烟草野火病拮抗生防菌的筛选、鉴定与应用

为筛选出烟草野火病拮抗生防菌,开发防治烟草野火病的新型生物农药,降低烟叶农药残留,提高烟叶的安全性,从烟田采集的健康烟草叶片经平板划线法分离和纯化后得到287个细菌分离物,从中筛选到14个对烟草细菌性野火病有抑制作用的拮抗生防菌,测得其中具有较强抑制作用的菌株抑菌带宽度为9.3 mm,经16S rDNA序列鉴定,该菌属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。烟草叶片经该拮抗菌液诱导后接种,叶片内主要防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性均显著增强。防效测定表明:施用生防剂后接种野火病菌的处理,拮抗菌株防治效果达97.54%,对照农用链霉素防治效果为41.44%。先接种野火病菌后施生防剂的处理,拮抗菌株防治效果达51.40%,对照农用链霉素防治效果为50.69%。说明该拮抗菌株的预防效果高于当前生产上使用的农用链霉素,且其预防效果优于治疗效果。     

枯草芽孢杆菌BC80-6发酵条件的优化及对烟草根黑腐病的控病效果

探究了3种枯草芽孢杆菌BC80-6处理液对烟草根黑腐病菌菌丝生长、孢子萌发的抑制作用,对其发酵条件进行了优化,并开展田间控病防效试验。结果表明:10~(-1)倍枯草芽孢杆菌BC80-6的活菌液对烟草根黑腐病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果最好,抑制率分别为93.2%、95.3%。通过单因素试验及正交试验对菌株BC80-6培养基的配方进行优化,确定培养基的最佳配方为蔗糖1.5%、酵母浸出物0.5%、硫酸镁0.06%(质量体积比)。最佳发酵条件:发酵温度28℃、时间24 h、初始pH 6.5、摇床转速180 r/min、接种量5%、装液量40 mL(250 mL三角瓶)。枯草芽孢杆菌活菌液对烟草根黑腐病的田间防效为88.19%。     

PF7-5对烟草野火病的抑制及田间防治效果

为验证荧光假单胞杆菌PF7-5(CGMCC No.2069)对烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的生防效果,设置了PF7-5对烟草野火病菌的室内抑菌及田间防治试验.结果表明,稀释5倍的PF7-5代谢产物室内对烟草野火病菌的抑制效果达96%,PF7-5活菌田间抑菌效果达91%.证实PF7-5对烟草野火病具有显著的拮抗作用和防治效果.     

五个烟草野火菌株的生理小种鉴定

  背景和目的  针对目前国内尚未以国际通行的抗性鉴别宿主区分烟草野火菌的生理小种, 首次基于抗性遗传规律鉴定了所收集野火菌株的生理小种归属。  方法  通过大田喷雾接种、温室浓度梯度接种、无损伤接种及同一叶片上的对比试验等4个平行试验, 将ATCC11528等5个野火菌株接种到黄花烟等6个不同抗源遗传背景的烟草上, 根据不同试验出现的不同病理反应对各野火菌株进行生理小种分类。  结果  所收集的5个野火菌株经多轮分子标签鉴定纯化, 可用于接种试验。野火菌株D151、ZD和M109、ATCC11528和W11分别被鉴定为0、1、3等3个小种。  结论  采用国际通行的抗性鉴别宿主和4个平行接种试验区分了5个野火菌株的生理小种归属。为培育野火菌小种专化抗病烟草和克隆烟草中小种专化抗病基因提供了重要基础。      

拮抗菌AM6代谢产物防治烟草赤星病试验

为开发更多的生物农药,进行了球孢链霉菌AM6代谢拮抗物质防治烟草赤星病试验。采用不同的施用浓度、不同的施用次数在自然发病条件下进行田间小区防效试验。结果表明,含有AM6拮抗物质的制剂喷雾烟草叶片对烟草赤星病有较好防治效果。其防效随制剂中拮抗物质含量的增加而提高,以100倍液施用2次防效较好,田间防效为80.3%;400倍液施用1次、2次和3次的防效分别为46.9%、64 9%和69.3%。含有AM6拮抗物质的制剂对烟草无明显药害。     

生防菌株LB-1对烟草白粉病的抑制效果及对病菌孢子萌发的影响

  目的  为检测近缘毛壳菌（Chaetomium subaffine）LB-1对烟草白粉病的抑制效果。  方法  以中烟90为供试烟草品种,分析了LB-1对烟草白粉病的抑制效果及对病菌分生孢子萌发的影响。  结果  LB-1菌悬液叶面处理对供试烟草盆栽苗和离体叶段白粉病的发生无明显影响,但LB-1发酵液叶面喷施盆栽苗和浸蘸处理离体叶段均能显著抑制烟草白粉病的发生,防效和抑制率分别为44.90%和53.11%;显微镜检发现,LB-1发酵液能够引起白粉病菌孢子的皱缩和畸形。  结论  近缘毛壳菌株LB-1可用于防治烟草白粉病。      

