一株蛋白水解酶产生菌的分离鉴定及发酵产酶条件优化

从养殖柞蚕周边的土壤分离筛选和鉴定得到一株能够产生蛋白水解酶的菌株G1。通过单因素实验优化该菌株的培养基碳源、氮源、初始pH、发酵温度、发酵时间和接种量等产酶条件。实验结果表明,该菌株为Luteibacter anthropi。当培养温度为47℃,将菌株按4%接种量接种到以葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源、初始pH为8.0的培养基中发酵96h,在此最优发酵条件下产酶量达到1 520U/mL。     

蕈状芽孢杆菌SH-1抗菌活性物质发酵条件优化

从土壤中筛选到一株芽孢杆菌SH-1,该菌株能够产生抑制多种细菌的活性物质,初步确定该菌株为蕈状芽孢杆菌．通过单因素实验及正交实验对蕈状芽孢杆菌SH-1菌株所产生抗菌物质的发酵条件进行优化,采用牛津杯法测定该菌株所产抗菌物质的抑菌活性,最终确定蕈状芽孢杆菌SH-1菌株产生抗菌物质的最适发酵条件为：温度36℃,pH8,转速180r／min,接菌量体积分数4％,发酵时间24h．     

产壳聚糖酶菌株的诱变育种及其产酶条件研究

通过在培养基中加入不同种类的抗生素,对壳聚糖酶产生菌株Penicillium sp.ZD-Z1进行筛选,再经紫外诱变得到一株产酶活力较强的菌株,活力为0.58 U/mL.采用三因素(温度、pH、转速)四水平正交分析,所得到菌种最适产酶培养条件为:28℃、培养基初始pH4.5、摇瓶培养转速190 r/min.用发酵粗酶液对4%壳聚糖(相对分子质量290 000)水溶液进行降解实验,水解24 h后测得黏均相对分子质量为1 920,降解效果显著.     

链霉菌TD-1菌株抑菌活性物质发酵条件的优化

利用正交设计法及均匀设计法对链霉菌TD-1菌株发酵条件进行了优化,研究不同发酵因子对链霉菌TD-1产抑菌活性物质的影响.结果表明,发酵培养基中影响抑菌活性大小的主要因素为葡萄糖、黄豆粉、硫酸亚铁、磷酸氢二钾及硝酸钾;抑菌活性物质较佳发酵条件为90 mL/250mL三角瓶,接种量的体积分数为0.06,发酵周期8 d,初始pH值为7.15.在此条件下,最终抑菌效率与原发酵液相比发酵液对串珠镰刀菌抑菌活性提高了53.38%.     

果胶酶生产菌株的分离及其产酶条件优化

为了从自然界中寻找一种果胶酶生产菌株,在果胶平板上经过筛选、复筛,分离出产果胶酶生产菌株,并将分离得到的菌株在摇瓶发酵培养、测定其酶活力,其发酵培养基的初始pH、最适温度、最适接种量及发酵周期进行初步研究.结果表明:经过筛选得到的产果胶酶菌株在发酵培养基的初始pH为7.0、培养温度为33 ℃、接种量为30%、发酵周期为56 h时,此菌株产酶的酶活力最高,优化后的条件大大提高了菌株的产酶能力.     

一种果胶酶生产菌株的分离及其产酶条件优化

为了从自然界中寻找一种果胶酶生产菌株,在果胶平板上经过筛选、复筛,分离出产果胶酶生产菌株,并将分离得到的菌株在摇瓶发酵培养、测定其酶活力,其发酵培养基的初始pH、最适温度、最适接种量及发酵周期进行初步研究.结果表明：经过筛选得到的产果胶酶菌株在发酵培养基的初始pH为7.0、培养温度为33℃、接种量为30%、发酵周期为56 h时,此菌株产酶的酶活力最高,优化后的条件大大提高了菌株的产酶能力.     

产木聚糖酶黑曲霉LN0601的液体发酵

利用黑曲霉LN0601 菌株液体发酵生产木聚糖酶。分别考察培养基碳源、培养基氮源、培养时间、培养温度、培养起始pH 及孢子悬液接种体积分数等因素对该菌株产木聚糖酶性能的影响。确立了黑曲霉LN0601 产木聚糖酶的最优条件, 即以质量分数为5 %的玉米芯粉作为培养基碳源;质量分数为1 %的NaNO₃ 作为培养基氮源;培养时间为2 d ;培养温度为28 ℃;培养起始pH 为6.5;孢子悬液接种量体积分数为20 %, 接入装有100 mL 液体发酵培养基的250 m L 三角瓶内, 150 r/ min 振荡培养。此条件下黑曲霉LN0601 的木聚糖酶活力可达2 000 U/m L 以上。     

