平菇多糖中蛋白质脱除方法的比较

本试验以蛋白质脱除率、多糖保留率以及两因素的综合指标为评价指标,采用Sevage法、盐酸-乙醇等电点法和TCA法,分析比较其对平菇多糖脱蛋白效果的影响。试验结果表明,平菇多糖中蛋白质脱除率最高的为Sevage法,其次为TCA法;而多糖保留率最高的为盐酸-乙醇等电点法,其次为TCA。综合考虑两因素的影响,以TCA法效果最好。利用Box-Behnken试验设计,获得TCA法脱蛋白工艺的回归方程,再经响应面分析,得出脱蛋白最佳方案,即:TCA浓度5.6%,处理时间33 min,处理温度48℃,此时其综合评价平均值为83.96%,蛋白质脱除率为89.5%,多糖保留率为78.4%。     

普洱茶多糖分离及纯化

研究10种树脂对普洱茶多糖溶液色素脱除的效果,比较sevag法、三氯乙酸法、盐酸等电点法对普洱茶多糖的脱蛋白质效果.脱色、脱蛋白后的茶多糖经冷冻干燥、透析后,再用DEAE-52纤维素柱层析分离纯化.结果表明:D101大孔吸附树脂为普洱茶多糖脱色的最佳树脂,脱色率为72.27%,多糖保留率为46.97%,脱蛋白率为71.38%;三氯乙酸的脱蛋白效果最佳,添加2%(体积分数)质量分数为50%的三氯乙酸可脱除95.2%的蛋白质;选择水和NaCl溶液作为洗脱剂的温和条件,DEAE-52纤维素柱水洗脱的多糖得率最高,为51.23%.     

啤酒花多糖的提取及脱蛋白工艺研究

以超临界液态二氧化碳萃取后的啤酒花残渣为原料,采用正交实验和单因素实验,确定了啤酒花多糖的热水微波辅助萃取的最佳工艺条件:提取时间2h,料液比1∶10,提取温度90℃,微波功率750W作用时间12min;此条件下多糖提取率为2.76%。对得到的粗多糖,以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,在比较Sevag法,盐酸-正丁醇法,三氯乙酸-正丁醇法,木瓜/菠萝蛋白酶法对粗多糖中蛋白质的脱除效果的基础上,考察了酶法和化学法联用脱蛋白工艺,并最终确定菠萝蛋白酶-三氯乙酸-正丁醇的脱蛋白效果最好,最佳条件为温度45℃,酶解时间0.5h,酶添加量22.5U/mL,pH5.5,三氯乙酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为86.77%和77.37%;而木瓜蛋白酶-盐酸-正丁醇的脱蛋白工艺在有效脱除蛋白质的同时,多糖损失最少,最佳条件为温度55℃,酶解时间0.5h,酶添加量36U/mL,pH5.5,盐酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为77.37%和84.43%。     

猴头菇多糖脱蛋白方法的比较研究

以综合考虑蛋白质清除率和多糖保留率的综合指标为评价指标,比较Sevage法、酶法、酶-Sevage结合法脱除猴头菇多糖蛋白质的效果。结果显示,用Sevage法清除一次时除蛋白效果最好,此时蛋白质清除率为56.36%,多糖保留率为84.28%,综合指标为70.32%。酶法在最佳酶解条件即酶添加量0.3%,酶解温度50℃,酶解时间120 min下蛋白质清除率为54.06%,多糖保留率为84.71%,综合指标为69.39%。酶-Sevage结合法脱蛋白效果最好,用最佳酶解条件酶解之后用Sevage法脱除蛋白一次,此时蛋白质的清除率为83.14%,多糖的保留率为81.71%,综合评价指标为82.43%。此法切实可行,可用于猴头菇多糖脱蛋白。     

杜仲粗多糖脱蛋白方法的对比研究

采用Sevag法、三氯乙酸法和盐酸法对杜仲粗多糖脱蛋白,并测定蛋白质脱除率、多糖损失率和总抗氧化能力损失率。结果表明,3%三氯乙酸脱蛋白效果较好且不影响多糖总抗氧化能力,此条件下,蛋白质脱除率为53.32%,多糖损失率为3.67%。     