寡雄腐霉与氟噻唑吡乙酮协同防治烟草黑胫病研究

为了探究寡雄腐霉(Pythium oligandrum,PO)与氟噻唑吡乙酮(Oxathiapiprolin,OX)联合防控烟草黑胫病的可行性,采用菌丝生长速率法和平板对峙法分别测定了PO和OX的生物相容性,及OX、PO和OX+PO对黑胫病菌的毒力,并通过盆栽试验分别测定了OX、PO和OX+PO对烟草黑胫病菌的防效,以及对烟草幼苗的促生效应。生物相容性试验结果表明,不同浓度OX处理下,PO的生长速率与空白对照无显著差异。室内毒力结果显示,8.0×10^-3 mg/L OX对烟草黑胫病菌的抑制率为91%,EC₅₀为2.19×10^-3 mg/L,而OX(1.0×10^-3 mg/L)与PO联用的抑制率达96.31%。盆栽试验结果表明,OX+PO处理对烟草黑胫病的防效最高(84.57%),比OX(77.76%)或PO(76.54%)单独处理防效分别提高8.76%和10.49%。OX和PO联用对烟草促生效果显著,其株高、茎粗、叶长、叶宽分别比对照处理提高了57.10%、20.21%、33.62%、35.08%。...     

农药混配防治烟草病毒病田间试验

为了较有效地防治烟草病毒病,于2003年进行了喷施农药混配剂(1 5%"植病灵"800倍 氨基酸液肥300倍,"病毒灵"1000倍 "保得"生物肥1000倍)及抗病毒药剂("毒消"800倍,1 5%"植病灵"800倍)田间防效试验。结果表明:1 5%"植病灵"800倍 氨基酸液肥300倍在玉溪市红塔区和华宁县试验点发病盛期防效分别为72 50%和64 18%,防治效果相对较好;其次是"毒消"800倍在红塔区和华宁县试验点防效分别为64 61%和57 21%。     

不同植保施药器械的喷雾效果及对烟草赤星病的防效

为探究不同植保施药器械的喷雾效果和对烟草赤星病的防治效果，在烟田对背负式电动喷雾器与不同喷头组合和植保无人机在不同飞行高度喷施药液的雾化效果、作业效率及对烟草赤星病的防治效果进行评价。结果表明，背负式电动喷雾器与多连杆鱼骨式8喷头组合的药液附着率（68.33%）最高，药液在烟株上、中、下部叶片上均分布均匀，相比背负式电动喷雾器与圆锥空心双喷头组合可减药33.23%，相比背负式电动喷雾器与圆锥空心单喷头组合的绝对防效为18.52%，且以中挡位喷雾效果最佳。烟草旺长期至成熟期时，使用背负式电动喷雾器与多连杆鱼骨式8喷头组合和植保无人机在2.0 m飞行高度喷施药液，药液在烟叶上的雾滴分布均匀度和覆盖率分布均匀度均较高，平均雾滴粒径在125.00～148.30μm之间，均符合药剂喷雾防治烟草病害的最佳生物粒径标准，且对烟草赤星病具有较好的防治效果，相对防效分别达33.26%和29.36%，作业效率分别较背负式电动喷雾器与圆锥空心双喷头组合提高了1.20倍和36.24倍。     

申嗪霉素对烟草黑胫病的毒力及防治效果

为探明申嗪霉素防治烟草黑胫病的潜力,在室内离体条件下测定其对烟草黑胫病菌菌丝生长、孢子囊形成和游动孢子释放的毒力,并通过温室盆栽和大田药效试验明确其对烟草黑胫病菌的防效及对烟草生长的影响。结果表明,申嗪霉素对沂水烟区黑胫病菌孢子囊的形成和游动孢子的释放抑制效果最好,EC₅₀值分别为0.31和0.35 μg/mL。室内防效结果表明,1%申嗪霉素悬浮剂（15 g a.i./hm²）对烟草黑胫病的防效为84.37%,显著高于25%甲霜灵可湿性粉剂（56.33%）和50%烯酰吗啉可湿性粉剂（80.55%）,而田间药效试验结果与室内防效基本一致,在冕宁和诸城两地1%申嗪霉素田间防效分别为90.49%和82.93%,显著高于对照药剂甲霜灵（71.89%,38.87%）和烯酰吗啉（78.42%,69.01%）。除此之外,申嗪霉素较甲霜灵和烯酰吗啉在提高株高、茎粗、有效叶片数及光合速率等指标效果更好。可见,申嗪霉素是防治烟草黑胫病的有效制剂,可作为甲霜灵和烯酰吗啉的轮换药剂使用。     