降解黄曲霉毒素B_1菌株发酵工艺的研究

对黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌株克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)XY1降解AFB1进行发酵工艺的优化,主要包括培养基成分和培养条件的优化。对培养基成分的优化主要包括:碳源,如葡萄糖、可溶性淀粉、甘露醇、玉米芯粉、蔗糖、α-乳糖、D-果糖;氮源,如牛肉膏、硝酸铵、硝酸钠、蛋白胨、尿素、胰蛋白胨、酵母浸粉;金属离子,如CaCl_2、MgCl_2、FeCl_2、ZnSO_4、CuSO_4、MnCl_2;培养条件主要包括温度、起始pH、接种量、装液量等。选出最佳碳源、氮源和金属离子,设计新的培养基组成,根据单因素试验结果,运用Box-Behnken设计原理,设计响应面试验,对培养基配方进行最优化分析。结果表明:模型(P=0.001 4)在1%水平上具有极显著性,失拟项不显著(P=0.065 20.05),其R2=0.943 1,R2adj=0.870 1,说明该模型拟合程度良好,可以模拟94.31%的AFB1降解率变化,其中玉米芯粉对AFB1降解率的影响最大。确定最优发酵培养基配方:玉米芯粉添加量1.06%;胰蛋白胨添加量1.32%;Ca Cl2添加量0.036 mol/L。最佳发酵条件:起始p H值为7.0、温度34℃、接种量6%(V/V)、装液量25 m L/250 m L,降解时间72 h。经发酵工艺优化,Klebsiella sp.XY1对AFB1降解率由71.91%升高到95.13%。     

绿色木霉(Trichoderma viride)867产壳聚糖酶的发酵工艺条件的优化

系统研究了碳源、氮源、初始pH、培养温度、培养基装液量、接种量和培养时间等因素对绿色木霉867产壳聚糖酶的影响.结果表明,最佳碳、氮源分别为可溶性壳聚糖和蛋白胨,在初始pH5.0,培养温度28℃,培养基装量75 mL/250 mL,接种量6%和培养时间(180 r/min)40 h时最利于产酶.在此基础上通过均匀设计法优化了发酵培养基配方.优化后的培养基配方为:可溶性壳聚糖0.9%,氨基葡萄糖0.5%,蛋白胨0.9%,K2HPO40.016%,CaCl2.2H2O 0.055%.在该条件下,壳聚糖酶活为0.291 u/mL,比原基础培养条件下酶活提高29.9%.     

一株分离自潮间带污泥细菌Clostridium sp. T7产氢特性分析

产氢菌株Clostridium sp. T7分离自天津海水浴场潮间带的污泥.研究起始pH、碳源、氮源、NaCl质量分数对菌株T7产氢性质的影响.结果表明：菌株T7最适产氢的起始pH是6.0,能够利用蔗糖、葡萄糖和果糖等碳源发酵产氢.菌株T7能够利用牛肉膏和酵母粉为单一氮源产氢,不能利用蛋白胨为氮源进行产氢.NaCl质量分数能影响菌株T7的产氢量,海水培养条件（NaCl质量分数为3%）下,最高产氢量是每摩尔葡萄糖（1.48,±0.05）mol,相比之下,淡水培养条件下其产氢量提高20%.NaCl质量分数在0.4%～7%时,菌株T7都能够产氢,这表明菌株T7有望应用于淡水或高盐有机废水产氢领域.     

细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基的优化

采用液体摇瓶培养的方法,以DPPH自由基清除率为指标,对一株细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基进行了优化,确定了其产抗氧化活性物质的最佳培养基.结果表明最佳培养基为:碳源为蔗糖和麦芽糖组成的复合碳源;氮源为酵母浸出粉;微量元素及生长因子为KH2PO4、柠檬酸铵和VB;正交实验结果表明最佳培养基配方为蔗糖2%、麦芽糖1%、酵母浸出粉1.5%、KH2PO40.5%、柠檬酸铵0.04%、VB0.03%.培养基优化后,该菌株发酵液中代谢产物的抗氧化活性可达73.47%.     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