豆渣碱溶性粗多糖除蛋白工艺的研究

采用碱性过氧化氢法提取豆渣碱溶性多糖,但提取出的豆渣粗多糖中蛋白质含量较高,因此本论文对去除豆渣碱溶性粗多糖中蛋白质的最佳方法进行了研究。以蛋白质脱除率和多糖损失率为检测指标,在单因素和正交试验的基础上,比较了酶法、TCA法、Sevage法、酶法结合TCA法、酶法结合Sevage法的脱蛋白效果,最终确定了去除豆渣粗多糖中蛋白质的最佳方法为酶法结合TCA法。结果表明,酶法结合TCA法去除豆渣多糖中蛋白质的最佳条件为:酶解温度为45℃,酶解时间为2h,酶解液pH为8.0,加酶量为1.5%(以底物计),TCA最终浓度为1.5%(w/v)。在此条件下,蛋白质脱除率为91.80%,多糖损失率为35.64%。应用此法脱蛋白,蛋白质脱除率很高,多糖损失率相对较低,是去除多糖中蛋白质的最佳选择。     

米糠多糖脱蛋白工艺的研究

米糠多糖存在于稻谷颖果皮层中,在提取过程中,常混有一定量的蛋白质,影响多糖的纯度。本文比较了Sevag法、三氯乙酸法、酶法、酶-Sevag法及酶-TCA法对米糠多糖脱蛋白的效果。在单因素试验基础上,通过蛋白质脱除率和多糖损失率的比较得出酶-Sevag法效果优于其它方法。选取酶的添加量、pH值、Sevag试剂添加量、脱蛋白次数为四因素,各取三个水平,以蛋白质脱除率和多糖损失率为指标,做L9(34)正交实验确定酶-Sevag法的最佳脱蛋白工艺。结果显示:最佳工艺为酶的添加量为2.0%,pH为6.0,Sevag试剂用量为1/6糖液体积,脱蛋白次数为1次,在此条件下蛋白质脱除率可达76.89%,多糖损失率仅为13.45%。因此,酶-Sevag法是一种有效的米糠多糖脱蛋白方法,本文可为米糠多糖的开发提供参考。     

芒果皮渣多糖脱蛋白和脱色工艺研究

探讨芒果皮渣多糖纯化过程中蛋白质和色素的脱除方法。以蛋白质脱除率和多糖保留率为评价指标,比较三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法、Sevage法、HCl法、木瓜蛋白酶法、三氯乙酸+Sevage法、木瓜蛋白酶+三氯乙酸法、木瓜蛋白酶+Sevage法和木瓜蛋白酶+三氯乙酸-正丁醇法对芒果皮渣多糖的脱蛋白效果;以脱色率和多糖保留率为评价指标,在单因素实验的基础上,通过正交实验优化活性炭对脱蛋白后多糖溶液的脱色工艺。结果表明:三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果最佳,其条件为三氯乙酸-正丁醇与样液体积比2:1、三氯乙酸与正丁醇体积比1:20、振荡时间2 h,此时蛋白质脱除率为90.08%,多糖保留率率为94.40%;活性炭脱色最佳工艺条件为:样液pH3.0,活性炭添加量1.5%,脱色温度50℃,脱色时间75 min,此条件下脱色率为70.98%,多糖保留率为92.77%。本实验筛选的方法切实可行,可用于芒果皮渣多糖的脱蛋白和脱色。     

拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺优化及体外清除自由基能力

以加酶量、酶解温度、pH值、酶解时间为影响因素,以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,通过正交试验优化拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺,并与三氯乙酸法、等电点法脱蛋白效果进行比较。同时对脱蛋白多糖的体外清除自由基能力进行研究。结果表明,拟目乌贼肌肉多糖脱蛋白最佳工艺条件为:加酶量3.0 g/100 m L、酶解温度53℃、p H 8.2、酶解时间1.5 h。此条件下蛋白脱除率为89.43%,多糖损失率为1.78%,优于三氯乙酸法和等电点法。清除自由基结果显示,多糖质量浓度为10 mg/m L时,酶法、三氯乙酸法和等电点法得到的脱蛋白多糖对羟自由基清除率分别为45.72%、38.72%和25.18%,相应的IC_(50)值分别为12.44、16.37、34.64 mg/m L;对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率分别为68.00%、30.08%和23.10%,相应的IC50值分别为7.62、16.71、28.96 mg/m L。3种脱蛋白方法所得拟目乌贼肌肉多糖清除自由基效果依次为:酶法三氯乙酸法等电点法。     

生姜多糖的提取及脱蛋白研究

以新鲜的生姜为试材,通过正交试验研究了生姜多糖的最佳提取方案,比较了三氯乙酸法、鞣酸法和Sevag法脱蛋白的效果.结果表明:在温度为60℃、固液比为1:10、时间为3h时,生姜多糖的提取率最高;以3倍体积95%的乙醇提纯处理多糖后,生姜多糖粗得率为20.43%±0.23%.脱除多糖中的蛋白质以鞣酸法较好,除蛋白后得到的多糖纯度为73.11%±0.05%.     

银杏落叶粗多糖除蛋白方法的筛选及优化

本文以除蛋白率和多糖损失率为指标,比较了Sevage法、TCA法、等电点法和酶法清除银杏落叶粗多糖中蛋白的效果,筛选出最优除蛋白方法,并寻求银杏落叶粗多糖除蛋白的最佳工艺。结果表明,酶法和等电点法都为除蛋白较好方法,并优化酶-等电点结合法除蛋白的最佳工艺条件为:酶添加量为0.90%(以底物计算),酶解时间为1.1 h,酶解温度46 ℃,酶解pH为4.7。在此条件下,除蛋白率92.73%±0.13%,多糖损失率9.28%±0.12%。此方法除蛋白率较高,多糖损失率较低,为多糖在食品领域中的利用提供实验依据。     

古尼虫草多糖提取分离及初步分析

本文用30%乙醇溶液作提取剂,从古尼虫草菌丝体中提取多糖,提取液经去脂、去蛋白、醇析后得两种粗多糖CPS-50,CPS-70.利用DEAE-Sephadex A-25柱色谱对两种粗多糖进行分离纯化,得纯多糖CPS-1,CPS-2.苯酚-硫酸法测定糖含量,紫外光谱分析证明其纯度,红外光谱显示其具有多糖类的特征吸收峰.多糖降解后经薄层分析表明,降解的虫草多糖由葡萄糖或(和)甘露糖组成.     

酵母蔗糖酶的提取方法

采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶,经质量分数50%的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶。比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究。纯化的酶经等电聚焦测定,等电点为5.6,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60kD。以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013mol/L。结果显示3种提取方法各有优劣,冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。其中SDS抽提法的效率最高,加之其操作简便,更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。     

超高压射流技术对白酒的催陈作用

目的:研究超高压射流技术对白酒的催陈作用。方法:用超高压射流(50、100、150、200、250、300MPa)处理新酒,以总酸、电导率、异戊醇/异丁醇、四大酯为指标与常压(0.1MPa)下的新酒对比,并将各酒样存放1个月,检测各项指标用以对比。结果:随着压力的上升,总酸、电导率、乳酸乙酯增加,异戊醇/异丁醇在适宜范围内稍有上升,乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯减少,基本与自然放置趋势一致;放置1个月后各个压力下的总酸、电导率、乳酸乙酯均高于刚处理时,异戊醇/异丁醇在适宜的范围内也均高于刚处理时,乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯均低于刚处理时。结论:超高压射流技术对白酒的催陈作用显著,是一种经济有效的催陈方法。     

