河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。     

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。      

中华真地鳖抗氧化肽的分离及其抗氧化活性的研究

以中华真地鳖酶解物为原料,分离抗氧化肽,并对其抗氧化活性进行研究。采用DEAE-SephadexA50离子交换层析分离中华真地鳖抗氧化肽,得到FⅠ、FⅡ、FⅢ3个组分。其中FⅡ组分对O2-·自由基、OH.自由基、DPPH.自由基的清除能力最强,清除率分别为86.83%(10mg/mL)、92.28%(0.7mg/mL)、68.06%(1.8mg/mL),其半抑制质量浓度(IC50)分别为5.98、0.27、1.09mg/mL。利用高效液相分离FⅡ组分,以0%～30%乙腈为流动相,在进样量1mg时分离效果较好。     

合浦珠母贝肉短肽的分离及其抗氧化活性研究

为制备具有抗氧化能力的合浦珠母贝肉活性肽,本文采用Sephadex G-25分子筛层析法对合浦珠母贝肉酶解产物进行分离,测定分离到的各活性组分分子量及其总抗氧化活性、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。结果表明,合浦珠母贝肉酶解产物经Sephadex G-25分离得到6个主要活性组分,相对分子量分别为1437.5、833.7、421.9、244.7、89.0、17.4u,其中功能短肽F1(1437.5u)、F2(833.7u)、F4(244.7u)的抗氧化效果较强,特别是F2(833.7u)短肽具有最强的总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化活性肽的开发提供理论技术依据。     

猪皮胶原蛋白抗氧化肽的分离纯化及体外抗氧化活性研究

采用碱性蛋白酶对猪皮胶原蛋白进行酶解,制备抗氧化肽。为了得到抗氧化活性高且纯度高的抗氧化肽,本实验采用多种体外抗氧化评价体系研究超滤获得的各分子质量段猪皮胶原蛋白抗氧化肽的体外抗氧化活性;依次采用离子交换色谱、凝胶色谱对猪皮胶原蛋白酶解液进行分离纯化。结果显示:超滤分离获得5~10ku的抗氧化肽较其他分子量范围的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性;采用离子交换色谱、凝胶色谱两种分离方法分步分离能达到较好的分离纯化效果,离子交换色谱分离得到7个组分,其中组分P1对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.85mg/mL时,清除率为46.30%,IC50值为1.24mg/mL;该组分经过凝胶色谱分离后得到2个组分,其中组分P1-B对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.9mg/mL时,清除率为49.43%,IC50值为0.98mg/mL。     

中华圆田螺抗菌肽抑菌效果、理化性质及抑癌活性测定

抗菌肽是一类免疫效应因子,它在生物机体的先天免疫系统中起到重要的作用,具有广谱抗菌、抗寄生虫、抗病毒、抗癌、抗氧化等多种生物学活性,尤其是其对某些癌细胞具有高毒性,对正常细胞低毒性的特性引起了研究者们广泛关注。以中华圆田螺作为研究对象,初步提取抗菌肽,测定其抗菌效果、理化特性和抑癌活性。结果表明：粗提液抑菌效果明显;其抑菌活性随着处理温度的升高,处理时间的延长呈现逐步降低的趋势,但仍表现出较好热稳定性;在弱酸性(pH值4~6)条件下,随着酸性的降低抑菌活性呈现增加的趋势,在中性和碱性(pH值7~12)条件下,随着碱性的增加抑菌活性不断降低;随着冻融次数的增加,抑菌活性略有变化;粗提液对A549细胞的增殖表现出抑制作用。     

镉对中华圆田螺抗氧化酶活性和脂质过氧化的影响

为研究水环境中重金属镉(Cadmium,Cd)对中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)肝胰腺组织的抗氧化酶活性和脂质过氧化的影响,实验设置4个Cd²⁺染毒组(1.5、3.0、6.0和12.0 mg/L)和1个空白对照组,每组分别处理24、48、72和96 h后,测定中华圆田螺肝胰腺组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽转移酶(GST)和过氧化氢酶(CAT)的活力及谷胱甘肽(GSH)和脂质过氧化反应终产物丙二醛(MDA)的含量。结果显示,在暴露24 h时,随着Cd²⁺浓度的升高,SOD、GPx、CAT、GST和GSH的变化规律相似,均先升高后下降;同一浓度Cd²⁺暴露后,随着暴露时间的延长,SOD、GPx、GST 和CAT的活力、GSH含量均呈先升后降的趋势。随着时间延长和浓度增加,中华圆田螺肝胰腺组织中的MDA含量呈持续升高趋势。研究表明,中华圆田螺肝胰腺组织中抗氧化酶对Cd²⁺的毒性反应较灵敏,抗氧化酶活性变化水平和MDA含量的变化均可作为检测中华圆田螺Cd²⁺污染的生物指标,同时,肝胰腺组织亦可作为检测Cd²⁺毒性的靶器官。     

