玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

玉米赤霉烯酮是一种具有雌激素作用真菌毒素,主要污染玉米、麦类、谷物等,严重影响农业经济及人类健康,因此有必要研究能准确、灵敏检测玉米赤霉烯酮方法。该文对玉米赤霉烯酮检测方法进行综述。     

玉米赤霉烯酮生物降解研究进展

玉米赤霉烯酮是一种由镰刀菌产生的具有雌激素作用的真菌毒素,是世界上污染范围最广的一种镰刀菌素.由于物理、化学脱毒法存在较大弊端,生物去毒方法因其特异性、高效性及环境友好而日益被科学界所关注.目前玉米赤霉烯酮生物降解主要是微生物降解作用,本文紧跟国内外玉米赤霉烯酮的生物降解情况,文章介绍了降解菌株的种类,降解能力和最佳降解条件,包括降解产物毒性,降解酶基因的发掘,以及降解菌株和酶的应用方向及前景.     

玉米油中玉米赤霉烯酮的ELISA测定

用间接竞争酶联免疫分析法（ELISA法）对3种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留进行了测定,以评价试剂盒的性能。结果表明,标准曲线线性方程y=-2.2x+0.66,相关系数r为0.9974,IC50为0.29 μg/kg,线性范围为0.05~4.05 μg/kg,灵敏度为0.05 μg/kg,添加回收率均大于85%。该法测定玉米赤霉烯酮灵敏度高,重复性好,特异性高,适合用于检测各种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留。     

粮油作物中玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

玉米赤霉烯酮是一种具有雌激素样活性的非甾体类真菌毒素,主要通过被污染的谷物、肉及奶制品等进入人体,危害人体生殖系统的发育.快速、灵敏、准确的玉米赤霉烯酮检测方法是近年来新兴的检测手段.就目前国内外玉米赤酶烯酮的常用检测方法进行了概述和比较,重点阐述相关方法的检测原理及最新研究进展,并对玉米赤酶烯酮检测技术的发展提出展望...     

玉米赤霉烯酮降解的研究进展

真菌毒素广泛存在于世界各地的谷物及其副产物当中.玉米赤霉烯酮(Zearalenone)作为镰刀霉毒素的代表,是影响食物安全的重要因素之一.传统的毒素清除方法包物理和化学方法.物理方法能部分清除毒素,但易破坏食物的营养物质,化学方法随着化学试剂的添加会引入不确定的危害因素.生物降解作为目前的研究热点,可在温和条件下微生物将毒素转化为无毒产物.报道了物理、化学和生物方法清除玉米赤霉烯酮的研究进展,重点对生物降解进行了综述.     

玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA方法的建立

本研究以玉米面为例,建立了玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA (ic-ELISA)方法.采用棋盘滴定法确定抗原和单抗的最佳工作浓度,并确定了抗原37℃包被1h、不封闭、酶催化底物作用时间15 min的反应条件进行检测.该方法的检测范围(IC20～IC80)为11 ～292 pg/mL,检测限(IC10)为6 pg/mL.玉...     

玉米样品前处理方法和掩蔽剂对ELISA检测玉米赤霉烯酮的影响

探讨粉碎时间、提取剂、掩蔽剂质量分数等因素对酶联免疫吸附分析（enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA）法检测玉米赤霉烯酮的影响。结果表明,玉米样品粉碎时间180 s以上、70%甲醇溶液为提取剂、添加0.025%鱼皮胶的磷酸盐缓冲液为掩蔽剂时,检测结果最为稳定。本实验结果对高稳定性玉米赤霉烯酮检测ELISA试剂盒的开发具有参考价值。     

竞争性酶联适配体可视化检测玉米赤霉烯酮

建立一种基于竞争性酶联适配体检测食品中玉米赤霉烯酮的可视化分析方法.将生物素标记的玉米赤霉烯酮适配体通过生物素-亲和素连接固定在微孔板上,玉米赤霉烯酮适配体的互补链(cDNA)与辣根过氧化物酶(HRP)连接形成cDNA-HRP信号探针,cDNA-HRP信号探针和靶标竞争与适配体结合,加入TMB显色液和硫酸终止液后,即可...     

