食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测结果的分析

目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。方法:严格按照《2012年食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对济宁市2019年1—12月定期采样的8类常用食品(生鲜猪肉、生鲜牛肉、生鲜羊肉、生鲜鸡肉、冻虾、冻带鱼、凉拌菜与冰激凌)进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。结果:567份8类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌27份,阳性检出率为4.76%,其中包括生鲜猪肉6份(5.94%)、生鲜羊肉5份(6.02%)、生鲜鸡肉5份(5.10%)、冻虾4份(7.69%)、冻带鱼2份(3.28%)以及凉拌菜5份(11.63%),生鲜牛肉与冰激凌均未检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜的污染风险最高,应加强该方面的防控,以确保食品安全。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证

目的通过能力验证提升食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力和实验室质量管理水平。方法依据GB 4789.30-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》进行检测,利用BAX system Q7全自动病原微生物检测系统对能力验证中的3个样品进行快速筛查,采用VITEK2COMPACT全自动细菌鉴定系统、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)和溶血素O基因(hlyA)序列比对分析鉴定可疑菌株。结果编号CODE1和CODE3的样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,编号CODE2的样品未检出。结论本实验室参加了中国食品药品检定研究院组织的食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证测试,取得了满意的实验结果。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析

目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据.方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率.结果:897份10类常用食品中,检出...     

实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的结果分析与探讨

目的:对实时荧光PCR检测单核细胞增生李斯特氏菌假阳性结果的原因分析探讨。方法:对假阳性的样本进行传统培养法鉴定分析,将鉴定的菌落进行实时荧光PCR检测,同时对样本基质的影响和培养基本底的影响进行实时荧光PCR检测。结果:样本中的可疑菌落、样本的基质、培养基本底对实时荧光PCR检测结果均无假阳性影响。结论:实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的假阳性主要原因可能是样本中存在死亡目的菌基因造成的干扰。     

广州市市售食品中单核细胞增生李斯特氏菌监测结果分析

目的 分析广州市市售食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染分布情况.方法 2013—2019年共采集16类共4905份食品样品,开展单核细胞增生李斯特氏菌监测分析.按照GB 4789.30—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》中规定的食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法开展检测.结果 单核...     

食品中单核细胞增生性李斯特氏菌PCR快速检测方法

为建立食品中单核细胞增生性李斯特氏菌 (单增李斯特氏菌 )的快速、敏感、特异的PCR检测方法 ,选取hlyA基因作为靶序列设计一对引物 ,用该引物对 6 3株从国内食品中分离的李斯特氏菌 (进行传统方法验证 )和 2 0株非李斯特氏菌进行PCR扩增 ,并用此方法对人工污染食品进行检测 ,扩增片段表现出极好的单增李斯特氏菌种特异性 ,人工污染的生肉、冷冻虾仁、卷心菜的检出限为 39cfu g ,为食品中单增李斯特氏菌的快速、敏感并且特异的检测方法。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌两种定量检测方法的比较

研究比较不同杂菌污染条件下平板计数(Plate counting)法和稀释培养计数(Most probable number counting)法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)含量的准确性,并探讨冷藏和冷冻食品,MPN保存过程中LM的数量增长情况。采用国标法中的平板计数法和MPN计数法对不同程度人工污染杂菌的牛奶、凉拌菜和盐水鸭分别进行LM含量的检测,并用MPN计数法对冷藏(2~8℃)和冷冻(-20℃)条件下保存的牛奶、凉拌菜和盐水鸭进行LM含量的检测。结果表明,杂菌染菌浓度较低时(LM含量与杂菌含量比为10:1), LM检出限较高(≥ 100 CFU/g (mL)),平板计数法检测LM含量的准确性较高,而杂菌染菌的初始浓度较高时(LM含量与杂菌含量比为1:10),LM检出限较低(< 100 CFU/g (mL)),MPN计数法检测LM含量的准确性较高;牛奶、凉拌菜和盐水鸭在经过不同冷藏和冷冻保存时间后LM数量对比差异有统计学意义(p<0.05),且食品中LM数量随着冷藏和冷冻保存时间的增加而增多。     

即食食品中单核细胞增生李斯特氏菌的风险评估

从风险评估的4个方面并结合欧盟法规(Regulation(EC)No 2073/2005)中单核细胞增生李斯特菌的限量指标,介绍关于即食食品中单核细胞增生李斯特菌风险评估的新观点,并指出需要改进微生物标准中的单核细胞增生李斯特菌的限量指标.假设此菌对人类疾病的有关风险,对如何降低即食食品中单核细胞李斯特菌的水平提出建议.     

