纳豆激酶的研究现状与展望

纳豆激酶是从日本传统食品纳豆中提取的一种枯草杆菌蛋白酶,具有高效的抗血栓作用,而且易吸收,无副作用,有望被开发为新一代的口服抗血栓药物。本文概括了纳豆激酶的基本生化性质,溶血栓作用及机理,介绍了其酶活测定方法和分离纯化方法,并对纳豆激酶的开发应用进行了展望。     

纳豆激酶高产菌株的筛选及纳豆激酶的初步分离研究

从日本传统食品纳豆中筛选获得一株高产纳豆激酶的盐芽孢杆菌菌株,其产酶能力为227IU/g。该菌株经过固体发酵后获得含酶发酵物,采用硫酸铵分步盐析的方法对纳豆激酶进行了分离纯化,其沉淀物即纳豆激酶,经过分步盐析纳豆激酶的纯化倍数为1.34。     

纳豆激酶的研究及展望

纳豆激酶是纳豆枯草杆菌分泌的一种碱性丝氨酸蛋白酶,有较强的溶血栓作用,能够改善血液粘度,可增加血管弹性,是一种安全有效的绿色溶血栓药物,因此,研发高活性纳豆激酶的产品技术对于民生健康非常有利。纳豆激酶是一种理想的治疗血栓的药物,应用前景非常广泛。本文主要对纳豆激酶的溶栓机理及作用,纳豆激酶的分离纯化及工艺条件进行简单介绍,并简述纳豆激酶类相关产品,最终进行展望,以期对纳豆激酶的研究提供理论支持。     

纳豆激酶的研究进展

纳豆激酶有很强的溶血栓能力，跟传统的一些溶栓剂相比，具有安全性好，成本低，口服有效等优点，极有可能开发为新一代的溶栓剂。本文介绍了纳豆激酶的分离纯化技术，生化特性；并对纳豆激酶的活性测定方法，影响纳豆激酶稳定性的因素及提高纳豆激酶酶产量的几种途径等最新研究成果进行了综述。     

凝胶层析分离提纯纳豆激酶研究

从纳豆菌发酵液中提取纳豆激酶,采用20%～60%饱和度的硫酸铵沉淀,Supherdex G-75凝胶过滤层析对活性组分进行分离提纯.并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电(SDS-PAGE)对分离纯化的效果进行了检验.结果表明在SDS-PAGE中观察到单一条带,分子量27.7 ku.     

纳豆激酶稳定性的研究

纳豆激酶是一种新型溶栓酶 ,具有溶栓效率高、药效时间长以及无毒副作用等优点。实验研究了pH、温度、金属离子以及某些有机物质对该酶稳定性的影响。实验表明 ,该酶在 4 5℃以下和 pH 7～ 9范围内酶活相对稳定 ;Mg2 +和Co2 +离子对酶活有激活作用 ,而Cu2 +、Zn2 +和Al3+等离子对该酶有明显的抑制作用 ;牛血清蛋白、蛋白胨、明胶、甘油、丙二醇和海藻酸钠等能显著提高酶的耐热性 ,其中以明胶的作用最为明显。这些发现对液体酶的生产有重要指导作用     

纳豆激酶的纯化及性质研究

从固态发酵培养的纳豆中提取纳豆激酶 ,采用盐析、疏水层析、离子交换层析等方法 ,对提取液进行纳豆激酶的分离纯化。经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,活性酶蛋白为单一组分 ,并测得其分子质量为 2 8ku。纳豆激酶在pH5 0～ 1 0 0 ,4～ 3 7℃范围内具有较好的稳定性 ,其纤溶活性可被 0 1mmol/L的PMSF完全抑制。体外溶栓实验表明 ,纳豆激酶为纤溶酶而不是纤溶酶原激活剂。     

纳豆激酶的分离纯化及其特性研究

从实验室保存的1株高产纳豆激酶菌株出发,进行发酵产酶,确立具有纤溶活力的纳豆激酶的分离纯化工艺,主要通过硫酸铵分级盐析法和Phenyl Sepharose疏水柱层析进行分离纯化,用纤维蛋白平板法测定酶活力,用SDS-PAGE电泳验证为电泳纯,分子质量为28 ku。试验了不同作用温度、pH值和金属离子对NK活力的影响。结果表明,NK的适宜温度为25~50℃,适宜pH值为7.0,Cu2+,Mn2+,Hg2+是其抑制剂,而Mg2+,Ca2+为激活剂。     

纳豆激酶的研究进展与展望

纳豆激酶主要是由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）代谢产生的碱性丝氨酸蛋白酶,因其具有较强的溶栓能力而著称。与其他的大多溶栓剂相比,纳豆激酶具有安全性好、成本低、易吸收、副作用小等优点,因此可用于开发溶栓药物。该文对国内外纳豆激酶的溶栓功效、理化特性、发酵工艺、活性测定、纯化、改性和产品进行了综述,对其当前研究中的关键问题进行分析,并对未来纳豆激酶的研究方向进行了展望。     