3种防护剂对烟草甲和烟草粉螟的防治效果

选择"凯安保"、自配药剂(以拟除虫菊酯为主)、"列喜镇"3种烟叶防护剂分别在厦门、昆明卷烟厂进行了烟草甲、烟草粉螟的防治试验.结果表明:(1)仓库空间采用超低容量喷雾杀虫法,自配药剂和凯安保的杀虫效果较好,当自配药剂和凯安保的使用剂量分别为3.5 mg/m3、4.0 mg/m3时,对烟草甲成虫的相对防治效果和杀灭率均达97%以上;(2)采用常规喷雾对地面、墙壁消毒法,自配药剂、"凯安保"的使用剂量分别为8.0 mg/m2和10.0 mg/m2时,对接种的烟草甲成虫在24h时的杀灭率达100%,而"列喜镇"的使用剂量80.0mg/m2,48h时烟草甲的死亡率只有80.8%;(3)"凯安保"和自配药剂在使用剂量分别为5.0 mg/m3、4.0 mg/m3时,对烟草粉螟的空间相对防效可达90%以上,"列喜镇"在使用剂量为12.0 mg/m3时,其相对防效为82.1%.     

中微量元素对烟草野火病的控制效果及其对烟草生物学性状的影响

通过设计小区试验,选择适当的时间对烟草必需的8种矿质营养元素(钙、铁、硼、锰、锌、钼、铜、镁)进行叶面喷施,研究了不同营养元素对烟草野火病的控制作用及其对烟草生物学性状的影响。结果表明,处理3(H3BO3)和处理6(Na2MoO4)对烟草野火病具有较好的防控效果分别为60.14%和71.76%;同时它们具有促进烟草叶面积增加的作用。     

病毒抑制剂对烟草普通花叶病防治效果试验

为了筛选防效较好的病毒抑制剂,于2002年在中国烟草东北农业试验站进行了5种病毒抑制剂防治烟草普通花叶病田间试验,采用YC/T40-1996烟草病害药效试验方法计算病情指数和防治效果。试验结果表明:3.95%"病毒必克"500倍液、22%"金叶宝"400倍液、24%"毒消"1000倍液、"净土灵"600倍液和"消毒立逃"800倍液防效分别为62.47%、57.83%、57.60%、46.42%和39.40%。     

烟草赤星病拮抗芽胞杆菌的筛选、鉴定及促生防病作用

为获得对烟草赤星病菌具有较好生防效果的芽胞杆菌,从福建、山东、云南等地烟草叶片中分离得到187株菌株,对烟草种子进行浸种处理,通过测定发芽率筛选到能够促进种子萌发的6株菌株;利用平板拮抗法、离体叶片接种法、温室生测发现FJ1、FJ1-6能促进烟草生长且对赤星病防效较好;通过生理生化和分子生物学鉴定,FJ1为萎缩芽胞杆菌（Bacillus atrophaeus）,FJ1-6为贝莱斯芽胞杆菌（Bacillus velezensis）。防病特性研究发现,两菌株含有参与脂肽类抗生素Surfactin、Fengycin和Iturin合成的基因且脂肽类粗提物对赤星病菌丝生长有明显的抑制作用,抑制率分别为56.9%、65.0%。综上,FJ1、FJ1-6具有优良的促生防病特性及显著的促种子萌发效应,可应用于烟草育苗及赤星病的防治。     

蝇蛆低聚几丁糖诱导烟株抗黑胫病研究

对蝇蛆低聚几丁糖防治烟草黑胫病的作用机制进行了初步研究.烟苗经过蝇蛆低聚几丁糖处理后,再接种烟草黑胫病菌,测试结果表明,处理烟草植株对黑胫病产生抗性.在0.1～1.5 mg/mL浓度范围内,随着浓度增高诱导抗性效果增强,当浓度达1.0 ms/mL时,诱导抗.性相对防效为92.21%,与浓度1.5 mg/mL的处理间差异不显著.同时可导致烟草叶片苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活性不同程度地升高,分别在第8天、第5天和第3天达到高峰,比对照分别提高了94.62%、160.44%和89.76%.     

