低分子量褐藻多糖的制备及其活性分析

利用抗坏血酸协同过氧化氢法降解褐藻多糖,以DPPH自由基清除率为指标,通过工艺优化得到最佳降解条件,然后用超滤技术将降解产物进行分级,获得不同分子量组分,并分析其DPPH自由基清除率、保湿效果,酪氨酸酶抑制率等活性。正交试验结果表明,最佳降解条件为H₂O₂-V_C浓度20 mmol/L、降解温度45 ℃、降解时间3 h,在此条件下获得的降解产物的DPPH自由基清除率达到61.23%,降解产物得率为73.16%。电泳结果表明,降解后的褐藻多糖的条带明显出现在低分子量区。利用超滤系统将降解产物分级为<5 kDa、5~10 kDa、10~30 kDa、>30 kDa四个不同分子量段的组分,研究发现各分子量段之间的活性存在显著差异（P<0.05）,尤其<5 kDa组分（其主要成分为2.140×103 Da,占比29.6%）的活性最好,其DPPH自由基清除率为59.27%,60 h后保湿率为75.75%,酪氨酸酶抑制率为65.28%。与褐藻多糖相比,其糖醛酸含量稍有下降。本研究结果可为褐藻多糖在功能性食品等领域的应用提供理论依据。     

福建养殖仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺优化及其对过氧化氢诱导的血管内皮细胞EA.hy926损伤的保护作用

目的:优化仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺,并研究其对过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926损伤的保护效应。方法:以酶解产物的水解度、体外DPPH自由基清除率为指标,筛选出最适蛋白酶;在单因素实验基础上,选取温度、加酶量、pH作为影响因子,以体外DPPH自由基清除率为响应值,结合响应面试验优化酶解工艺条件;进一步探讨酶解多肽体外抗氧化活性。以MTS法检测低、中、高剂量组的仿刺参抗氧化多肽对H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,以MDA含量、SOD活力测定细胞氧化及抗氧化水平。结果:动物蛋白水解酶为最适蛋白酶,酶解工艺优化条件为:料液比1:20 g/mL、酶解时间2 h、酶解温度50℃、加酶量7000 U/g、pH7.5,该条件下制备的仿刺参多肽体外DPPH自由基清除率为68.81%,与模型预测值(68.35%),相对误差为1%,回归模型可靠。酶解多肽对DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)和ABTS自由基(ABTS+·)的半数抑制浓度IC₅₀分别是9.01、0.63、10.89和20.53 mg/mL,说明其具有较好的体外抗氧化活性。选取200 μmol/L浓度H₂O₂建立细胞损伤模型,与H₂O₂组相比,中、高剂量组仿刺参抗氧化多肽能明显抑制H₂O₂诱导的血管内皮细胞氧化损伤,降低MDA含量,提高SOD活力。结论:采用动物蛋白水解酶酶解优化工艺制备的仿刺参抗氧化多肽对人脐静脉内皮细胞EA.hy926具有显著的保护作用并呈显著的剂量-效应关系。     

海绵Hyrtios erectus抗氧化产物超声提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为探索海绵动物抗氧化提取物的提取工艺及提取物的抗氧化活性,以H. erectus海绵乙醇提取物的DPPH自由基清除率为响应值,分别考察超声温度、超声时间和超声功率3个影响因素,通过Box-Behnken响应面设计确定最佳超声提取工艺。以该工艺提取物为实验材料,分析其对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH的清除效果,通过构建H₂O₂氧化损伤模型研究提取物对氧化损伤L02细胞的活力和对H₂O₂氧化应激胞内ROS含量的影响。结果表明:可操作的最佳工艺为超声温度57℃,超声时间60 min,超声功率490 W,在此条件下,提取物DPPH自由基清除率为61.98%±1.52%,与预测值62.16%吻合度较好,该提取物对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH具有良好的清除效果,提取物处理组细胞活力均显著高于模型组(P<0.05),且细胞内ROS荧光强度均极显著低于模型组(P<0.01)。总之,该工艺提取物具有较广泛的抗氧化活性,对H₂O...     

沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究

目的:探讨沙棘多糖体外清除自由基及抗脂质过氧化作用。方法:采用体外抗氧化活性法测定沙棘多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力及沙棘多糖总还原能力;制备5%小鼠肝脏匀浆,通过模拟建立体外小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化模型、CCl₄体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、H₂O₂体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、Fe2+-V_C 体外诱导小鼠肝脏脂质过氧化模型,利用TBA显色法,观察沙棘多糖对脂质过氧化的抑制作用。结果:沙棘多糖对DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基都具有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为1.55、1.23、8.31 mg/mL,其浓度为2 mg/mL时,还原能力稍高于同浓度V_C。沙棘多糖对小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化及CCl₄、H₂O₂、Fe2+-V_C所诱导的肝脏脂质过氧化均具有抑制作用,其IC₅₀值分别为1.10、1.59、9.13、1.39 mg/mL。结论:沙棘多糖具有一定的抗氧化活性及抗脂质过氧化作用。     