脱脂米抗氧化肽的分离纯化与研究

通过碱性蛋白酶酶解脱脂米糠蛋白制得脱脂米糠抗氧化肽（DRBAP）,用DEAE-52、SephadexG-15纯化DRBAP,薄层层析鉴定其纯度。通过亚油酸体系中抗氧化能力、自由基捕获能力、金属离子螯合力等不同的实验体系研究其纯化组分的体外抗氧化活性,同时分析了其氨基酸组分和分子量分布情况。结果表明,分离纯化得到抗氧化活性较高的组分G4,较纯化前的DRBAP其对铁离子的螯合率提高了近11%,对DPPH自由基、·OH、O2-·清除率依次提高了20%、9%、16%,在亚油酸体系中吸光值下降了0.7,其主要氨基酸成分为Asp、Glu、Leu、Phe、Arg、Pro,相对分子质量小于1000u的比例达到90.83%,分子量小于500u的达到14.38%。      

绿豆抗氧化活性肽的分离纯化及其组成分析

采用超滤法和Sephadex G-25凝胶色谱法对绿豆蛋白的酶解产物进行了分离纯化,得到了分子量为3426和1272u的两种绿豆抗氧化活性肽T1和T2,T1的纯度为85.92%,T2的纯度为94.99%,T1和T2均含有16种相同的氨基酸,表现出较强的体外抗氧化能力,T1对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为69.14%和58.62%;T2对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为91.70%和74.68%。      

鲜马奶乳清蛋白抗氧化肽分离纯化及其活性研究

分离纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性。以胰蛋白酶为酶源酶解鲜马奶乳清蛋白,采用3KDa、10KDa、30KDa不同分子量范围超滤膜对水解液进行分离,分子量在3~10KDa段的酶解液还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力,超氧阴离子清除能力均较高,分别为0.8949、63.19%、77.13%、70.08%。用SephadexG-50葡聚糖凝胶色谱纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性,得到A、B两个组分,B组分的还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力均高于A,分别为0.9814、55.28%、74.25%、56.67%。说明鲜马奶乳清蛋白酶解液具有一定的抗氧化活性,为鲜马奶抗氧化肽进一步纯化、结构鉴定及其生物活性研究提供基础。     

猪皮明胶肽体内抗氧化功效的研究

研究猪皮明胶木瓜蛋白酶水解物在小鼠体内的抗氧化作用。采用试剂盒测定小鼠血清、肝脏、肺、肌肉的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、过氧化氢酶（CAT）的活性、总抗氧化能力（T-AOC）和微量丙二醛（MDA）含量。实验结果表明,猪皮明胶木瓜蛋白酶水解物可以提高受试小鼠血清、肝脏、肺、肌肉中T—SOD、GSH—PX、CAT、T—AOC,而降低这些组织中MDA的含量,说明明胶肽具有一定的抗氧化活性。     

Purification,characterization, and in vitro digestion of novel antioxidant peptides from chicken blood hemoglobin

The study aimed to purify and characterize antioxidant peptides from chicken blood hemoglobin hydrolysate. The fraction M₂ (< 3 KDa) with the strongest antioxidant activity was isolated by ultrafiltration, and its DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical) free radical scavenging rate, ABTS [2,2′-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)] free radical scavenging rate, and iron ion chelation activity were 82.91%, 77.49%, and 80.99%, respectively. After in vitro digestion, the antioxidant capacity of chicken blood hydrolysate was significantly higher than that before digestion (p < 0.05). M₂ exhibited the strongest antioxidant activity after stomach digestion, with a DPPH radical scavenging rate and iron ion chelating power of 82.91% and 79.61%, respectively. Component A was purified from M₂ by Sephadex G-25 gel chromatography. The peptide sequences were identified by LC-MS/MS from fraction A, and four peptides, AEDKKLIQ (944.54 Da), APAPAAK (625.36 Da), LSDLHAHKL (1033.57 Da), and LSNLHAYNL (1044.54 Da) were synthesized using the solid-phase peptide method, among which APAPAAK was a novel antioxidant peptide. Molecular docking was used to simulate the binding of these four peptides to the key active site of Keap1 via hydrogen bonding. This study suggests that chicken blood may provide a new natural source of antioxidant peptides.     