产纤维素酶黑曲霉LN0401液体发酵条件的分析

利用黑曲霉LN0401菌株液体发酵生产纤维素酶。分别考察培养基碳源、培养基氮源、培养时间、培养温度、培养起始pH及孢子悬液接种的体积分数等因素对菌株产纤维素酶性能的影响。确定了黑曲霉LN0401产纤维素酶的最优条件。即以质量分数为5%的稻草粉作为培养基碳源;质量分数为1%的蛋白胨作为培养基氮源;培养时间为3 d;培养温度为30℃;培养起始pH为6.0;孢子悬液接种的体积分数为6%~8%接入装有100 mL液体发酵培养基的250 mL三角瓶内,150 r/min振荡培养。此条件下黑曲霉LN0401的CMC酶活为195.6~198.5 U/mL,FPA酶活为27.7~30.4 U/mL。     

海洋真菌Schizochytrium sp. DP-16发酵产DHA油脂过程的优化

利用一株海洋真菌Schizochytrium sp.DP-16发酵产DHA,对其发酵过程进行了优化,并利用气质联用(GC-MS)对其脂肪酸组成进行了分析。通过单因素试验确定了发酵培养基配方和培养条件,在优化条件下培养120h,细胞生物量达65.0g/L,油脂产量达30.7g/L,DHA达8.9g/L。GC-MS分析表明Schizochytrium sp.DP-16细胞中共检出8种脂肪酸,主要含有C14:0和C16:0两种饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸主要包括DPA和DHA,其中DHA质量分数达28.784%。     

产直链脂肽类抗菌物质枯草芽孢杆菌HS-A38的生物学特性

以从海参肠道中筛选的枯草芽孢杆菌HS-A38为目的菌株,分析了其生长特性、产酶特性、抑菌活性及其产生抗菌活性物质的能力。结果表明,培养时间为36~38h时芽孢出芽率最高,该菌株具有较强的抑菌作用,并具有产生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和果胶酶的能力。从该菌株的发酵后上清液中提取得到2种具有抗菌活性的化合物,初步推断这2种物质为直链脂肽类抗菌物质。     

丹参酮转化酶的制备及其在丹参酮转化中的应用

以Absida sp.T48s为产酶菌种,研究了丹参酮转化的培养基组成.结果表明,Absida sp.T48s在豆粕占65%的培养基中培养7 d,产酶量最大.最适酶转化条件为45℃、pH 5.0、底物浓度17.5%、反应时间13 h.     

贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2产抗菌物质发酵条件优化及抗菌特性研究

从猪肠道微生物中筛选到的贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2对禾谷镰刀菌有良好的抑菌效果,有望用于禾谷镰刀菌引起的作物病害防治。为进一步提高菌株Vel-HNGD-F2的抗菌物质产量,采用响应面法对其发酵条件进行优化;通过酸沉淀法对菌株Vel-HNGD-F2的脂肽类物质进行粗提并检测抑菌活性,研究粗提物的稳定性;用已知的5种编码脂肽类抗生素的基因的特异性引物进行PCR扩增并测序分析;通过UPLC-Q-TOF-MS检测技术对脂肽粗提物的成分进行分析。结果表明：菌株Vel-HNGD-F2的最佳发酵条件为发酵温度36.49℃、发酵液初始pH 7.14、接种量3.13%,预测发酵上清液抑菌率为58.71%,实际抑菌率为58.49%;粗提物对禾谷镰刀菌有抑菌作用且具有良好的耐热性并对紫外照射不敏感;对PCR扩增产物测序结果经NCBI的在线BLAST比对,表明该菌含有与bmyB、fenD、ituC、srfAA和bacA同源的基因,推测菌株Vel-HNGD-F2可能分泌这5种脂肽;UPLC-Q-TOF-MS结果显示抗菌物质为包含surfactin、iturin和bacillomycin的混合物。菌株V...     

一株从片烟中分离的果胶酶菌株培养条件优化

为降低烟叶中有害成分,提高其燃吸品质,从片烟样品中筛选得到一株果胶酶高产菌株克雷白氏杆菌(Klebsiella sp.),并对此菌株的发酵培养基进行优化。首先应用单因素实验考察碳源种类及浓度、氮源种类及浓度和发酵初始pH。在单因素实验的基础上,进行响应面分析优化,确定了最佳发酵条件为:烟末添加量3.30%,硫酸铵添加0.35%,初始pH7.2。经摇瓶发酵验证,当初始pH7.2,烟末添加量3.30%,硫酸铵添加0.35%时,该菌株发酵产果胶酶活力最高,达到15.07U/ml。     

丹参酮转化酶的制备及其在丹参酮转化中的应用

以Absida sp.T48s为产酶菌种,研究了丹参酮转化的培养基组成。结果表明,Absida sp.T48s在豆粕占65%的培养基中培养7 d,产酶量最大。最适酶转化条件为45℃、pH 5.0、底物浓度17.5%、反应时间13 h。