泉州市食品中单核细胞增生李斯特氏菌的定性、定量及耐药性分析

为了解福建省泉州市食品中单增李斯特氏菌的污染状况，于2000年12月至2001年12月对泉州市市售的155份生肉、熟肉制品、水产品中的单增李斯特氏菌进行了定性，定量及耐药性测定，检出李斯特氏菌47株，总检出率为35．48％，其中生肉类68．12％，海产品类12．5％，熟肉类6．52％，检出单增李斯特氏菌6株，总检出率3．87％，其中生肉类8．7％，海产品和类熟肉类中未检出。6株单增李斯特氏菌均对氨苄西林，头孢噻吩、氯洁霉素，氧氟沙星，青霉素G、四环素，万古霉素敏感，对环丙沙星中度敏感，对呋喃妥因不敏感，根据测定结果，建议有关部门及早制定相应的管理措施，加强监测，防止其引起的食中毒爆发流行。     

单核细胞增生李斯特氏菌的PCR检测方法

研究比较了裂解法、热煮沸法、试验盒法提取单增李斯特氏菌DNA的效果 ,认为Promega试剂盒法提取的DNA ,得率高、纯度好。同时根据单增李斯特氏菌的毒力相关基因的 5对引物 ,进行了引物的特异性研究 ,结果发现inlA引物、inlB引物、plcA引物特异性好 ,可以用于食品中单增李斯特氏菌的检测     

食品中单增李斯特菌PCR-NALF检测方法

建立了一种快速检测单增李斯特菌的聚合酶链式反应-核酸层析(PCR-NALF)方法,该方法通过一对标记生物素和地高辛的引物,对提取自样品中的DNA进行扩增,然后用包被亲和素和抗地高辛抗体的层析试纸条对扩增产物进行检测,并通过肉眼可见的红色条带进行结果判读,从而替代电泳实现便捷检测。在特异性试验中,其他李斯特菌和常见致病菌均呈现阴性反应,与电泳结果一致。与传统微生物检测法(GB/T 4789.30-2008)相比无显著性差异(χ~2=0,P>0.05)。     

北虫草子实体核酸的提取研究

本研究利用超声波辅助提取技术,结合生物酶破壁技术,以北虫草子实体为研究对象,以核酸提取率为评价指标,进行单因素实验和正交实验,摸索食用菌子实体风味成分提职的方法及各工艺参数。研究结果表明：影响北虫草子实体核酸提取率的因素从大到小依次为：超声波功率〉纤维素酶添加量〉超声波处理时间〉提取温度。最佳条件为：超声波功率175W,纤维素酶添加量1．6g／L,超声波处理时间50min,提取温度75℃,提取率为77．03％。     

谷氨酸菌体中核酸类物质的提取

研究了谷氨酸菌体中核酸提取的工艺条件 ,获得了较好效果 .在 12 0℃ ,pH 9,菌体质量浓度 10 g/dL的条件下 ,提取 2h ,蛋白质的分离率为 90 % ,核酸的提取率高达 90 %以上 .     

