酵特性研究

对四川传统发酵肉中乳酸菌进行分离鉴定,并对其发酵特性进行研究。以四川腊肉为研究对象,采用平板划线法对乳酸菌进行分离纯化,利用16S r DNA的序列测定技术对其鉴定,并对分离菌株在不同温度、p H、Na Cl浓度、亚硝酸盐浓度条件下的生长代谢、产酸能力进行研究,并对发酵产物中游离氨基酸进行测定分析。结果表明:筛选出的一株优势乳酸菌经分子生物学鉴定为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。分离菌株对数生长期为6~18 h;最适发酵温度30℃,发酵p H5.5;对Na Cl及Na NO2耐受能力分别高达10%和150 mg/L;其代谢产物中共测出16种游离氨基酸,共包含5种人体必需氨基酸。