竞争性酶联免疫法快速检测高产奶牛精料补充料中玉米赤霉烯酮

目的 建立竞争性酶联免疫方法检测饲料中玉米赤霉烯酮的分析方法。方法 样品经过60%的甲醇溶液提取, 提取液经过离心后, 取25 ?L提取液, 加入475 ?L稀释缓冲液混合后即为试样液, 取50 ?L试样液采用酶联免疫吸附方法进行检测。在450 nm波长处检测吸光度值。结果 本方法在3 h内完成了饲料中玉米赤霉烯酮含量的测定。在加标浓度为100、200和500 ?g/kg的加标水平下, 玉米赤霉烯酮酶在饲料中的加标回收率为99.5%~122.1%, 变异系数为1.4%~3.0%。结论 该方法快速、准确、灵敏, 适用于饲料中玉米赤霉烯酮的快速筛查检测。     

化学发光酶免疫法检测玉米中玉米赤霉烯酮

应用抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,以辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种简便、快速、高特异性的间接竞争化学发光酶免疫法用于检测玉米中的玉米赤霉烯酮。所建立的方法分析灵敏度为0.09 ng/mL,批内变异系数小于9.1﹪,批间变异系数小于14.7﹪,样品的加标回收率为79.6﹪～97.6﹪,所建立的标准曲线相关系数为0.9884,检测线性范围为0.104～1.69 ng/mL,检测时间为60 min。     

酶联免疫吸附法快速检测饲料中赭曲霉毒素A

目的建立一种酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测饲料中赭曲霉毒素A快速的方法。方法样品采用60%的甲醇溶液提取,提取液经过离心、快速滤纸过滤后,用稀释缓冲溶液按10倍的比例对提取液进行稀释即为试样液,采用酶联免疫吸附方法进行检测。结果在加标浓度为25、50和100μg/kg的加标水平下,赭曲霉毒素A在饲料中的加标回收率为88.4%~134.6%,变异系数为3.5%~6.9%。抽取10份样品进行检测,赫曲霉毒素A含量在14.1~38.2μg/kg。符合国家的标准GB 13078-2017对饲料中赫曲霉毒素A含量的规定。结论本方法灵敏度高、快速简便,适用于饲料中赭曲霉毒素A的快速批量检测。     

基于局域表面等离子共振的比色法用于食品质量安全检测的研究进展

局域表面等离子体共振(LSPR)是表面等离子共振(SPR)中的一种特殊情况,是光线入射到金属纳米颗粒上引起的共振现象,可被用来实时跟踪生物分子之间在天然状态下的相互作用。这种方法对生物分子无任何损伤,且不需任何标记物。LSPR比色法灵敏度高、多色变化,可用于制作试纸条、试剂盒从而引起人们的广泛关注。本研究解释了LSPR的基本原理以及比色技术的概况,回顾了近5年基于LSPR的比色技术在食品安全方面的应用。最后,对基于LSPR生物传感器比色法的发展和应用以及研究领域所面临的挑战和未来的发展方向进行了讨论。     

表面等离子共振法传感器快速检测农药残留的研究进展

为确保农产品质量安全, 发展高灵敏检测技术对农药残留进行检测尤为重要。本文简要介绍了表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)传感器的原理和增强SPR检测灵敏度的方法, 重点综述了国内外应用SPR传感器检测农药残留的研究现状, 分析了SPR检测农药残留的优势和发展趋势。     

Casein interactions studied by the surface plasmon resonance technique

Surface plasmon resonance technique was investigated for the first time to study the apparent hydrophobicity and association properties of the major bovine caseins: alpha(s)-(alpha(s1)- and alpha(s2)-caseins in a 4:1 proportion), beta-, and kappa-caseins. The apparent hydrophobicities of the caseins were evaluated by a new method based on the binding level of casein on a hydrophobic sensor chip, and kinetic and equilibrium affinity constants were determined for the following casein interactions: alpha(s)/alpha(s), alpha(s)/beta, alpha(s)/kappa, beta/beta, and beta/kappa, using a sensor chip modified with covalent immobilized caseins. The study by surface plasmon resonance technology of these casein interactions under different conditions (pH, ionic strength, calcium concentration, chemical modification) demonstrated that, at neutral pH, electrostatic repulsive forces play an important role since an increase in ionic strength of the medium resulted in a stronger interaction. When charge repulsions were reduced by either acidification, increase in ionic strength, or dephosphorylation, casein interactions were reinforced, presumably due to weak attractive forces. Moreover, in this molecular model, we showed that addition of calcium greatly increased the binding response between the most phosphorylated caseins and that the added calcium (2 mM) participated directly in the formation of bridges between the phosphate groups of the casein molecules.     