茯苓提取物参与灰树花液态深层发酵及对其活性物质产量的影响

中药茯苓提取物参与灰树花液态深层共发酵,进而探究不同溶剂提取的、不同添加比例的茯苓提取物对灰树花活性物质产量的影响。结果表明,添加5 g/L的茯苓醇提液和7 g/L的茯苓水提液时,均能够提高灰树花的生物量及多糖、总黄酮、蛋白的含量。相比于空白对照组,在最适醇提物和水提物添加量下的菌丝体生物量分别提高了24.28%和29.04%,具有显著促进作用(P<0.05)。5 g/L醇提物添加条件下的胞外多糖、胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白组与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了17.8%、30.29%、8.32%、10.13%、10.49%和10.24%。7 g/L水提液添加条件下胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了19.8%、3.16%、9.29%、10.24%和8.78%。表明添加一定量的茯苓提取物能够在一定程度上增加灰树花菌丝体的生长和活性代谢产物的含量,并且对多糖的产量影响尤为明显。     

蚕蛹多糖脱蛋白方法研究

以蛋白去除率和多糖损失率为指标,比较Sevag法、三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-Sevag联用法和木瓜蛋白酶-TCA联用法脱除蚕蛹多糖蛋白的效果。结果显示：木瓜蛋白酶-TCA联用效果最好,其脱蛋白的最佳条件为木瓜蛋白酶用量[E]/[S] 2.0%、酶解温度50℃、酶解反应1.5h、采用TCA法除蛋白1次,此时蛋白去除率为97.98%,多糖损失率为18.76%;紫外光谱扫描定性实验显示脱蛋白的多糖在260～280nm处只有少量吸收,表明大多数蛋白已去除。木瓜蛋白酶-TCA联用法是一种有效的多糖脱蛋白方法。     

酸浆果多糖不同提取工艺研究

本文讨论了酸浆果多糖的提取方法,实验结果表明:热水提取法在90℃时,加水15倍,浸提6h时,多糖提取率最高,可达2.783%;用超声波提取技术浸提,以功率300W,超声时间25min,料液比1:15(W:V),提取率最高为3.670%;酶法提取多糖,选用木瓜蛋白酶提取效果最好,提取率可达9.588%,但对多糖结构有影响;在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,可大大提高除蛋白率;脱色选用大孔吸附树脂LSA-8,可有效提高脱色率和多糖保留率。     

快速甲酯化-气相色谱法测试油脂组成

针对油脂脂肪酸成分的测定,建立了一套以四氢呋喃为共溶剂,经甲酯化后以气相色谱测定各甲酯含量,确定油脂中对应脂肪酸三酰甘油含量的快速甲酯化-气相色谱分析的的方法。该法可有效提高甲醇/油脂体系甲酯化反应速率和油脂转化率,提升分析测试速率和准确性,实现油脂成分快速测定。结果表明,本方法线性关系良好,精密度高,相对偏差RSD≤2.02%,四氢呋喃不影响气相色谱分析结果,3种典型组分3种不同浓度加标回收率在96.14%~103.45%之间,甲酯化过程三酰甘油转化率可达95%,可以准确的测定甲酯化反应液中各脂肪酸组成的含量。     

膜分离与醇沉技术纯化猴头菇粗多糖的比较

研究膜分离和醇沉两种技术对猴头菇粗多糖分离效果及其抗氧化活性的影响。以猴头菇子实体为原料,通过热水浸提后分别用醇沉、纳滤、纳滤＋醇沉、微滤＋纳滤、微滤＋纳滤＋醇沉5 种方法得到猴头菇粗多糖,分别记为A-He P、B-He P、C-He P、D-He P和E-He P。比较5 种方法对猴头菇粗多糖的分离纯化效果、理化性质和抗氧化活性的差异。结果表明,微滤＋纳滤技术分离纯化效果较好,其粗多糖得率为10.08%,纯度为43.01%,提取液中80.34%的多糖得到保留。经傅里叶变换红外光谱分析,5 种工艺处理获得的粗多糖样品均具有典型的吡喃型葡聚糖和β-型糖苷键吸收峰。5 种处理获得的粗多糖样品中均含一定量的蛋白质,且B-He P的蛋白质量分数高于C-He P,说明微滤处理可以除去部分蛋白而提高多糖的纯度。还原力、·OH、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除结果表明,5 种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,且D-He P的抗氧化能力最佳。