胡杨花序乙醇提取物体内抗氧化活性研究

探讨胡杨花序乙醇提取物的体内抗氧化活性,分别用165 mg/kg BW、330 mg/kg BW、660 mg/kg BW剂量组的胡杨花序提取物和生理盐水对照组给试验小鼠每日灌胃,检测小鼠血清和肝匀浆中的超氧化物歧化酶（SOD）的活性及丙二醛（MDA）的含量。与对照组相比,花序提取物灌胃各组小鼠血清和肝组织中的SOD活力显著提高（P〈0.05）,同时MDA的含量显著降低（P〈0.05）。结果表明,胡杨花序可以提高小鼠机体的抗氧化能力,抑制脂质过氧化物。     

芦苇叶黄酮类提取物体内体外抗氧化性研究

研究醇提芦苇叶黄酮类提取物的体内体外抗氧化性。通过测定芦苇叶黄酮类提取物对体外大鼠肝组织匀浆、肝线粒体丙二醛（malondialdehyde,MDA）生成量及大鼠红细胞溶血的影响。结果表明：芦苇叶黄酮类提取物在0.5～10 mg/mL范围内能抑制大鼠肝组织匀浆及肝线粒体MDA的生成,抑制大鼠红细胞溶血,具有量效关系,表明芦苇叶黄酮类提取物具有体外抗氧化效果。随着剂量的增加,芦苇叶黄酮类提取物可提高S180荷瘤小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性,降低MDA含量,从而提高其体内抗氧化活性,当剂量达到300 mg/（kg·d）时,芦苇叶黄酮类提取物与10 mL/（kg·d）的氟尿嘧啶均可促进荷瘤小鼠体内抗氧化能力的提高,且二者间没有显著性差异。     

蛋源性抗氧化肽研究进展

抗氧化肽具有活性强、分子质量小、易吸收等特点,已成为生物领域研究的热点之一。禽蛋蛋白质含量丰富,且其氨基酸组成与人类必需氨基酸比例接近,是制备抗氧化肽的一个良好来源。本文综述了蛋源性抗氧化肽的来源、抗氧化肽活性以及活性构效关系,提出蛋源性抗氧化活性肽研究中存在的问题,并对蛋源性抗氧化活性肽的研究与应用进行展望,以期为相关研究提供参考。      

无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性研究

研究无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性,以氨基酸态氮含量和DPPH·清除率为指标进行单因素和正交实验,研究酶解时间、酶解温度、酶量、p H对氨基酸态氮含量和抗氧化活性的影响。正交实验确定牡蛎酶解的最佳工艺条件为:酶量5.5%,酶解温度50℃,p H6.0,酶解时间3.5 h。此工艺条件下,牡蛎酶解液氨基酸态氮的含量为0.181 g/100 m L,DPPH·清除率达71.80%,还原力为0.813,·OH清除率为16.19%,牡蛎酶解液具有较强的抗氧化活性。      

发酵鹅肝肽的分离纯化及其抗氧化特性研究

为了提高普通鹅肝的综合利用价值,本研究利用解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）混合发酵制备鹅肝肽,采用Sephadex G-25凝胶层析法分离纯化出发酵鹅肝肽,并对其分离组分进行氨基酸分析和功能特性研究（抗氧化活性、金属螯合率测定）,最后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF/TOF）测定高活性组分的相对分子质量。结果表明:Sephadex G-25凝胶层析依次出现P1、P2、P3三个峰;其中P3的必需氨基酸含量（70.32±5.35）mg/100 g明显高于P1（40.06±2.04）mg/100 g和P2（55.39±2.56）mg/100 g,含硫氨基酸（Met、Cys）和疏水性氨基酸（Val、Ile、Leu、Phe、Ala）分别占总氨基酸含量的17.78%和31.31%,均高于P1（8.18%,21.46%）、P2（6.63%,21.53%）。P1、P2、P3均具有较强的抗氧化能力。其中P3的TBRAS值为0.2495±0.016显著低于P1、P2（p<0.01）,抑制羟自由基能力,Fe2+螯合率和Cu2+螯合率分别为75.75%±0.49%、72.40%±0.80%和69.04%±0.40%,均显著高于P1、P2（p<0.05）;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定P3的相对分子质量范围在1.02 ku以下。      

红小米黄酒酿造工艺研究及体外抗氧化活性评价

以南阳特色红小米为主要原料,研究红小米黄酒酿造工艺,并对其体外抗氧化活性进行评价。将单因素试验与Box-Behnken试验结合,以酒精度为评价指标,对前发酵工艺进行优化;以感官评分为评价指标,采用均匀设计试验对后发酵工艺进行优化;通过测定红小米黄酒对DPPH·、·OH的清除效果及对K3[Fe（CN）6]的还原力,评价其体外抗氧化活性。结果显示,红小米黄酒较优酿造工艺条件为：麦曲用量9%,酿酒曲用量0.48%,前发酵温度26 ℃,前发酵时间7 d,后发酵温度12 ℃,后发酵时间75 d。红小米黄酒清除DPPH·的半抑制浓度（IC50值）为0.45 mL/mL,清除·OH的IC50值为0.48 mL/mL,一定浓度范围内,其对K3[Fe（CN）6]的还原力与浓度呈线性相关,表明南阳特色红小米黄酒具有较强的体外抗氧化活性。