表面等离子体共振免疫传感器用于快速检测微囊藻毒素的研究

针对现有微囊藻毒素（MC-LR）检测方法操作复杂、因标记而污染环境、仪器贵重,不利于现场快速检测等问题,将自行研制的表面等离子体共振（SPR）生物芯片检测仪应用于微囊藻毒素的检测,提出抑制型SPR生物芯片快速检测痕量微囊藻毒素的方法。采用该方法分别对浓度为3.5、2.5、1.5、1、0μg/L的MC-LR样品进行了检测。结果表明:该方法检测限小于1μg/L,可满足世界卫生组织（WHO）对于饮用水和我国地表水环境质量标准中MC-LR最低含量检测的需求。该方法完成一个样品检测耗时约8 min,相比于高效液相色谱法（HPLC）和酶联免疫吸附法（ELISA）等传统检测方法,快速定量是其最大的优势,可用于食品质量监控和现场实时检测。      

酶联免疫吸附法在食品安全性指标检测中的 研究进展

随着我国社会经济的快速发展和人们生活水平的提高,食品安全问题日益成为人们关注的焦点。酶联免疫吸附法是在免疫学和细胞工程学基础上发展的一种微量检测技术,具有操作简便、灵敏度高等优点。本文总结了酶联免疫吸附法在农药残留、兽药残留、致病微生物、生物毒素、非法添加的非食用物质、重金属、过敏原和转基因食品等检测中的研究进展,评价了该检测方法的优缺点,并对其未来的发展方向进行了展望和建议。     

食品安全快速检测技术的应用研究进展

近些年我国已建立起强大的食品安全监督检测管理体系, 对食品生产、加工、流通到最终消费的各个环节进行监督, 但却不能做到完全杜绝食品安全问题, 且目前的监管体系很难覆盖众多的食用农产品、散装食品、餐饮食品以及现场制售食品。食品快检技术主要针对这类食品, 采用快速检测方法, 对这类食品中某种特定物质或指标进行快速定性定量检测。基于此, 本文介绍了目前国家发展食品快检技术的相关政策, 并从化学比色法、酶联免疫吸附法、胶体金免疫层析法、电化学分析法、生物发光几个方面, 探讨了近年来在食品快检技术的应用进展以及存在的问题, 并对未来快检技术的发展方向提出几个展望。     

SPR技术检测奶粉中生物素

目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中生物素的方法。方法将生物素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的生物素结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的生物素,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standarddeviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为8.75%,该方法的检测限为0.1μg/100g,回收率为80.4%~91.2%。10个牛奶产品中生物素含量全部在固定的允许范围内。所建立的方法可以在4 h内完成样品的前处理和检测。结论该方法是一种简便、快捷的定量检测方法。     

Determination of concentration and binding affinity of antibody fragments by use of surface plasmon resonance

An assay method using a surface plasmon resonance (SPR) biosensor has been developed that allows quantitative measurement of the specific antibody concentration in crude materials. By injecting non-labeled antibody samples onto a biosensor surface on which antigen was immobilized at high densities, the concentration of active antibodies can be accurately measured. To clarify applicability of this method to pharmacokinetic studies, the concentration of active antibodies in mouse plasma was measured for 4 h after injection of antibodies in mice. Although this period of measurement might be insufficient for determining the pharmacokinetics of blood pool clearance, this method has some advantages over conventional methods in measurement of single-chain antibody fragment (scFv) concentrations. Using the SPR biosensor, scFv and antibodies without epitope tag peptides were easily detected in real time, requiring as little as 20 mul of blood sample. Moreover, from the apparent dissociation rate in the dissociation phase of the sensorgrams, we could identify whether the antibody fragments existed as bivalent or monovalent in animal blood. We also evaluated the antigen binding activity of the scFvs against human CD47 and found scFvs had slightly weak affinity to their antigen (K(D), about 10 nM) compared with F(ab')2 and Fab' fragments (K(D), about 3-4 nM). This assay method promises to be a convenient tool for quality control, screening, and simple pharmacokinetic analysis of antibody fragments and other recombinant proteins not having epitope tags.