宜宾烟区烤烟野火病的致病力分化、生物学特性及抑菌药剂筛选

为了更有效地防治烟草野火病,对采自宜宾市烤烟种植区的具有典型野火病症状的烟叶样品进行了组织分离、培养和形态特征观察。采用针刺结合无针头注射接种法测定分离菌株的致病性,同时采用病菌生长速率法测定了不同致病力的菌株pv-xs-y-2(强)、pv-xt-y-2(中)和pv-gy-y-1(弱)的生物学特性及4种杀菌剂对强致病力菌株pv-xs-y-2的室内抑制效果。结果表明:14个菌株的形态特征均与烟草野火病病菌的形态特征一致,但各菌株间的致病力有明显的差异,平均病情指数为23.33~72.22。聚类分析结果显示,14个菌株在鉴别寄主(K326)上的致病力划分为强(病指为60~72.22)、中(病指为34.44~53.33)和弱(病指为23.33)3种类型,其中以中等致病力类型的菌株为主,占测试菌株的71.43%。在人工培养条件下,病菌的最适生长温度为28℃,pv-xs-y-2、pv-xt-y-2和pv-gy-y-1菌株的OD_(600)值分别为1.285、1.105和0.977;最适生长湿度为100%,pv-xs-y-2、pv-xt-y-2和pv-gy-y-1的OD_(600)值分别为0.694、0.555和0.505;最适pH值为7,说明野火病菌适宜在中性环境中生长。不同药剂对野火病室内毒力的测定结果依次为3%噻霉酮4%春雷霉素72%硫酸链霉素20%噻菌铜,3%噻霉酮的有效中浓度(EC_(50))为9.401μg·mL~(-1)。     

烟草青枯病颉颃细菌的筛选及其防病效果研究

从安徽、浙江等地的烟草、蕃茄和辣椒等茄科作物根标、根围土壤和病、健植株组织中,分离纯化到168个细菌菌株,通过室内异步培养法和平板扩散法,筛选出17个对烟草青枯病菌具有一定颉颃作用的菌株,其中,AQB-46和AQB-33两菌株抑菌能力最强,抑菌圈直径分别为33.7mm和30.6mm。盆栽防病结果表明,这2个菌株对青枯病的防治效果在接种青枯菌后的30d内一直维持在54.2%~64.7%。菌株AQB-62室内抑菌试验效果明显低于AQB-46和AQB-33,但盆栽防病的效果在接种后的20d内也一直维持在49.9%~53.0%的水平。接种前3d喷施颉颃菌的各处理,其防病效果远高于接种后3d喷施颉颃菌的各处理,前者防效最高为64.7%,而后者最高仅为15.0%,说明颉颃菌对烟草青枯病的防治主要表现为预防。此外,颉颃菌的防病作用主要表现为减轻发病程度,而对发病率没有影响。颉颃菌除具有直接的抑制青枯菌定殖、繁衍、扩展外,有的菌株如AQB-62还具有一定的诱导抗性作用。AQB-46,AQB-33和AQB-62等3个菌株可望研制成生物农药,使之更有效地防治烟草青枯病。      

烟草青枯病拮抗菌的筛选、鉴定和防病潜力评价

为进一步丰富烟草青枯病的生防资源,通过平板稀释法,对贵州省黔南州4个烟区的健康烟株及根际土壤进行烟草内生细菌及根际细菌的分离纯化,共得到烟草内生细菌103株,根际细菌73株。利用抑菌圈法,筛选出抗青枯病菌的内生细菌LSN02和根际细菌LLGJ04,其抑菌圈直径分别为29.96和38.65 mm。进化分析结果表明,LSN02和LLGJ04均属于芽孢杆菌属且具有趋化性。盆栽试验中,LSN02和LLGJ04可有效增强烟株对青枯病的抗病能力。用中浓度(1×10~8cfu/mL)和高浓度(2×10~8cfu/mL)的LSN02菌株处理烟株时,烟草青枯病的病株率显著降低。     

烟草根际土壤浸出液刺激烟草疫霉产孢和接种研究

通过烟草疫霉游动孢子接种处理,研究了烟草黑胫病菌的产孢条件和人工接种方法。结果表明:根际草炭土和田间肥沃土浸出液均能刺激黑茎病菌产生孢子囊和游动孢子,施加40μL烟草根际草碳土浸出液和60μL田间肥沃土浸出液,两种处理的孢子囊最高产量分别为1.43×104个/mL和1.06×104个/mL;2种土壤浸出液均在40μL处理时游动孢子的产量最高,分别为3.12×106个/mL和2.30×106个/mL。烟草黑胫病菌接种方法的比较结果表明,茎基部注射接种致病效果要明显优于灌根接种。     

利用微生物处理烟叶减少烟碱含量

(一) 本法是一种利用微生物处理来减少烟中烟碱含量的工艺.先将烟草在蒸气中蒸足时间使其水分至少达到15%;然后给每克重干烟草至少接种1×10~7个微生物细胞,通过一个生成3-丁二酸吡啶的生化机理作用有效地减少烟碱,控制接种后的烟草使保