低分子量酵母甘露聚糖的制备及其抗氧化性研究

首先采用高温水提法制备酵母甘露聚糖,然后分别采用微波降解法、超声波降解法、甘露聚糖酶法和H₂O₂降解法四种方法制备低分子量酵母甘露聚糖。对影响降解酵母甘露聚糖的因素进行了研究,并采用正交实验设计进行了工艺优化。同时对未经降解处理的甘露聚糖(YM)和所制备的低分子甘露聚糖(SYM)的体外抗氧化活性进行比较。结果表明,H₂O₂降解法的效果最好,其次是超声波降解法,而微波降解法和甘露聚糖酶法对酵母甘露聚糖几乎没有降解效果。H₂O₂降解法制备低分子量酵母甘露聚糖的最优工艺条件为:甘露聚糖浓度30 g/L、H₂O₂浓度10%、温度95 ℃、时间3 h。在上述工艺条件下,酵母甘露聚糖的重均分子量由76.52 kDa降低到8.07 kDa。抗氧化活性实验发现SYM对羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力均明显高于YM。     

椰子皮多糖的提取、结构表征及生物活性研究

以椰子皮为原料，在单因素试验的基础上，采用沸水浸提法优化椰子皮多糖的提取工艺。同时对椰子皮多糖进行紫外光谱、红外光谱、13C NMR和DEPT 135分析，并利用清除ABTS+自由基、DPPH自由基和O₂^-能力评价其体外抗氧化活性，同时也评价了体外抗HepG2增殖活性。结果表明，椰子皮多糖的最佳提取工艺条件为：浸提温度100℃，浸提时间3小时，料液比1∶5(w/w)，在此条件下椰子皮多糖提取率为4.73%。体外抗氧化试验表明，椰子皮多糖对ABTS+自由基、DPPH自由基和O₂^-均有一定的清除效果，随着椰子皮多糖浓度的增加清除能力逐渐增强，当多糖浓度为3.2 mg/mL时，其对ABTS+自由基、DPPH自由基和O₂^-的清除率分别达到89.58%、94.62%和95.21%，此时抗氧化能力与维生素C相当。与此同时，体外抗细胞增殖试验表明，椰子皮多糖对HepG2细胞显示出明显的抗增殖活性。     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

红枣多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性研究

本研究对红枣多糖进行羧甲基化修饰,探究羧甲基化修饰红枣多糖的结构特征及抗氧化活性变化。以红枣粗多糖为原料,采用Sevage法脱蛋白,大孔树脂AB-8脱色处理,对除杂后的多糖进行羧甲基化修饰。以羧甲基取代度为指标,通过单因素和响应面试验对NaOH浓度、一氯乙酸添加量及温度进行优化,以修饰前后多糖对DPPH、羟基自由基的清除能力及其还原力和对Fe2+的螯合能力为指标,探究羧甲基化修饰对红枣多糖抗氧化特性的影响。结果显示,羧甲基化修饰最佳工艺参数为:反应温度70 ℃,一氯乙酸添加量3.5%,NaOH浓度3 mol/L,此条件下羧甲基化红枣多糖分子修饰取代度高达1.157。浓度5 mg/mL时,羧甲基化修饰的红枣多糖DPPH和羟基自由基清除率达93.83%和44.7%,还原力和对Fe2+的螯合能力分别为0.462和44.05%。红枣多糖抗氧化性的显著提升表明羧甲基化修饰可改善多糖的抗氧化性,可为红枣多糖的深入研究提供一定的理论依据。     

红枣多糖及红枣硒多糖抗氧化活性的比较研究

采用85%乙醇溶液提取了红枣多糖并制备出红枣硒多糖,采用超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基的清除实验比较研究了红枣多糖和红枣硒多糖的抗氧化活性。结果表明:红枣多糖和红枣硒多糖均表现出了很强的抗氧化活性,且红枣硒多糖的抗氧化活性更强,二者对超氧阴离子、羟基自由基、DPPH自由基的半抑制浓度EC50分别为:102、81μg/m L;1 360、88μg/m L;51、79μg/m L。可见,研究红枣多糖和红枣硒多糖的抗氧化活性具有重要价值,可为开发出二者的功能产品提供理论支撑。     

柠檬皮中多酚的超声辅助提取及其抗氧化性研究

以柠檬皮为对象，采用超声辅助乙醇法提取多酚；化学法和H₂O₂损伤HepG2细胞氧化模型评价柠檬皮多酚提取物的抗氧化活性。结果表明，柠檬皮多酚的提取工艺为超声功率200 W、乙醇体积分数60%、超声温度55℃、料液比1:20(g/m L)、超声时间45 min，此条件下柠檬皮多酚得率为(1.76±0.12)%。柠檬皮多酚提取物具有DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基清除能力，显著抑制H₂O₂氧化损伤HepG2细胞，减少胞内ROS的生成，表现出较强的抗氧化性。