纳豆激酶分离纯化方法的研究

采用硫酸铵二级盐析、330(OH)型树脂脱色、CM-52阳离子树脂离子交换层析三步法从发酵液中提取纳豆激酶。结果发现:(1)硫酸铵盐析采用20%~60%饱和度范围,纯化倍数为3.23,收率为72.36%;(2)330(OH)型树脂脱色,在脱色的同时可以除去杂蛋白,样品纯度达到电泳显示2条带;(3)CM-52阳离子交换树脂对纳豆激酶属于优吸型吸附,在pH6.0,0.01mol/L的PBS中交换效果最好,可以得到电泳纯的纳豆激酶,总收率为48.51%。     

降血压肽分离的研究现状与展望

通过凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱（RP-HPLC）等方法将不同来源的降血压肽进行分离，以得到结构明确的短肽片断，之后进行活性检测，从而为降血压机理的研究以及高血压的治疗提供了途径，并有望开发成降血压类功能食品。本论文概述了不同食物来源降血压肽国内外分离提纯研究的意义、现状及展望。     

纳豆菌抗菌作用的研究现状与展望

纳豆菌液体发酵产生的代谢产物具有抑制许多致病菌的作用，有望被开发成新型的食品防腐剂，其无毒无副作用，而且具有很多时人体有益的作用。概述了纳豆菌抗菌作用的研究现状与展望。     

纳豆菌B-12产纳豆激酶条件及酶学性质研究

以纳豆菌B-12为出发菌株,对其液体发酵产纳豆激酶的条件及纳豆激酶部分酶学性质进行了研究。实验研究了碳源、氮源、接种量、发酵时间、发酵温度和培养基初始pH值对纳豆菌B-12产酶的影响,在优化发酵条件下,纳豆菌B-12产酶量相当于尿激酶903IU/mL。纳豆激酶在50℃,热稳定性较好,保温100min残余酶活力保持80%左右;在pH6.0-9.0较稳定,残余酶活力保持在近80%左右;金属离子Fe3＋、Al3＋对纳豆激酶有明显的抑制作用,Zn2＋有微弱的促进作用。     

纳豆激酶高活性菌株的筛选及其液体发酵条件的优化

从纳豆样品中分离筛选到一株产纳豆激酶的细菌，编号为BN-6．通过单因素实验和正交实验确定了液体发酵纳豆激酶的最佳条件：大豆蛋白胨1％、蔗糖2％、培养温度35℃，初始pH=8.0，培养时间24h．在最佳条件下。该菌产酶纤溶活力超过1000尿激酶单位／毫升发酵液。     

豆豉活性成分的研究进展

对豆豉中大豆异黄酮、大豆低聚糖、大豆蛋白、豆豉溶栓酶以及褐色色素等活性成分的研究进展进行了综述。并对我国豆豉的研究与开发进行了分析和展望。     

两种纳豆激酶活性测定方法对比及相关性分析

从线性和精密度两个方面对纤维蛋白平板法和四肽底物法测定纳豆激酶活性的两种方法进行了比较研究,并验证了两种方法测定值之间的直线相关性.结果表明:纤维蛋白平板法和四肽底物法分别在10.77 IU/mL～80.73IU/mL和0.03 U/mL～0.09 U/mL浓度范围内呈线性,且日间和日内变异系数均小于10%.两者结果具有直线相关性,其关系为纤维蛋白平板法测定值(IU)=264.87×四肽底物法测定值(U)-19.633,(R2=0.9942).结论:纤维蛋白平板法与四肽底物法均能用于纳豆激酶活性测定,前者测定结果直接,但四肽底物法更灵敏,还可应用于高通量筛选.     

THE PRESENT SITUATION AND FUTURE PROSPECTS OF THE FALSE-TWIST PROCESS

Attention is drawn to the complexity of the theory of friction-twisting and to the practical difficulties encountered in obtaining satisfactory yarn quality with friction twisters at high production speeds. This is contrasted with the simplicity and reliability of pin twisters. Recent improvements in the design of pin twisters are explained, and these are offered as an explanation for the dominant position that these twisters hold at present and, in the opinion of the author, are likely to retain for some considerable time. The paper concludes with a reference to recent work that has shown that friction twisters with a built-in twist-control system may be the ultimate method of carrying out the false-twist process at very high speeds.     

仁用杏果肉资源化利用现状与趋势分析

阐述了我国仁用杏产业化发展中果肉资源严重浪费的现实,分析了仁用杏果肉的资源化利用价值、利用现状和发展趋势,指出酿造果醋是仁用杏果肉资源化利用的最佳途径。     

仲丁胺在果蔬保鲜中的应用及其检测技术研究现状

介绍了果蔬保鲜剂仲丁胺的基本性质，概述了仲丁胺在果品蔬菜保鲜中的应用现状，及其残留量的检测技术研究现状。     

磨削温度研究的现状与进展

从磨削温度的理论研究和磨削温度的测量技术两个方面，概要介绍了磨削温度的研究现状。探讨了磨削温度理论研究的发展趋势，比较了目前常用的几种磨削温度测量技术的优缺点。