微波法提取新鲜双孢菇菇柄核酸的工艺研究

双孢菇菇柄中含有丰富的核酸,从菇柄中提取核酸物质,为菇柄的后续处理提供了新的途径。研究微波法提取新鲜双孢菇菇柄中核酸的得率和色差值的影响因素,在单因素的试验基础上,通过正交试验优化了核酸的提取工艺参数。得到提取工艺的最佳条件为:微波强度16 W/g,微波时间40 s,菇柄厚度14 mm,氯化钠浓度0.9%,在此条件下核酸得率为3.24%,色差值为75.10。与传统的氨法、浓盐法相比,核酸得率分别增加了10.96%、58.82%,且所得核酸色泽更好。     

超高压提取洋葱皮中阿魏酸的研究

目的:研究采用超高压提取洋葱皮中阿魏酸的最佳工艺条件,并且同回流提取法和超声提取法进行比较.方法:在单因素实验的基础上,采用L9(34)正交实验对超高压提取洋葱皮中阿魏酸的工艺进行优化,以阿魏酸的得率为指标,考察料液比(g∶mL)、乙醇浓度、超高压压力、加压时间对阿魏酸得率的影响.结果:得到优化的工艺条件为固液比1*22,乙醇浓度75％,超高压压力320 MPa,超高压时间4 min,该条件下阿魏酸的得率可达0.322％.结论:超高压提取阿魏酸得率高,提取时间短,是一种提取洋葱皮中阿魏酸的适宜方法.     

从海鱼鱼白中提取核酸

对地产海鱼加工下脚料鱼白中核酸含量测定、提取方法、产品纯度测定和组分鉴定方法进行了研究.结果显示在样品预处理过程中,低温抽提法比索氏抽提器法造成核酸损失要小.核酸粗产品收率为6.72％时,核酸总质量分数为2.30％.     

酶-微波联用法提取枸杞总黄酮

研究酶-微波联用法提取枸杞总黄酮的最佳工艺条件。采用纤维素酶提取枸杞总黄酮,在单因素试验基础上利用正交试验研究乙醇浓度、酶解温度和酶解p H值对提取率的影响,确定最佳酶解条件。在单因素试验基础上,通过正交试验确定微波提取的最佳工艺参数,采用微波法进一步提取酶解液中的枸杞总黄酮。酶解阶段最佳工艺参数为:乙醇浓度45%,酶解温度50℃,酶解p H4.0;微波阶段的最佳工艺参数为:液固比30 m L/g,微波温度65℃,微波时间4 min。该酶-微波联用法提取枸杞总黄酮的提取率达1.560%。     

核酸发酵液抑菌成分的分离提取

对核酸发酵液的抗菌活性进行了初步研究 ,发现核酸发酵液有一定抗菌活性。将发酵液在 pH 7条件下浓缩后调节到酸性 ,用石油醚萃取 ,分离出一种不易溶于冷水 ,易溶于乙醇、石油醚及碱溶液的结晶 ,该结晶的抗菌活性比发酵原液提高 3 4倍。     

蛋白酶K的性质及其在核酸提取中的应用

蛋白酶K是一种高活性的丝氨酸蛋白酶,不但广泛用于分子生物学和细胞生物学等领域的相关实验,而且在食品、农业、医药等领域的应用也与日俱增。从本质上说,蛋白酶K降解影响核酸提取的组蛋白、核酸酶等蛋白质,是其用于各个领域的主要基础。目前,我国尚无针对核酸提取用蛋白酶K产品的统一标准,从而给蛋白酶K产品的流通、使用和监管造成诸多不便和困难。对蛋白酶K的性质和酶活力测定方法进行分析,并对其在从各种生物材料提取核酸中的应用条件进行总结,以期为核酸提取用蛋白酶K制定相关的方法标准和产品标准提供参考。     

酸法提取仙人掌多糖工艺

为探索适合产业化的仙人掌多糖(Opuntia dillenii Haw.polysaccharides,ODPs)提取工艺,采用单因素及正交试验优化酸法提取ODPs条件;优化的苯酚硫酸法测定ODPs得率及含量;并用酶法结合盐酸法除蛋白,经透析,洗涤得到精制的ODPs。得到酸法提取ODPs最佳条件为:加入浓度为0.10 mol/L的硫酸溶液,液料比为20∶1(mL/g),70℃提取2次,每次2 h。平均产率达39.92%,多糖纯度达87.11%,多糖中蛋白含量降低至1.06%。